一种沉水樟替代牛樟木繁育樟芝的培育方法技术

本发明专利技术提供一种沉水樟替代牛樟木繁育樟芝的培育方法，其包括菌种培养基制作、菌种分离和扩繁、培养载体、接菌、菌丝生长、子实体生长步骤。本发明专利技术的樟芝培育方法的优点有：沉水樟替代牛樟，解决资源匮乏和多途径培育樟芝的方法；培育方法简单，可实现产业化、标准化生产，降低生产成本，且培育时间短。本发明专利技术选用多年生沉水樟木作为菌床培育子实体，同时对菌种进行改良，使其更适应这种菌床生长，从而可保证出菇率，提高经济效益。所得樟芝子实体与牛樟芝子实体 DNA 检测相同率达 99%，且色泽接近，指纹图谱极其相似。

Cultivating method for replacing Cinnamomum camphora with Cinnamomum camphora

The invention provides a method for cultivation of Cinnamomum camphor cattle breeding antrodiacamphorata substitution, including medium production, isolation and propagation, culture carrier, bacterium, mycelial growth and fruiting body growth steps. The advantages of cultivation method of the invention of a.camphorata: Cinnamomum micranthum alternative solutions, lack of resources and ways to cultivate Antrodia camphorata; cultivation method is simple, can realize the industrialization and standardization of production, reduce production cost, and short cultivation time. The invention adopts the perennial submerged camphor wood as the fungus bed to cultivate the fruiting body, and improves the strain at the same time, so as to make it more suitable for the growth of the fungus bed, thereby ensuring the fruiting rate and improving the economic benefit. The fruiting bodies and Antrodia Antrodia fruitbody DNA detection rate was 99% and the same, close to the color, the fingerprint is very similar.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及菌类培育领域，特别涉及一种沉水樟替代牛樟木繁育樟芝的培育方法。
技术介绍
牛樟芝又名牛樟菇，是生长在牛樟树上的一种珍贵的药用真菌，牛樟芝中含有多糖体、萜类化合物、超氧歧化酶和核酸类等多种成分，具有解毒保肝、抗癌、强化免疫、抗过敏、降血脂等多种功效，受到人们的极大欢迎。目前牛樟芝的人工栽培方法包括牛樟树段木栽培法、固态栽培法和液体发酵法。所培育出来的牛樟芝不论从形态、气味、功效成分以及药效都存在明显的不同和差异，段木栽培法生产的牛樟芝子实体含量高、药效好，是其他方法培育的牛樟芝所无法媲美的，但是，牛樟木资源匮乏，在台湾属于保护品种，禁止砍伐。因此，导致牛樟芝产量低、价格昂贵，无法满足一般民众的需求，所以，寻求牛樟木替代品培育牛樟芝成为众多学者研究的课题。目前，有使用寮国樟、福杉作为载体繁育樟芝的案例，但沉水樟与牛樟，无论生长环境还是属性都非常接近，在台湾也有“牛樟”的叫法。沉水樟替代牛樟木繁育樟芝是利用樟芝原有宿主牛樟树或沉水樟为培养基栽培樟芝；希望获得与牛樟芝相同之成分，功效相同，避免野生牛樟树被盗伐，降低生产成本、增加产量，为更多的百姓服务，提高健康水平。
技术实现思路
为解决上述传统牛樟芝的人工栽培方法所存在的问题，需要提供一种沉水樟替代牛樟木繁育樟芝的培育方法。为此，专利技术人提供了如下技术方案：一种沉水樟替代牛樟木繁育樟芝的培育方法，其包括菌种培养基制作、菌种分离和扩繁、培养载体、接菌、菌丝生长、子实体生长步骤。进一步，所述菌种培养基制作包括母种培养基制备，及原种或栽培种培养基的制备。本专利技术中，从母种开始培养菌种，保证菌种的质量及产率；同时，所得樟芝子实体与牛樟芝子实体DNA检测相同率达99%，且色泽接近，指纹图谱极其相似。更进一步，所述母种培养基制备包括以下步骤：1）称取以下重量份数的组分：基材150-250份；葡萄糖10-30份；琼脂10-30份；所述基材为下列中的一种：马铃薯、玉米糁、杂交米或麦粒；本专利技术中母种培养基采用上述的组分，营养丰富、均衡，可提高母种的成活率。2）将基材加水煮沸20-30min，过滤，去滤液，往滤饼中加入琼脂，加热并搅拌，使琼脂全部溶解，再往滤饼中加入葡萄糖，搅拌溶解后加水将溶液补足到1000重量份；3）然后将溶液分装试管，每管装1/4-1/3试管高度，塞上棉塞，在110-130℃灭菌25-35min，取出摆成斜面，冷却凝固待用。更进一步，所述步骤1）中的组分还包括磷酸二氢钾2-5重量份、硫酸镁1-4重量份和维生素B10.01-0.1重量份；步骤2）往滤饼中加入琼脂的同时，也将上述组分全部加入滤饼中一起搅拌溶解。本专利技术中，在母种培养基中加入上述组分，可大大缩短母种的培养时间，所述磷酸二氢钾组分还可以促使菌丝生长的更加强壮。进一步，所述原种或栽培种培养基的制备方法包括以下步骤：1）称取以下重量份数的组分：牛樟树木屑65-85份；麸皮10-30份；玉米面3-10份；过磷酸钙0.5-1.5份；石灰1-4份；2）将上述组分与水按质量比1:1.3混合搅匀后装瓶或装袋，封口后在110℃-130℃下灭菌1.5～2h，冷却待用。本专利技术通过原种培养基或栽培种培养基将母种培养成原种或栽培种，从而实现母种的放大培育；同时，还可以对母种进行稀释，因为若采用纯母种栽培，母种用量大，成本高，菌丝发菌时间长。进一步，所述菌种分离和扩繁的操作包括以下步骤：获取牛樟芝，在接种箱中切粒装入母种培养基的试管中，在0℃下培养三个月，得到牛樟芝母种；所述牛樟芝颗粒重0.3-0.5g；采用这样大小的母种进行培养，再生能力强，成活率可达到90%-100%，可大大提高母种成活率。将牛樟芝母种接入装有原种培养基的培养瓶中，在10-15℃下避光培养5-8个月，得到牛樟芝原种；将一只试管获得母种平均接入3～5瓶装有原种培养基的培养瓶，每个培养瓶装的培养液量为20ml；将牛樟芝原种接入装有栽培种培养基的培养袋中，在10-15℃下避光培养5-8个月，得到牛樟芝栽培菌种；将一培养瓶获得的原种平均接入20～30袋装有栽培种培养基的培养袋，每个培养袋中装的固体栽培培养基为500g。本专利技术菌种分离和扩繁步骤中，作为培育母种的牛樟芝，可以是天然成长的牛樟芝，还可以是经过本专利技术培育方法培育的樟芝，三萜含量接近。进一步，所述载体培养包括以下步骤：1）选择大小适当的木头，将木头表面清除干净并以砂轮磨平，清水冲洗干净；2）将加工好的木头放入水池浸泡，每天换水，浸泡5-10天；3）将浸泡后的木头放入灭菌器，在温度为110-130℃、压力为0.1-0.2MPa的条件下，灭菌1-3小时，灭菌结束后，取出，冷却。4）接菌：将牛樟芝栽培菌种涂在冷却的木头上，用塑料袋装好，密封。5）所述菌丝生长的条件为：将接菌后的木头用塑料袋装好避光放在层架上，控制环境温度为20-28℃，湿度65%-75%，培养90~130天。6）子实体生长步骤具体操作为：脱袋出菇后，将木头放入培养房，暗房避光，保持室内空气流通，且空气湿度为65%-75%，培养20-24个月，直至牛樟芝子实体停止生长，然后进行采收。与现有技术相比，本专利技术樟芝培育方法具有以下优点：1、培育方法简单，可实现产业化、标准化生产，从而方便扩大生产，降低生产成本。2、本专利技术由于选用沉水樟作为菌床，使用改良后的菌种，提高其适应性，有利于子实体的生长，提高经济效益。3、采用本专利技术的培育方法，所得樟芝子实体与牛樟芝子实体DNA检测相同率达99%，指纹图谱极其相似。4、利用本专利技术的培育方法，无需采用牛樟木为菌床，可以节约牛樟木的使用，菌床材料容易取得，成本低，有效降低成本。附图说明图1沉水樟芝图谱。图2椴木子实体图谱。图3牛樟芝标准图谱。具体实施方式为详细说明本专利技术的
技术实现思路
、构造特征、所实现目的及效果，以下结合实施方式详予说明。实施例1一种沉水樟替代牛樟木繁育樟芝的培育方法，其包括以下步骤：步骤1：菌种培养基制作，其包括母种培养基制备，及原种或栽培种培养基的制备，具体为：所述母种培养基制备包括以下步骤：1）称取以下重量份数的组分：基材杂交米250份；葡萄糖10份；琼脂30份；磷酸二氢钾2份；硫酸镁4份；维生素B10.01份；2）将基材加水煮沸20min，过滤，往滤饼中加入琼脂、磷酸二氢钾、硫酸镁和维生素B1，加热并搅拌，使固体全部溶解，再往溶液中加入葡萄糖，搅拌溶解后加水将溶液补足到1000重量份；3）然后将溶液分装试管，每管装1/3试管高度，塞上棉塞，在110℃灭菌35min，取出摆成斜面，冷却凝固待用。所述原种或栽培种培养基的制备方法包括以下步骤：1）称取以下重量份数的组分：牛樟树木屑65份；麸皮30份；玉米面3份；过磷酸钙1.5份；石灰1份；2）将上述组分与水按质量比1:1.3混合搅匀后装瓶或装袋，封口后在110℃℃下灭菌2h,冷却待用。步骤2：菌种分离和扩繁，具体包括以下步骤：1）获取牛樟芝，在接种箱中切粒装入母种培养基的试管中，在0℃下培养三个月，得到牛樟芝母种；所述牛樟芝颗粒重0.3g；采用这样大小的母种进行培养，再生能力强，成活率可达到90%-100%，可大大提高母种成活率。2）将牛樟芝母种接入装有原种培养基的培养瓶中，在12℃下避光培养8个月，得到牛樟芝原种；所述一只试管的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种沉水樟替代牛樟木繁育樟芝的培育方法，其特征在于：其包括菌种培养基制作、菌种分离和扩繁、载体培养、接菌、菌丝生长、子实体生长步骤。

【技术特征摘要】
1.一种沉水樟替代牛樟木繁育樟芝的培育方法，其特征在于：其包括菌种培养基制作、菌种分离和扩繁、载体培养、接菌、菌丝生长、子实体生长步骤。2.根据权利要求1所述的一种沉水樟替代牛樟木繁育樟芝的培育方法，其特征在于：所述菌种培养基制作包括母种培养基制备及原种或栽培种培养基的制备。3.根据权利要求2所述的一种沉水樟替代牛樟木繁育樟芝的培育方法，其特征在于：所述母种培养基制备包括以下步骤：1）称取以下重量份数的组分：基材150-250份；葡萄糖10-30份；琼脂10-30份；所述基材为下列中的一种：马铃薯、玉米糁、杂交米或麦粒；2）将基材加水煮沸20-30min，过滤，去掉滤液，往滤饼中加入琼脂，加热并搅拌，使琼脂全部溶解，再往滤饼中加入葡萄糖，搅拌溶解后加水将溶液补足到1000重量份；3）然后将溶液分装试管，每管装1/4-1/3试管高度，塞上棉塞，在110-130℃灭菌25-35min，取出摆成斜面，冷却凝固待用。4.根据权利要求3所述的一种沉水樟替代牛樟木繁育樟芝的培育方法，其特征在于：所述步骤1）中的组分还包括磷酸二氢钾2-5重量份、硫酸镁1-4重量份和维生素B10.01-0.1重量份；步骤2）往滤饼中加入琼脂的同时，也将上述组分全部加入滤饼中一起搅拌溶解。5.根据权利要求2所述的一种沉水樟替代牛樟木繁育樟芝的培育方法，其特征在于：所述原种或栽培种培养基的制备方法包括以下步骤：1）称取以下重量份数的组分：牛樟树木屑65-85份；麸皮10-30份；玉米面3-10份；过磷酸钙0.5-1.5份；石灰1-4份；2）将上述组分与水按质量比1:1.3混合搅匀后装瓶或装袋，封口后在110℃-130℃下灭菌1.5～2h，冷却待用。6.根据权利要求1所述的一种沉水樟替代牛樟木繁育樟芝的培...

【专利技术属性】
技术研发人员：王宫，马建煜，陈耀金，
申请(专利权)人：福建省中医药研究院，
类型：发明
国别省市：福建;35