一种穿心莲内酯纳米混悬剂及制备方法技术

本发明专利技术属于药物制剂领域,提供了一种穿心莲内酯纳米混悬剂及其制备方法。穿心莲内酯在水中溶解度低且易被P‑gp外排，代谢快，导致其低溶出率和较低的体内生物利用度。为了提高该药物的溶出度和生物利用度，本发明专利技术选择P‑gp抑制剂TPGS和离子型稳定剂SDS，应用介质研磨技术制备穿心莲内酯纳米混悬剂，以粒径大小和分布为评价指标，运用Box‑Behnken中心组合设计试验优选制备工艺，制备穿心莲内酯纳米混悬剂，采用冷冻干燥进行固化。并对其进行表征、短期稳定性、Caco‑2渗透性、体外溶出研究、体内药动学和药效学研究。结果表明，穿心莲内酯纳米混悬剂能增加穿心莲内酯的溶出，提高其口服生物利用度及抗炎作用。

Andrographolide nano suspension agent and preparation method thereof

The present invention belongs to the field of pharmaceutical preparation, and provides a andrographolide nano suspension agent and a preparation method thereof. Andrographolide by P GP efflux, low solubility in water and easy fast metabolism leads to its low solubility and low bioavailability in vivo. In order to improve the drug dissolution and bioavailability, the invention selects P GP inhibitor TPGS and ion stabilizer SDS, application of media milling technology for preparation of andrographolide nanosuspension, the particle size and distribution as the evaluation index, using the Box Behnken central composite design test to optimize the preparation process. Preparation of andrographolide nanosuspension by freeze drying, curing. And its characterization, stability, permeability, Caco 2 in vitro dissolution studies, pharmacokinetics and pharmacodynamics study. The results showed that andrographolide nano suspension could increase the dissolution of andrographolide, improve its bioavailability and anti-inflammatory effect.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医药
，具体涉及一种穿心莲内酯纳米混悬剂及制备方法。
技术介绍
穿心莲内酯(andrographolide)为爵床科植物穿心莲中提取得到的主要有效成分之一，是二萜内酯类化合物，在穿心莲叶中含量高达1.84％。现代研究发现穿心莲内酯有广泛的药理活性，其具有较好的抗炎、抗感染、抗癌、保肝等作用。然而，其疏水性较强，在水中溶解度低(0.07mg/mL)(ChenLL,WangZH.Investigationofbasicphysicalandchemicalpropertiesofandrographolide[J].PharmToday,2010,20(1):41-43.)，易被P-gp外排，代谢快，导致其低溶出率和较低的体内生物利用度(2.67％)(YeL,WangT,TangLetal.PoororalbioavailabilityofapromisinganticanceragentandrographolideisduetoextensivemetabolismandeffluxbyP-glycoprotein[J].JPharmSci,2011,100(11):5007-17.)，从而限制了其临床应用。改善难溶性药物生物利用度可以采用多种药剂学技术，通过形成可溶性盐、改变晶型或制成无定形非晶体、加入表面活性剂润湿或胶束增溶、微粉化或纳米化增加表面积、与磷脂形成复合物增加亲水性、形成水溶性载体的固体分散体、环糊精分子包合、乳化、微乳化等制剂技术，制成溶液剂、混悬剂、片剂、胶囊、乳剂、微乳、自微乳、胶束溶液等剂型。虽然一定程度上提高了穿心莲内酯的生物利用度，但其低载药量、低包封率、低稳定性限制了其临床应用。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种穿心莲内酯纳米混悬剂及制备方法，以提高穿心莲内酯的生物利用度，稳定性。专利技术人通过在单因素考察的基础上，应用BBD-效应面法优化穿心莲内酯纳米混悬剂的制备工艺，确定最佳制备工艺。以最佳的制备工艺得到穿心莲内酯纳米混悬剂，然后通过冷冻干燥进行固化，进一步提高其稳定性。对该制剂进行了全面的体外评价，包括粒径及粒径分布、Zeta电位、扫描电子显微镜(SEM)、X-射线衍射(PXRD)、差示扫描量热法(DSC)、Caco-2渗透实验、体外溶出度分析、药效药动实验，旨在生产一种更为安全、稳定、生物利用度高、适于工业化生产的穿心莲内酯纳米制剂。本专利技术的一种穿心莲内酯纳米混悬剂，由穿心莲内酯、稳定剂制成，稳定剂为具有P-gp抑制作用的维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)和离子型稳定剂十二烷基硫酸钠(SDS)。所述穿心莲内酯纳米混悬剂，其特征在于剂型为冻干粉。所述穿心莲内酯纳米混悬剂，制备方法包括下述顺序的步骤：(1)称取穿心莲内酯，加入内含TPGS和SDS的水溶液中；(2)将上述液体置于匀浆机高速剪切；(3)然后将上述混悬液倒入介质研磨机中，研磨，制得穿心莲内酯纳米混悬剂；(4)所得纳米混悬剂加入甘露醇，分别装入西林瓶中；(5)置于-80℃冰箱预冻，再放置于冷冻干燥机中，制备得到穿心莲内酯纳米混悬剂冻干粉。所述穿心莲内酯纳米混悬剂，制备方法步骤(1)中所述溶剂的用量应使穿心莲内酯的浓度为0.5g/100ml。所述穿心莲内酯纳米混悬剂，制备方法步骤(1)所述TPGS和SDS的水溶液中稳定剂TPGS和SDS浓度以质量体积比计为0.62％，分别为0.30％、0.32％，如200mL水内含0.600gTPGS，0.640gSDS。所述穿心莲内酯纳米混悬剂，制备方法步骤(3)所述介质研磨机中，使用0.3-0.4mm氧化锆小珠850g，转速为1056rpm，研磨时间为68min。所述穿心莲内酯纳米混悬剂，制备方法步骤(4)所述冷冻保护剂浓度以质量体积比计为1％的甘露醇。所述穿心莲内酯纳米混悬剂，制备方法步骤(5)所述预冻温度为-80℃，预冻时间12h。所述穿心莲内酯纳米混悬剂，制备方法步骤(5)所述冷冻干燥温度为-30℃时维持10h，-10℃时维持5h，0℃维持2h，25℃维持2h。所述穿心莲内酯纳米混悬剂，制备方法包括下述顺序的步骤：(1)称取1g穿心莲内酯，加入内含0.600gTPGS，0.640gSDS的200mL水溶液中；(2)将上述液体置于匀浆机16000rpm高速剪切5min；(3)然后将上述混悬液倒入介质研磨机中，使用0.3-0.4mm氧化锆小珠850g，在转速1056rpm下研磨68min，制得穿心莲内酯纳米混悬剂；(4)所得纳米混悬剂加入以质量体积比计为1％的甘露醇，分别装入西林瓶中，每瓶5mL；(5)置于-80℃冰箱预冻12h，再放置于冷冻干燥机中，制备得到穿心莲内酯纳米混悬剂冻干粉。有益效果：本专利技术中加入1％甘露醇作为冻干保护剂时，穿心莲内酯纳米混悬剂冻干粉的RDI最小，为113±1.14％(n＝3)，表明其冻干前后的粒径无显著差异。本专利技术所得纳米混悬剂表征平均粒径为215.6±3.3nm，多分散系数为0.165±0.02，Zeta电位为-36.9±2.8mV(n＝3)。本专利技术所得纳米混悬剂冻干粉中穿心莲内酯、SDS及TPGS以无定型状态存在。本专利技术所得穿心莲内酯纳米混悬剂粒径为200nm左右，电子扫描镜下粒子多呈棒状或块状，大小分布较均匀，粒子之间无粘连和聚集现象。本专利技术所得穿心莲内酯纳米混悬剂在体外溶出度实验中在不同pH值缓冲液中溶出溶出速率均明显提高。本专利技术所得穿心莲内酯纳米混悬剂冻干粉验短期稳定性良好，在一周后平均粒径没有显著性差异。本专利技术所得穿心莲内酯纳米混悬剂在Caco-2细胞渗透性良好，表现出显著较高的渗透穿过细胞膜，通过P-gp抑制剂TPGS,能降低P-gp的外排功能。本专利技术所得穿心莲内酯纳米混悬剂在大鼠灌胃给药后Cmax和AUC0–t有显著提高。其中含TPGS穿心莲内酯纳米混悬剂比不含有TPGS的穿心莲内酯纳米混悬剂生物利用度高。本专利技术所得穿心莲内酯纳米混悬剂具有更好的抗炎作用，在大鼠足趾肿胀抗炎实验中，本专利技术所得穿心莲内酯纳米混悬剂与穿心莲内酯其他剂型药物相比，其减轻鼠足趾肿胀度及降低血清中NO、IL-1、TNF含量，提高SOD活性效果更佳。本专利技术所得穿心莲内酯纳米混悬剂的药动学和药效学特点表明其在体内的吸收得到提高，抗炎作用增强，这将有效解决穿心莲内酯在人体及动物体内生物利用度低的问题，非常有利于这一具有多种生物活性的天然产物作为药物进一步走向临床。具体实施方式以下通过实施例形式对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。实施例1:Box-Behnken中心组合设计试验优选穿心莲内酯纳米混悬剂制备工艺主要实验材料：在单因素基础上，选择对穿心莲内酯纳米混悬剂制备工艺影响显著的4个因素，即稳定剂浓度(A)、TPGS与SDS比例(B)、介质研磨机转速(C)及研磨时间(D)为自变量，以粒径大小及多分散系数为因变量(响应值)进行Box-Behnken中心组合设计，建立数学模型优化制备工艺。本实验以穿心莲内酯纳米混悬剂的粒径和多分散系数(PI)为评价指标，稳定剂浓度(A)、TPGS与SDS比例(B)、介质研磨机转速(C)及研磨时间(D)考察因素，采用Box-Behnken效应面法优化穿心莲内酯纳米混悬剂制备方法的条件，并进行预本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种穿心莲内酯纳米混悬剂，由穿心莲内酯、稳定剂制成，其特征在于稳定剂为具有P‑gp抑制作用的维生素E聚乙二醇琥珀酸酯TPGS和离子型稳定剂十二烷基硫酸钠SDS。

【技术特征摘要】
1.一种穿心莲内酯纳米混悬剂，由穿心莲内酯、稳定剂制成，其特征在于稳定剂为具有P-gp抑制作用的维生素E聚乙二醇琥珀酸酯TPGS和离子型稳定剂十二烷基硫酸钠SDS。2.如权利要求1所述穿心莲内酯纳米混悬剂，其特征在于剂型为冻干粉。3.如权利要求2所述穿心莲内酯纳米混悬剂，其特征在于，制备方法包括下述顺序的步骤：(1)称取穿心莲内酯，加入内含TPGS和SDS的水溶液中；(2)将上述液体置于匀浆机高速剪切得混悬液；(3)然后将上述混悬液倒入介质研磨机中，研磨，制得穿心莲内酯纳米混悬剂；(4)所得纳米混悬剂加入甘露醇，分别装入西林瓶中；(5)置于-80℃冰箱预冻，再放置于冷冻干燥机中，制备得到穿心莲内酯纳米混悬剂冻干粉。4.如权利要求3所述穿心莲内酯纳米混悬剂，其特征在于，制备方法步骤(1)中所述溶剂的用量应使穿心莲内酯的浓度为0.5g/100ml。5.如权利要求3所述穿心莲内酯纳米混悬剂，其特征在于，制备方法步骤(1)所述TPGS和SDS的水溶液中稳定剂TPGS、SDS浓度以质量体积比计为0.62％，分别为0.30％、0.32％。6.如权利要求3所述穿心莲内酯纳米混悬剂，其特征在于，制备方法步骤(3)所述介质研磨机中，使用...

【专利技术属性】
技术研发人员：李俊松，蒋爱，狄留庆，王静娴，陈婷，芮天奇，
申请(专利权)人：南京中医药大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32