用于产生二肽衍生物的方法技术

本发明专利技术涉及新颖且改进的用于制造在此指定为苄基磺酰基‑Ser‑X‑4‑脒基苄基酰胺的式(I)的化合物或其盐的方法，其中R是C1至C6线性的或分支的脂肪族烃链，该脂肪族烃链任选地被C6至C10芳香族基团取代。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】专利技术简述本专利技术涉及新颖且改进的用于制造在本文中指定为苄基磺酰基-Ser-X-4-脒基苄基酰胺的式(I)的化合物或其盐的方法，式(I)：其中R是C1至C6线性的或分支的脂肪族烃链，该脂肪族烃链任选地被C6至C10芳香族基团取代。专利技术背景苄基磺酰基二肽衍生物例如苄基磺酰基-D-Ser-L-高Phe-(4-脒基-苄基酰胺)已经在先前被描述为强尿激酶抑制剂(WO2009/026949)。尿激酶(uPA)也称为尿激酶型纤溶酶原激活剂，其是多结构域丝氨酸蛋白酶(EC3.4.21.31)。uPA是411个氨基酸残基的蛋白质，其由三个结构域组成：生长因子样结构域(aa4-43)、三环结构域(kringledomain)(aa47-135)以及催化“B”链(氨基酸144-411)。该三环结构域显现结合肝素。该生长因子样结构域与表皮生长因子(EGF)的结构具有一定相似性，并且因此称作EGF样结构域。uPA作为酶原(尿激酶原(pro-uPA)或单链uPA)被合成，并且通过由纤溶酶在Lys158和Ile159之间进行蛋白裂解切割而激活。两个所产生的链通过二硫键保持在一起。uPA的主要底物是纤溶酶原，该纤溶酶原被细胞表面结合的uPA转化为纤溶酶。uPA对于纤溶酶原中的单一肽键具有高度特异性。激活的纤溶酶降解细胞外基质的组分(纤维蛋白、纤连蛋白、层粘连蛋白以及蛋白聚糖)，并且还激活基质金属蛋白酶(MMP)，由此促进胶原蛋白的降解。因此，提供苄基磺酰基-D-Ser-L-hPhe-4-脒基苄基酰胺的化妆品组合物提供了尿激酶的强选择性抑制剂以及强纤溶酶抑制剂，但不抑制包括以下项的丝氨酸蛋白酶：激肽释放酶5、激肽释放酶7、弹性蛋白酶、因子VII、因子X和组织型纤溶酶原激活剂(tPA)。因此，苄基磺酰基二肽衍生物特别是苄基磺酰基-Ser-hPhe-4-脒基苄基酰胺(式(II))是个人护理应用领域中使用的重要的且有价值的化合物。式(II)：当根据式(I)的化合物按照在WO2001/096286、WO2003/076391中所述的、或如由A.Schweinitz等人在JBC2004，第279卷(32)，第33613-3622页中发表的程序制造时，所得产物的产率非常有限，这是因为所述式(I)的化合物具有出人意料地低的溶解度，由此大大增加了所述化合物的生产成本。在对比实施例中证实了现有技术的方法的低产率。此外，上述现有技术的方法包括离子交换色谱步骤，其对于具有难溶化合物的工业规模生产而言并不便利。因此，本专利技术的目标是寻求用于将式(III)的氨基酸衍生物(在本文中指定为苄基-磺酰基-Ser(tBu)-OH)与式(IV)的化合物(在本文中指定为X-4-脒基苄基酰胺)进行偶联的改进的方法，由此以优异的产率、最小量的副产物、比现有技术的方法更少的步骤产生式(I)的化合物，由此导致制造成本的显著降低。式(III)：式(IV)：其中R是C1至C6线性的或分支的脂肪族烃链，该脂肪族烃链任选地被C6至C10芳香族基团取代。专利技术详述出人意料地，本专利技术人发现式(I)的化合物能以非常高的产率、高纯度、以不触发个人护理应用的任何安全问题的杂质谱，并且以更少的步骤进行制造。因此，本专利技术涉及用于产生式(I)的化合物或其盐的方法，(I)所述方法包括以下步骤：i)通过缩合使式(III)的化合物与式(IV)的化合物或其盐偶联，(III)(IV)ii)将腈官能团转化为羟基脒，iii)在清除剂(scavenger)存在的条件下，在-10℃至30℃的温度下，用强酸去除叔丁醚保护基团，iv)将所述羟基脒或受保护的羟基脒官能团还原为脒，产生式(I)的产物，其中，R是C1至C6线性的或分支的脂肪族烃链，该脂肪族烃链任选地被C6至C10芳香族基团取代。在本专利技术的所有实施方案中，式(I)的化合物的特征在于R是C1至C6线性的或分支的脂肪族烃链，该脂肪族烃链任选地被C6至C10芳香族基团取代，优选地，R是被C6至C8芳香族基团取代的C1至C3线性脂肪族烃链，更优选地，R是-CH2-CH2-C6H5，即意为式(I)的化合物是苄基-磺酰基-Ser-hPhe-4-脒基苄基酰胺(式(II))。此外，式(I)的化合物可以为任何立体化学构型，但优选构型是这样的式(I)的化合物，该化合物是通过苄基-磺酰基-D-Ser(tBu)-OH和L-X-4-氰基苄基酰胺的缩合由此产生苄基-磺酰基-D-Ser-L-X-4-脒基苄基酰胺所得的。最优选的式(I)的化合物是这样的式(II)的化合物，该化合物是通过苄基磺酰基-D-Ser(tBu)-OH和L-高Phe-4-氰基苄基酰胺的缩合由此产生苄基磺酰基-D-Ser-L-高Phe-4-脒基苄基酰胺所得的。高Phe和hPhe可互换使用，以意指高苯丙氨酸(CAS943-73-7)。式(I)的化合物通常作为盐存在，优选与无机酸形成的盐，优选地作为盐酸盐存在，或作为与适合的有机酸形成的盐或硫酸盐存在。对于式(I)的化合物而言，优选的有机酸盐选自乙酸、甲酸、甲基磺酸、琥珀酸、苹果酸、三氟乙酸盐，最优选是乙酸盐。通过缩合偶联的步骤：步骤i)式(III)的化合物原则上可以通过本领域技术人员已知的方法来制备，如“ThePracticeofPeptideSynthesis”,第二版,M.Bodanzky&A.Bodanzky,Springer-Verlag中所述。式(IV)的化合物原则上可以通过本领域技术人员已知的方法来制备，如“ThePracticeofPeptideSynthesis”,第二版,M.Bodanzky&A.Bodanzky,Springer-Verlag)中所述。式(IV)的化合物作为盐，优选作为盐酸盐添加。对于根据本专利技术的方法而言，步骤i)的缩合可以通过本领域技术人员已知的任何常规偶联反应来进行。优选地，步骤i)是在有机溶剂中用至少一种肽偶联试剂进行的，所述有机溶剂选自乙腈、THF和DMF或其混合物，所述至少一种肽偶联试剂选自2-MBT(2-巯基苯并噻唑)、BOP(六氟磷酸(苯并三唑-1-基氧基)三(二甲基氨基)磷；CAS号：56602-33-6)、TBTU(O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯，CAS号：125700-67-6)、HBTU(N,N,N′,N′-四甲基-O-(1H-苯并三唑-1-基)脲六氟磷酸酯、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲六氟磷酸酯；CAS号：94790-37-1)以及COMU(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代亚乙基氨基氧基)二甲基氨基-吗啉代-碳鎓六氟磷酸酯；CAS号：1075198-30-9)。更优选地，有机溶剂是比率为1/1的乙腈/THF混合物，并且肽偶联试剂是TBTU。通常反应在4℃至25℃的温度下进行6至18小时。腈转化步骤：步骤ii)对于根据本专利技术的方法，步骤ii)的转化通过本领域已知的方法进行。优选地，这是在例如DMF、THF、甲醇、乙醇或乙腈的溶剂或溶剂混合物存在的条件下用羟胺进行。最优选的溶剂是甲醇。最优选的反应时间是6至7小时，并且优选的反应温度是在60℃和65℃之间。叔丁基醚保护基团的去除：步骤iii)对于根据本专利技术的方法而言，步骤iii)的脱保本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于产生式(I)的化合物或其盐的方法，(I)所述方法包括以下步骤：i)通过缩合使式(III)的化合物与式(IV)的化合物或其盐偶联，(III)(IV)ii)将腈官能团转化为羟基脒，iii)在清除剂存在的条件下，在‑10℃至30℃的温度下，用强酸去除叔丁醚保护基团，iv)将所述羟基脒或受保护的羟基脒官能团还原为脒，产生式(I)的产物，其中，R是C1至C6线性的或分支的脂肪族烃链，所述脂肪族烃链任选地被C6至C10芳香族基团取代。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.06.25 EP 14173859.11.一种用于产生式(I)的化合物或其盐的方法，(I)所述方法包括以下步骤：i)通过缩合使式(III)的化合物与式(IV)的化合物或其盐偶联，(III)(IV)ii)将腈官能团转化为羟基脒，iii)在清除剂存在的条件下，在-10℃至30℃的温度下，用强酸去除叔丁醚保护基团，iv)将所述羟基脒或受保护的羟基脒官能团还原为脒，产生式(I)的产物，其中，R是C1至C6线性的或分支的脂肪族烃链，所述脂肪族烃链任选地被C6至C10芳香族基团取代。2.根据权利要求1所述的方法，其中步骤i)的缩合是在有机溶剂中用至少一种肽偶联试剂进行的，所述有机溶剂选自乙腈、THF和DMF或其混合物，所述肽偶联试剂选自2-MBT、BOP、TBTU、HBTU和COMU。3.根据权利要求1所述的方法，其中在步骤i)中使用的有机溶剂是比率为1/1的乙腈/THF混合物，以及肽偶联试剂是TBTU。4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中步骤ii)是在选自DMF、THF、乙腈、乙醇和甲醇的溶剂或溶剂混合物存在的条件下用羟胺进行的。5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中步骤iii)中的强酸选自卤代有机酸，以及所述清除剂是亲核的。6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中步骤iii)是在0至20℃，优选2℃至10℃的温度下进行的。7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中步骤iv)是在金属催化剂存在的条件下通过氢化或转移氢化进行的。8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中步骤iv)是通过用镍或钯催化剂进行氢化来进行的。9.根据前述权利要求中任一项所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：乔纳森·艾伦·米德洛克，彼得·维克斯特罗姆，
申请(专利权)人：帝斯曼知识产权资产管理有限公司，
类型：发明
国别省市：荷兰;NL