鉴定肠膜明串珠菌肠膜亚种的引物及其方法与应用技术

本发明专利技术提供了一种鉴定肠膜明串珠菌肠膜亚种的引物及其方法与应用。本发明专利技术鉴定肠膜明串珠菌肠膜亚种的引物是利用GH70糖基转移酶编码基因中高度保守的GH70结构域编码区设计成的，该引物对其高度变异的区域进行扩增，通过对扩增所得的片段进行测序及随后的序列比对分析来实现肠膜明串珠菌在肠膜亚种水平上的鉴定。本发明专利技术公开的引物能对肠膜明串珠菌实现亚种水平上的鉴定，利用该引物的鉴定方法相比传统的生化鉴定方法更加高效，可用于对食品行业中潜在的发酵剂菌株进行快速、简便的鉴定，从而为新的菌株在食品中的应用提供依据，加速新的菌种资源在食品领域的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于食品生物的
，具体涉及一种鉴定肠膜明串珠菌肠膜亚种的引物及其方法与应用。
技术介绍
目前，通过分离筛选的方法获得的肠膜明串珠菌(Leuconostocmesensteroides)是一种植物附生菌，常见于传统发酵乳制品和泡菜中。因其能发酵产生乳酸及双乙酰类物质，被认为对这些传统食品的风味有重要贡献。2012年卫生部将肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostocmesensteroidessubsp.mesenteroides)列入可用于食品的菌种目录(卫生部公告2012年第8号)，关于肠膜明串珠菌的发酵特性及其特殊生理活性的研究逐步深入。已有研究证实，肠膜明串珠菌能发酵糖类产生乳酸，具有高产酸能力、抗氧化能力和拮抗致病菌等能力。目前肠膜明串珠菌肠膜亚种在食品领域已被广泛应用于风味剂；并且因其特殊的生理活性，未来有望成为新型微生态制剂。特性的肠膜明串珠菌菌株是未来功能性食品开发的一个重要方向。已有很多学者从传统食品中分离到具有良好发酵特性及生理活性的菌株。然而，目前对于肠膜明串珠菌肠膜亚种的鉴定尚缺少十分高效的技术手段。传统的生化鉴定方法繁琐、耗时；经典的分子生物本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鉴定肠膜明串珠菌肠膜亚种的引物，其特征在于，该引物如序列表SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示。

【技术特征摘要】
1.一种鉴定肠膜明串珠菌肠膜亚种的引物，其特征在于，该引物如序列表SEQIDNO.1、SEQIDNO.2所示。2.根据权利要求1所述的鉴定肠膜明串珠菌肠膜亚种的引物，其特征在于，该引物是通过GH70糖基转移酶编码基因设计得到的。3.一种鉴定肠膜明串珠菌肠膜亚种的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)提取待测菌株样品的基因组DNA；(2)以菌株样品的基因组DNA为模板，采用SEQIDNO.1、SEQIDNO.2所示的引物，进行PCR扩增，得到PCR扩增产物；(3)对PCR扩增产物进行双向测序，获得整个扩增片段的序列；(4)对扩增片段的序列进行Blastn分析，通过比对得到相似度最高的序列所对应的物种，从而判断待测菌株为哪种肠膜明串珠菌肠膜亚种。4.根据权利要求3所述的肠膜明串珠菌肠膜亚种的鉴定方法，其特征在于，步骤(2)中，PCR扩增的反应体系为：2ng/μlDNA模板2μl、0.5μmol/L引物1μl、0.2mmol/LdNTP2μl、1.5mmol/L的MgSO41μl、10×PCR反应缓冲液2μl、5U/μlrTaqDNA聚合酶0...

【专利技术属性】
技术研发人员：鄢明辉，吴正钧，刘振民，高彩霞，韩瑨，
申请(专利权)人：光明乳业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31