图像读取方法技术

当从荧光图像读取荧光强度时，实现检测时间的高速化和检测数据容量的减少。本发明专利技术是从存在多个发出荧光的区域的试样读取荧光图像的图像读取方法，具有：(a)设定第1拍摄条件的工序，(b)以上述第1拍摄条件拍摄荧光图像的工序，(c)对于拍摄的荧光图像所含的多个区域，算出各区域的荧光强度的工序，(d)基于上述算出的各区域的荧光强度，判定是否结束拍摄的工序，(e)当在上述(d)工序中判断为不结束拍摄时，基于上述(c)工序中算出的各区域的荧光强度，设定接下来的拍摄条件的工序，(f)以上述接下来的拍摄条件拍摄荧光图像的工序，及(g)重复上述(c)工序至(f)工序直至在上述(d)工序中判定为结束拍摄的工序。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及存在多个发出不同荧光强度的区域的试样的荧光图像的读取方法。
技术介绍
在使用荧光激光扫描仪、荧光显微镜等荧光测定装置的荧光观察中，有时根据所观察的试样在观察视野内存在多个发出不同荧光强度的区域。已知作为如下试样的生物芯片：固定有数十至数万个不同种类的DNA、蛋白质、抗体等生物体相关物质作为探针的试样。从生物芯片检测的荧光强度由弱至强在宽的范围内存在。通常，在读取荧光时，尽可能以受光量增多的条件拍摄会使信息量变多。然而，如果在检测时，通过调整激发光的输出强度、露出时间等曝光条件来使发出强荧光的区域的荧光强度不饱和而拍摄，则发出弱荧光的区域的亮度会不充分，从而无法检测正确的荧光量。另一方面，如果通过调整激发光的输出强度、露出时间等曝光条件来使发出弱荧光的区域的亮度充分而拍摄，则会产生发出强荧光的区域的荧光强度饱和而无法检测正确的荧光量的现象。这是因为拍摄对象所发出的荧光量的动态范围大于检测装置所读取的动态范围而产生的问题。为了解决这样的问题，已知如下方法：在一边使受光量变化一边获取多个图像后，将这些多个图像彼此比较，选择每个区域合适曝光条件的图像，从而以大的动态范围检测(参照专利文献1)。现有技术文献专利文献专利文献1：日本特许第3834519号公报
技术实现思路
专利技术所要解决的课题然而，对于上述专利文献1中记载的方法，不论试样的种类，均机械性地<br>获取多个图像，因此即使对于能够在动态范围内捕捉到1张图像的试样，也需要在检测中获取完全不必要的图像。因而，检测时间的高速化、检测数据容量的减少是非常困难的。本专利技术是为了解决这样的问题而完成的，其目的在于，提供如下方法：以预定的拍摄条件拍摄荧光图像，基于该拍摄的荧光图像所含的各区域的荧光强度，进行拍摄的结束判定、进一步拍摄的拍摄条件的设定，从而以涉及各区域的合适的条件实现拍摄，实现检测时间的高速化、检测数据容量的减少。用于解决课题的方法本专利技术是从存在多个发出荧光的区域的试样读取荧光图像的图像读取方法，其特征在于，具有：(a)设定第1拍摄条件的工序，(b)以第1拍摄条件拍摄荧光图像的工序，(c)对于拍摄的荧光图像所含的多个区域，算出各区域的荧光强度的工序，(d)基于算出的各区域的荧光强度，判定是否结束拍摄的工序，(e)当在(d)工序中判断为不结束拍摄时，基于(c)工序中算出的各区域的荧光强度，设定接下来的拍摄条件的工序，(f)以接下来的拍摄条件拍摄荧光图像的工序，及(g)重复(c)工序至(f)工序直至在(d)工序中判定为结束拍摄的工序。根据如此构成的本专利技术，基于以规定的拍摄条件拍摄的结果，进行之后的拍摄，因而能够有效地进行拍摄，从而能够实现检测时间的高速化和检测数据容量的减少。本专利技术中优选：(d)工序具有：(d-1)对于(c)工序中算出的各区域的荧光强度，判定荧光强度是否有效的工序，及(d-2)对于判定为荧光强度有效的区域，将(c)工序中算出的荧光强度作为该区域的荧光强度的读取值而采用的工序；(e)工序具有：(e-1)当存在判定为荧光强度无效的区域时，将相比(d)工序中作为判定对象的荧光图像的拍摄条件、受光量更少的拍摄条件设定为该区域的接下来的拍摄条件的工序。根据如此构成的本专利技术，算出拍摄的每个区域的荧光强度，随时判断是否需要接下来的拍摄条件的图像，从而能够避免获取检测中不使用的图像，同时实现检测时间的高速化和检测数据容量的减少。本专利技术中优选：(d)工序具有：(d-3)在(d-1)工序中，对于上述荧光图像所含的多个区域，判定为全部荧光强度有效时，判定为结束拍摄的工序。根据如此构成的本专利技术，能够避免获取检测中不使用的图像，同时实现检测时间的高速化和检测数据容量的减少。此外，本专利技术中优选：在(d-2)工序中，关于采用了上述算出工序中算出的荧光强度的区域，省略(g)工序中的(c)工序的应用。根据如此构成的本专利技术，能够实现检测时间的高速化和检测数据容量的减少。此外，本专利技术中优选：(d)工序具有：(d-1)对于(c)工序中算出的各区域的荧光强度，判定荧光强度是否有效的工序；(e)工序具有：(e-2)对于判定为荧光强度有效的各个区域，抽取受光量比拍摄条件的受光量多的、1个或2个以上拍摄条件的工序，(e-3)通过下式，分别算出关于各抽取的拍摄条件的预测荧光强度的工序，式：预测荧光强度＝(区域的荧光强度/基准拍摄条件)×抽取的拍摄条件(其中，基准拍摄条件是(c)工序中算出了荧光强度的荧光图像的拍摄条件)(e-4)对各抽取的拍摄条件算出的预测荧光强度之中，将有效的预测荧光强度中与最高预测荧光强度对应的拍摄条件设为该区域的确定拍摄条件的工序，(e-5)当在上述(e-4)工序中，对抽取的各拍摄条件算出的预测荧光强度之中，不存在有效预测荧光强度时，将相比(c)工序中算出了荧光强度的荧光图像的拍摄条件、受光量更少的拍摄条件设定为该区域的接下来的拍摄条件的工序，及(e-6)对于判定为荧光强度无效的各个区域，将相比(c)工序中算出了荧光强度的荧光图像的拍摄条件、受光量更少的拍摄条件设定为该区域的接下来的拍摄条件的工序；(f)工序进一步具有：(f-1)对于各区域，根据(e-4)工序中得到的确定拍摄条件，拍摄荧光图像的工序；(d)工序进一步具有：(d-4)对于各区域，将(f-1)工序中拍摄、(c)工序中算出的荧光强度作为各区域的读取值而采用，并且判定为结束拍摄的工序。根据如此构成的本专利技术，从以基准拍摄条件拍摄的荧光图像算出每个区域适当得到各区域的荧光强度的拍摄条件，并从以该拍摄条件拍摄的图像读取荧光强度，从而能够进行有效并且动态范围宽的数值化。进一步，能够避免获取检测中不使用的图像，同时实现检测时间的高速化和检测数据容量的减少。此外，本专利技术中优选：具有如下工序来代替(e-5)工序：(e-5’)当在(e-4)工序中，对抽取的各拍摄条件算出的预测荧光强度之中，不存在有效的预测荧光强度时，将拍摄条件设为该区域的确定拍摄条件的工序。根据如此构成的本专利技术，能够实现检测时间的高速化。此外，本专利技术中优选：当在(e-5’)工序中，拍摄条件被设为该区域的确定拍摄条件时，对于该区域，将(c)工序中算出的荧光强度作为读取值而采用，并且省略上述(f-1)工序。根据如此构成的本发本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种图像读取方法，其是从存在多个发出荧光的区域的试样读取荧光图像的图像读取方法，具有：(a)设定第1拍摄条件的工序，(b)以所述第1拍摄条件拍摄荧光图像的工序，(c)对于拍摄的荧光图像所含的多个区域，算出各区域的荧光强度的工序，(d)基于所述算出的各区域的荧光强度，判定是否结束拍摄的工序，(e)当在所述(d)工序中判断为不结束拍摄时，基于所述(c)工序中算出的各区域的荧光强度，设定接下来的拍摄条件的工序，(f)以所述接下来的拍摄条件拍摄荧光图像的工序，及(g)重复所述(c)工序至(f)工序，直至在所述(d)工序中判定为结束拍摄的工序。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.09.13 JP 2013-190414;2014.04.24 JP 2014-089691.一种图像读取方法，其是从存在多个发出荧光的区域的试样读取荧光
图像的图像读取方法，具有：
(a)设定第1拍摄条件的工序，
(b)以所述第1拍摄条件拍摄荧光图像的工序，
(c)对于拍摄的荧光图像所含的多个区域，算出各区域的荧光强度的工序，
(d)基于所述算出的各区域的荧光强度，判定是否结束拍摄的工序，
(e)当在所述(d)工序中判断为不结束拍摄时，基于所述(c)工序中算出的各
区域的荧光强度，设定接下来的拍摄条件的工序，
(f)以所述接下来的拍摄条件拍摄荧光图像的工序，及
(g)重复所述(c)工序至(f)工序，直至在所述(d)工序中判定为结束拍摄的工
序。
2.根据权利要求1所述的图像读取方法，
所述(d)工序具有：
(d-1)对于所述(c)工序中算出的、所述各区域的荧光强度，判定荧光强度是
否有效的工序，及
(d-2)对于判定为荧光强度有效的区域，将在所述(c)工序中算出的荧光强度
作为该区域的荧光强度的读取值而采用的工序；
所述(e)工序具有：
(e-1)当存在判定为荧光强度无效的区域时，将相比所述(d)工序中作为判定
对象的荧光图像的拍摄条件、受光量更少的拍摄条件设定为该区域的接下来的
拍摄条件的工序。
3.根据权利要求2所述的图像读取方法，所述(d)工序具有：
(d-3)在所述(d-1)工序中，对于所述荧光图像所含的多个区域，判定为全部
荧光强度有效时，判定为结束拍摄的工序。
4.根据权利要求2或3所述的图像读取方法，在所述(d-2)工序中，关于
采用了所述算出工序中算出的荧光强度的区域，省略所述(g)工序中的所述(c)
工序的应用。
5.根据权利要求1所述的图像读取方法，
所述(d)工序具有：
(d-1)对于所述(c)工序中算出的、所述各区域的荧光强度，判定荧光强度是
否有效的工序；
所述(e)工序具有：
(e-2)对于判定为荧光强度有效的各个区域，抽取受光量比所述拍摄条件的
受光量多的、1个或2个以上拍摄条件的工序，
(e-3)根据下式，分别算出关于各抽取的拍摄条件的预测荧光强度的工序，
式：预测荧光强度＝(区域的荧光强度/基准拍摄条件)×抽取的拍摄条件
其中，基准拍摄条件是(c)工序中算出了荧光强度的荧光图像的拍摄条件，
(e-4)在对各抽取的拍摄条件算出的所述预测荧光强度之中，将有效的预测
荧光强度中、与最高预测荧光强度对应的拍摄条件设为该区域的确定拍摄条件
的工序，
(e-5)当在所述(e-4)工序中，对所述抽取的各拍摄条件算出的所述预测荧光
强度之中，不存在有效的预测...

【专利技术属性】
技术研发人员：清水浩司，
申请(专利权)人：三菱丽阳株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP