通佐溴胺在制备能够阻断p97与Npl4的相互作用的抑制剂中的用途制造技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，具体涉及通佐溴胺在制备能够阻断p97与Npl4的相互作用的抑制剂中的用途。本发明专利技术首次发现，通佐溴胺能够有效阻断p97与Npl4的相互作用，促进RIG-I介导的IFNβ信号通路从而提高抗病毒感染能力进而起到治疗病毒感染的作用，极具临床和市场价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，具体涉及通佐溴胺在制备能够阻断p97与Npl4的相互作用的抑制剂中的用途。
技术介绍
病毒感染能够引起机体强烈的抗病毒免疫反应，天然免疫是机体抵抗病毒感染的第一道屏障，通过机体内的病原识别受体，包括toll样受体(TLR)、RIG-I样受体(RLRs)可以识别病毒核酸。被激活的受体可以启动下游转录因子NF-κB和干扰素调节因子IRF的信号转导途径，产生一系列促炎症细胞因子和I型干扰素(typeIinterferons,typeIIFN)。I型干扰素的释放能够促进下游基因的转录从而有效的抑制病毒的进一步复制。同时，I型干扰素的分泌还能够激活包括树突状细胞，NK细胞，单核细胞和巨噬细胞在内的参与固有免疫应答的细胞。此外，I型干扰素的分泌也能够直接激活T细胞和B细胞，进而产生适应性免疫应答反应。天然免疫的精确调控对于抗病毒感染以及防止自身免疫疾病的感染或机体产生免疫炎症都至关重要。泛素化是RLR受体介导信号通路的主要调控方式，以其代表性受体RIG-I为例，结合病毒RNA激活RIG-I产生构象变化，招募泛素连接酶，使RIG-I发生K63链泛素化，激活下游NF-κB以及IRF3的转录，促进促炎因子及I型干扰素的表达，增强其抗病毒活性。另一方面，泛素连接酶c-Cbl及RNF125使RIG-I发生K48链泛素化，终止该通路的免疫反应，抑制其抗病毒活性。p97属于II型ATP酶家族，它参与包括内质网及线粒体参与的蛋白降解，自噬，细胞膜重组，DNA修复，细胞周期以及性别决定等一系列的生理过程。p97与其辅助因子Npl4，Ufd1，p47，UBXD7以及FAF1结合，并利用其分离酶的活性将底物从其细胞环境中剥离，最终多数进入蛋白酶体降解。已有的研究表明p97与其辅因子Npl4组成复合物参与内质网及线粒体降解途径等一系列生理过程，p97-Npl4复合物能够通过介导IκBα的降解来促进TNFα诱导的NF-κB信号通路。近来也有研究发现p97参与TRIM21介导的病毒中和作用。通佐溴铵(thonzoniumbromide),CAS编号553-08-2，分子式:C32H55N4O+.Br-，为单阳离子去垢剂。目前已知其生物学功能包括用于包被非病毒载体，作为潜在的、用于人类基因治疗的、安全的基因投递方式；酸化酵母细胞质，抑制液胞膜上ATP依赖的质子泵，破坏V-ATPase的功能，引起pH敏感导致的酵母细胞生长缺陷。但是现有技术中并未见p97在病毒感染免疫中的作用。与此同时，现有技术当中，也未曾报道通佐溴胺(ThonzoniumBromide，CAS编号为553-08-2)在在病毒感染免疫中的作用。
技术实现思路
本专利技术的目的在于公开通佐溴胺在制备能够阻断p97与Npl4的相互作用的抑制剂中的用途。p97基因的核苷酸序列在Genebank中序列号为NM_007126.3的序列。本专利技术通过广泛而深入的研究发现，通佐溴胺能够有效阻断p97与辅助因子Npl4之间的相互作用，抑制RNF125介导的RIG-I的K48链泛素化，进而抑制RIG-I降解，从而促进RIG-I介导的IFNβ信号通路，最终起到提高抗病毒感染能力的作用。为实现本专利技术的目的及其他相关目的，本专利技术采用以下技术方案：本专利技术的第一方面，提供了通佐溴胺在制备能够阻断p97与Npl4的相互作用的抑制剂中的用途。优选的，所述抑制剂能够抑制RNF-125介导的RIG-I的K48链泛素化。优选的，所述抑制剂能够抑制RIG-I的蛋白酶体降解。优选的，所述抑制剂能够促进RIG-I介导的IFNβ信号通路。优选的，所述抑制剂能够起到提高抗病毒感染能力进而起到治疗病毒感染的作用。进一步的，本专利技术的第二方面，提供了通佐溴胺在制备治疗病毒感染的药物组合物中的用途。优选的，所述病毒感染为RNA病毒感染。更优选的，所述病毒感染为VSV病毒感染或SeV病毒感染。优选的，所述通佐溴胺为所述治疗病毒感染的药物组合物的药效成分之一。更优选的，所述通佐溴胺为所述治疗病毒感染的药物组合物的唯一药效成分。优选的，所述通佐溴胺是通过促进RIG-I介导的IFNβ信号通路从而提高抗病毒感染能力进而起到治疗病毒感染的作用的。优选的，所述通佐溴胺是通过抑制RIG-I的蛋白酶体降解从而起到促进RIG-I介导的IFNβ信号通路的作用的。优选的，所述通佐溴胺是通过抑制RNF-125介导RIG-I的K48链泛素化从而起到抑制RIG-I的蛋白酶体降解的作用的。优选的，所述通佐溴胺是通过抑制RNF125与RIG-I之间的相互作用从而起到抑制RNF-125介导的RIG-I的K48链泛素化的作用的。优选的，所述通佐溴胺是通过阻断p97与Npl4的相互作用来抑制p97-Npl4复合物的形成，进而抑制RNF125与RIG-I之间的相互作用的。进一步的，治疗病毒感染的药物组合物还包含药学上可接受的赋形剂。术语“包含”指“含有”和“由﹍构成”，例如“包含”X的组合物可以完全由X构成，或者可以含有X之外的物质，例如X-Y。本文所用的术语“治疗有效量”指治疗剂治疗、缓解或预防目标疾病或状况的量，或是表现出可检测的治疗或预防效果的量。该效果例如可通过化学标记或抗原水平来检测。治疗效果也包括生理性症状的减轻。对于某一对象的精确有效剂量取决于该对象的体型和健康状况，病症的性质或程度、以及选择给予的治疗剂和/或治疗剂的组合。因此，预先指定准确的有效量是没用的。然而，对于某给定的症状而言，可以用常规实验来确定该有效量，临床医师是能够判断出来的。所述药学上可接受的赋形剂(或运载体)指用于治疗剂给药的赋形剂，其本身及其用量不应诱导接受该组合物的个体产生有害的抗体，且给药后没有过分的毒性。药学上可接受的赋形剂通常包括无毒的固体、半固体或液体填充剂、稀释剂、包裹材料或任何常规类型的制剂辅助物。合适的赋形剂包括但不仅限于水、葡萄糖、甘油、盐水、乙醇或其组合。所述赋形剂还包含有其他试剂如湿润剂或乳化剂、pH缓冲剂或增强制剂效力的佐剂。其他材料如抗氧化剂、保湿剂、粘度稳定剂和类似试剂可根据需要添加。脂质体也包括在药学上可接受的赋形剂的定义中。通常，可将药物组合物制成可注射剂，例如液体溶液或悬浮液；还可制成在注射前适合配入溶液或悬液中、液体载体的固体形式。本专利技术的有益效果为：本专利技术首次发现，通佐溴胺能够有效阻断p97与Npl4的相互作用，促进RIG-I介导的IFNβ信号通路从而提高抗病毒感染能力进而起到治疗病毒感染的作用，极具临床和市场价值。附图说明图1.p97通过其ATP酶活性抑制IFNβ介导的抗病毒反应。(A)HEK293T细胞中转染p97小干扰RNA或对照RNA，SeV刺激12h后，IFNβ(左)，PRDIII-I(中)以及ISRE(右)报告基因的转录活性。(B)在p97敲除的细胞中，SeV刺激后，IFNB(左)，RANTES(中)以及ISG56(右)的转录水平。(C-D)p97敲除的细胞中，poly(I:C)，poly(dA:dT)，SeV或VSV-GFP处理后报告基因(C)以及Q-PCR(D)的结果。(E-F)转染了p97小干扰RNA的MEF细胞感染VSV-GFP病毒后，荧光相差显微镜检测(E)以及细胞流式实验结果(F)本文档来自技高网...

【技术保护点】
通佐溴胺在制备能够阻断p97与Npl4的相互作用的抑制剂中的用途。

【技术特征摘要】
1.通佐溴胺在制备能够阻断p97与Npl4的相互作用的抑制剂中的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述抑制剂能够抑制RNF-125介导的RIG-I的K48链泛素化。3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述抑制剂能够抑制RIG-I的蛋白酶体降解。4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述抑制剂能够促进RIG-I介导的IFNβ信号通路。5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述抑制剂能够起到提高抗病毒感染能力进而起到治疗病毒感染的作用。6.通佐溴胺在制备治疗病毒感染的药物组合物中的用途。7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，所述通佐溴胺是通过促进RIG-I介导的IFNβ信号通路从而提高抗病毒感染能力进而起到治疗病毒感染的...

【专利技术属性】
技术研发人员：周兆才，焦石，
申请(专利权)人：中国科学院上海生命科学研究院，
类型：发明
国别省市：上海;31