一种以三文鱼为原料生产医药级蛋白肽粉的方法技术

本发明专利技术属于生物工程技术领域，为解决在利用三文鱼作为原料进行蛋白肽粉提取提纯过程中所存在的技术问题，本发明专利技术提供一种以三文鱼为原料生产医药级蛋白肽粉的方法，该方法通过内切酶与外切酶的综合运用对酶解物进行二次酶解、三次过滤及静置措施，可使得到的蛋白肽粉完全满足医药级蛋白肽粉的指标要求，可以作为医用级蛋白胨、保健品级鱼蛋白粉和复合氨基酸粉的原料。

【技术实现步骤摘要】

：本专利技术属于生物工程
，具体涉及一种以三文鱼为原料生产医用级蛋白肽粉的方法。技术背景：蛋白肽粉不仅是发酵法制药行业使用培养基的重要氮营养源，也是食品和保健品添加以及复合氨基酸的重要原料。以往的医用级蛋白肽粉主要采用蛋白胨，以牛肉膏，鱼溶浆粉等为主，但以此作为氮营养源在菌种培养和产菌率等方面的指标均不能满足要求，并且蛋白胨杂质多，含有污染物和重金属，影响产品的医用安全。因此选择无污染及重金属含量低的原料成为提高蛋白胨品质的主要因素。在选择的过程中，由于海洋鱼类生活于深海之中，无人为生态环境污染，重金属含量低，且鱼体蛋白含量高，研究人员将目光逐渐锁定于海洋鱼类。经过比对，我们发现三文鱼测得的鱼皮蛋白含量在80%以上，三文鱼鱼肉蛋白含量高达17.2%、每100克鱼肉能力能量达到139大卡，综合比较各种鱼类的营养指标、保存难易、受污染的程度、对人体的危害等，我们得出深海冷水三文鱼明显优于其它鱼种如金枪鱼、鳕鱼、鳀鱼、带鱼、鲐鱼、鱿鱼，是很好的生产医药级蛋白肽粉的首选原料。目前有关于利用鱼类作为原料进行提取鱼蛋白的报道。如申请号：201310096815X，一种利用复合蛋白酶制备活性胶原蛋白的方法，其采用的方法是在经过预处理的鱼皮混合液加入复合蛋白酶进行酶解，复合蛋白酶选用木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶、动物蛋白水解酶、酸性蛋白酶和胃蛋白酶中两种，将得到的酶解液进行离心、超滤、浓缩、盐析而得。如申请号：2012102539328，一种鱼脑微胶囊的制备方法，其采用的方法在经过超声波处理的鱼脑均浆液中加入胰蛋白酶酶解后，灭酶，再加入胃蛋白酶酶解，获得酶解液，在酶解液中加入其它营养成分经过喷雾、干燥而得。申请号：2015101175690，一种金枪鱼鱼骨胶原蛋白源锌螯合胶原肽及其制备方法和用途，其方法是在经过处理制得的金枪鱼骨胶原蛋白料液中加入胃蛋白酶酶解，然后调整pH值，再加入胰蛋白酶酶解，得酶解产物，将酶解产物超滤、大孔树脂层析柱脱杂、乙醇洗脱、冷冻干燥而得。申请号：2004100356188，鱼蛋白生物肽肥料的制备方法，其方法在鲜鱼、鲜鱼皮或鲜鱼骨的下脚料中加入降解酶胰蛋白酶或胃蛋白酶进行降解，然后过滤，浓缩、灭菌。虽然有上述关于鱼蛋白的提取工艺，但采用上述酶解工艺对三文鱼进行提取，酶解结果显示其水解度只能达到25-50%之间，水解程度较低，并且小肽分子量大于10000，蛋白肽呈现苦味，为消减苦味，目前常用的工艺是采用膜过滤，将10000以下的小肽分离出来，由此增加了分离难度、清洗膜的难度和污染。同时，三文鱼中的脂肪含量高达7.8%、胶质含量超过5%，酶解液不易分离和分层。采用常规的一步离心和膜分离相结合的方法无法将酶解液中的鱼油、胶质、脂和杂质彻底分离，也给膜分离带来了清洗的难度。另外酶解得物中游离氨基酸的含量过低，小于20%。上述酶解得物的指标远远达不到医药级蛋白肽粉的要求，因此有必要针对三文鱼的酶解工艺作进一步改进。
技术实现思路
为解决在利用三文鱼作为原料进行蛋白肽粉提取提纯过程中所存在的技术问题，本专利技术提供一种以三文鱼为原料生产医药级蛋白肽粉的方法。为实现上述技术目的，本专利技术采用的技术方案为：一种以三文鱼为原料生产医药级蛋白肽粉的方法，其特征在于，该方法含有下列步骤：S1、原料准备选择新鲜的或冷冻的三文鱼或其加工后剩余的副产物，如三文鱼碎肉、鱼排和鱼皮作为原料，要求三文鱼及其加工剩余副产物等原料的挥发性盐基氮小于40，破碎为0.5-1.5cm的碎块，将原料投入到酶水解反应釜中，添加原料重量3-4倍的软水；S2、第一步酶解选择木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶作为内切酶，其中木瓜蛋白酶、胃蛋白酶与胰蛋白酶的比例为：1：2：1，三种酶添加总量为底物重量的0.2-0.6%；酶解温度60-65℃，PH5-8.5,酶解时间3-6小时，将温度提升至85-95℃，灭酶30-40分钟，得酶解液；S3、第一步分离将酶解液送入到固液离心机中进行分离，离心机转速2500-3500转/分，离心差数0.85-0.95，将酶解后的鱼渣和酶解液分离，得到含有鱼油、胶质和脂肪的初滤酶解液；S4、第二步酶解选择氨肽酶或羧肽酶作为外切酶，氨肽酶或羧肽酶的添加量为初滤酶解液重量的0.1-0.5%，酶解温度45-55℃，酶解时间为2-5小时，将酶解液升温加热到85-90℃，25-30分钟进行灭酶处理；S5、第二步分离将通过S4步骤得到的酶解液送入高速液液离心机，离心机转速8000-10000转/分，将酶解液中的鱼油和脂肪分离出来，得到悬浊的酶解液；S6、酶解液静置在悬浊的酶解液中加入明矾，添加量为底物重量的0.02-0.05%，静置3-6小时，得沉降的酶解液；S7、第三步分离将沉降的酶解液，送入平板式离心，将絮凝物和大颗粒悬浮物体分离出来，得到澄清的酶解液，平板离心选用滤袋的目数600-1000目，离心机转数为800-1200转；S8、蛋白肽粉提取将澄清酶解液经过离子交换树脂柱脱盐和重金属，再经过微滤控制酶解液的分子量后，脱水，干燥，得到蛋白肽粉。进一步的，步骤S2、S4和S6中的酶解或静置是在密封状态下进行，在酶解的同时，向酶水解反应釜中充入氮气或将酶水解反应釜中抽成真空状态，保证酶解物与空气隔绝。本专利技术通过精选酶解所用的酶种，通过合理确定酶的添加量，控制酶解条件使所提取的蛋白肽粉的质量得到大幅度提高，水解过程中的水解度可达到90%，蛋白收益率可达70%以上，得到的蛋白肽粉蛋白含量达97%以上，18种氨基酸含量85%以上。同时通过两步酶解方法的采用，在酶解过程中采用内切酶第一次酶解与外切酶第二次酶解分开进行，酶解液中的游离氨基酸和小肽含量超过50%，且大大降低了苦味肽。通过上述两种方法提取的三文鱼蛋白肽粉各项指标能够完全满足医药级蛋白肽粉的要求。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术所提供的方法做进一步说明。实施例1一种以三文鱼为原料生产医药级蛋白肽粉的方法，其特征在于，该方法含有下列步骤：S1、原料准备选择优质三文鱼冻碎肉、鱼排和鱼皮1500公斤作为原料，要求三文鱼原料的挥发性盐基氮小于40，将原料粉碎至0.5~1.5cm碎块，投入到10m3的水解釜中，补充新鲜软水至原料重量的4倍。上述原料准备的过程中，原料还可以选用新鲜的三文鱼鱼肉、鱼骨，水解釜中软水的添加量控制为固型物的3-4倍之间，具体数值根据原料的含水量进行灵活掌控；S2、第一步酶水解向反应釜中添加内切酶，内切酶优选木瓜蛋白酶、胃蛋白酶及胰蛋白酶组成的复合酶，木瓜蛋白酶、胃蛋白酶与胰蛋白酶的添加重量比1：2：1，三种酶总量控制为酶解底物重量的0.5%，利用蒸汽将水解釜中的水及固物资加热至60℃，调整PH值至7.5，水解时间5小时，得酶解液；在该步骤中，要求酶解过程，酶解物与外界空气隔绝，具体做法是将水解反应釜抽成真空，或向水解釜中充入氮气，以避免细菌的滋生。另外在酶解过程中，酶解条件不受本实施例所提供的酶解条件限制，根据原料中鱼肉、鱼皮、内脏、鱼骨的各自含量合理调整酶解条件，一般酶解条件为：三种酶的添加总量控制为底物重量的0.3-0.6%之间，水解温度控制在60-65℃、PH值5-8.5、水解时间3-6小时。在本步骤中，利用内切酶的主要目的是将蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种以三文鱼为原料生产医药级蛋白肽粉的方法，其特征在于，该方法含有下列步骤：S1、原料准备选择新鲜的或冷冻的三文鱼或其加工后剩余的副产物，如三文鱼碎肉、鱼排和鱼皮作为原料，要求三文鱼及其加工剩余副产物等原料的挥发性盐基氮小于40，破碎为0.5‑1.5cm的碎块，将原料投入到酶水解反应釜中，添加原料重量3‑4倍的软水；S2、第一步酶解选择木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶作为内切酶，其中木瓜蛋白酶、胃蛋白酶与胰蛋白酶的比例为：1：2：1，三种酶添加总量为底物重量的0.2‑0.6%；酶解温度60‑65℃，PH5‑8.5,酶解时间3‑6小时，将温度提升至85‑95℃，灭酶30‑40分钟，得酶解液；S3、第一步分离将酶解液送入到固液离心机中进行分离，离心机转速2500‑3500转/分，离心差数0.85‑0.95，将酶解后的鱼渣和酶解液分离，得到含有鱼油、胶质和脂肪的初滤酶解液；S4、第二步酶解选择氨肽酶或羧肽酶作为外切酶，氨肽酶或羧肽酶的添加量为初滤酶解液重量的0.1‑0.5%，酶解温度45‑55℃，酶解时间为2‑5小时，将酶解液升温加热到85‑90℃，25‑30分钟进行灭酶处理；S5、第二步分离将通过S4步骤得到的酶解液送入高速液液离心机，离心机转速8000‑10000转/分，将酶解液中的鱼油和脂肪分离出来，得到悬浊的酶解液；S6、酶解液静置在悬浊的酶解液中加入明矾，添加量为底物重量的0.02‑0.05%，静置3‑6小时，得沉降的酶解液；S7、第三步分离将沉降的酶解液，送入平板式离心，将絮凝物和大颗粒悬浮物体分离出来，得到澄清的酶解液，平板离心选用滤袋的目数600‑1000目，离心机转数为800‑1200转；S8、蛋白肽粉提取将澄清酶解液经过离子交换树脂柱脱盐和重金属，再经过微滤控制酶解液的分子量后，脱水，干燥，得到蛋白肽粉。...

【技术特征摘要】
1.一种以三文鱼为原料生产医药级蛋白肽粉的方法，其特征在于，该方法含有下列步骤：S1、原料准备选择新鲜的或冷冻的三文鱼或其加工后剩余的副产物，如三文鱼碎肉、鱼排和鱼皮作为原料，要求三文鱼及其加工剩余副产物等原料的挥发性盐基氮小于40，破碎为0.5-1.5cm的碎块，将原料投入到酶水解反应釜中，添加原料重量3-4倍的软水；S2、第一步酶解选择木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶作为内切酶，其中木瓜蛋白酶、胃蛋白酶与胰蛋白酶的比例为：1：2：1，三种酶添加总量为底物重量的0.2-0.6%；酶解温度60-65℃，PH5-8.5,酶解时间3-6小时，将温度提升至85-95℃，灭酶30-40分钟，得酶解液；S3、第一步分离将酶解液送入到固液离心机中进行分离，离心机转速2500-3500转/分，离心差数0.85-0.95，将酶解后的鱼渣和酶解液分离，得到含有鱼油、胶质和脂肪的初滤酶解液；S4、第二步酶解选择氨肽酶或羧肽酶作为外切酶，氨肽酶或羧肽酶的添加量为初滤酶解液重量的0.1-0.5%，酶...

【专利技术属性】
技术研发人员：周伟，万弘，
申请(专利权)人：荣成鸿德海洋生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37