用于检测唾液中分析物的设备和方法技术

本发明专利技术提供了用于检测药物滥用或者唾液中其它化合物的设备。因此，本发明专利技术提供了用于检测唾液样品中一种或多种分析物存在的设备，包括：(a)一个或多个预处理区域，用于特异性或者非特异性移除干扰一种或多种分析物检测的唾液样品成分的至少一部分；以及(b)包括生物传感器表面的检测区域，该表面包括：能够特异性结合一种或多种分析物的分子；或者一种或多种分析物和/或分析物类似物。

【技术实现步骤摘要】
本申请是2009年05月26日提交的申请号为200980119462.2、名称为“用于检测唾液中分析物的设备和方法”的专利技术专利申请的分案申请。
本专利技术涉及用于对唾液样品中的分子进行检测和/或量化的设备和方法。该方法和设备结合了预处理和检测。
技术介绍
在诊断测试中，必须对一个或多个特定目标分子或分析物进行测量。这通常通过允许目标分子在(生物化学)反应中相互作用完成，其直接或间接地导致可检测的信号。
技术实现思路
目前，在商业上可用的许多设备和方法可执行路边药物测试。这些设备和方法中的大部分是基于目标的免疫学检测，该检测直接在样品上执行，在WO02/082040中，描述了用于确定体液中不同分析物特别是药物的“一个设备”的系统。经具有吸收垫的设备的收集端收集体液，(随着设备的收集端通过压力头)收集设备的盖(cap)内部的一系列压力头迫使样品进入包括用于药物检测的诊断条的免疫测定系统的核心。样品中的药物与固定在对彩色微球体上的受限抗体位置的薄膜支撑上的药物配合物(conjugate)竞争。彩色线指示相关药物存在或者不存在于样品中。将一部分样品保留在确认样品保留孔(well)中，将其与外部密封并且存储用于进一步测试。然而，已经证明这些测试中的大多数是不令人满意的，主要是对于化验的灵敏度。这部分是由于唾液中的大多数药物浓度总是在某种程度上低于血液或者尿液中的浓度的事实造成的。然而，更重要的是，唾液包含干扰许多检测方法的成分。虽然唾液大部分由水组成，但是它另外包含许多不同的物质。这些物质包括电解质(例如，钠、钾、钙、镁、氯化物、碳酸氢盐、磷酸盐)、抗菌化合物(例如，硫氰酸盐(thyocyanate)、过氧化氢、免疫球蛋白A)、酶(例如，淀粉酶、溶菌酶、脂酶、磷酸酶、酰胺酶、脱氢酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶、转移酶、异构酶)、细胞(即，产生唾液的动物或人的细菌细胞和宿主细胞)、以及诸如荷尔蒙的其它化合物。然而，最重要的是，唾液包含主要由粘多糖和糖蛋白组成的粘液。唾液中发现的一类重要的糖蛋白是粘蛋白。其是大的重糖基化蛋白质家族。至少19个人类粘蛋白基因以cDNA克隆为特征——MUC11、2、3A、3B、4、5AC、5B、6-9、11-13和15-19。粘蛋白被分泌为具有大约0.1至1000万多巴胺(Da)分子量的蛋白质的大聚合物。在这些聚合物内，虽然分子间二硫键也可以在该过程中发挥作用，但是主要通过非共价键相互作用将单体彼此联接。已经证明粘蛋白是大多数唾液样品的假阳性测试的原因。为了精确地确定唾液中药物的存在，需要事先提取分析物或者移除干扰成分(如粘蛋白)。典型情况下，使用固相清除系统移除干扰化合物或者通过结合到静止相来隔离感兴趣的分析物。未结合的化合物被冲走并且冲出镜筒外。在分析物结合到镜筒的位置处，其后就使用能够使被吸附的分析物从静止相脱落的适当缓冲剂洗脱分析物。备选地，在结合了干扰化合物的情况下，直接收集包含分析物的洗脱液。在使用诸如但不限于酶联免疫吸附测定(ELISA)、放射免疫测定(RIA)、高性能液体色谱分析法(HPLC)、液相色谱-质谱测定法(LC-MS)和气相色谱-质谱测定法(GC-MS)的方法进行分析之前，为了预先浓缩，可选地蒸发洗脱液，并且将其重新溶解在较小体积中。然而，传统的分析方法具有若干缺点。首先，这些方法耗时又费钱。此外，它们往往需要复杂的仪器和执行分析的人员方面相对较高的技能。因此，存在对测试设备和方法的需求，其允许对唾液中分析物的准确并且灵敏的检测而不需要大量装备或者训练有素的技术人员。本专利技术提供了由其在相同设置中顺序执行样品的预处理和检测的设备和方法，其提供了易于操控性、以及高专业性和灵敏度。这些方法和设备尤其用于唾液中分析物的检测。此外，这些方法和设备允许在实验室环境之外使用。将预处理区域与检测区域集成在一台设备中提供了若干优点。存在更少的用户干预样品的需求。因此，存在更少由样品操控引入误差的机会。同时，需要更少的样品材料。事实上，在当把样品材料从一个设备转移到另一个设备时的情况下，没有样品损失。此外，这确保了用户与样品材料的最小接触，最小化样品污染的风险。本专利技术的方法和装置设想了检测之前的样品预处理，由此移除干扰检测的成分。这允许在设备中使用可磁化粒子而不影响灵敏度或特异性。事实上，在与可磁化粒子接触之前移除通常引起可磁化粒子聚合的干扰组分。这导致背景信号减少或者非特异性结合减少。此外，本专利技术的方法和设备允许基于磁激励的检测。由于能够使用磁激励进一步加快诊断测试并且简化诸如微流体设备中的射流技术，所以这特别重要。因此，本专利技术中所描述的方法和设备提供了用于确定唾液中分析物的快速、灵敏、并且鲁棒的工具。这里所描述的设备和方法还特别适合于在间接检测方法中使用，即在其中检测未结合的分析物或者分析物特异性试剂作为对样品中存在分析物以及可选地分析物数量的测度的方法，例如竞争化验。能够将本专利技术的设备和方法用于需要最少处理的测试，特别是在实验室环境之外(例如，路边测试，即时护理测试)。因此，可以将设备提供为一次性使用的设备、或者作为微流体设备中的料盒。因此，本专利技术提供了用于检测唾液样品中一种或多种分析物的存在的设备，其包括：(a)一个或多个预处理区域，用于特异性或者非特异性移除干扰唾液样品中一种或多种分析物检测的组分的至少一部分；以及(b)包括生物传感器表面的检测区域，该表面包括：-能够特异性结合一种或多种分析物的分子；或者-该一种或多种分析物和/或分析物类似物。根据特定实施例，提供了是微流体设备的设备。根据备选的特定实施例，提供了是侧流设备的设备。根据特定实施例，提供了这样的设备，其中，一个或多个预处理区域包括在容纳涂覆有这样的分子的可磁化粒子的一个或多个分离室中，该分子能够特异性或者非特异性结合到唾液样品中干扰一种或多种分析物的检测的成分。特别地，这些可磁化粒子是顺磁性或者超顺磁性粒子。在备选实施例中，给设备提供一个或多个包括表面的预处理区域，该表面包括能够特异性或者非特异性结合到唾液样品中干扰一种或多种分析物的检测的成分的分子。可以将结合到唾液样品中的成分的分子结合到该表面，或者该表面可以大部分或者本质上由这样的分子组成。前者是设想使用能够特异性结合的分子时的典型情况，后者是设想使用非特异性结合到唾液样品中成分的分子时的情况。然而，这仅仅是一般规则，并且不应该解释为限制该实施例。根据另一个特定实施例，提供了包括表面的设备，该表面包括能够特异性或者非特异性结合到唾液样品中干扰一种或多种分析物的检测的成分的分子，该表面是多孔的。根据另一个特定实施例，多孔表面是烧结多孔结构。根据特定实施例，提供了包括结合到唾液样品中干扰一种或多种分析物的检测的成分的分子的设备，其为羟基磷灰石。根据特定实施例，提供了包括特异性结合到唾液样品中干扰一种或多种分析物的检测的成分的分子的设备，该分子是抗体。根据另一些特定实施例，抗体是对抗聚合因子的抗体。根据大多数特定实施例，抗体是抗粘蛋白抗体。根据特定实施例，提供了包括用于在样品与检测区域接触之前容纳唾液样品的中间区域的设备。该中间区域可以简单地用于传输样品(例如，诸如微流体设备中的微流体通道的通道；或者测流设备中的惰性区域)。然而，中间区域还可以具本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于检测唾液样品中一种或多种分析物的存在的设备，包括：(a)一个或多个预处理区域，用于特异性或者非特异性移除所述唾液样品中干扰所述一种或多种分析物的检测的组分的至少一部分；以及(b)包括生物传感器表面的检测区域，所述表面包括：‑能够特异性结合所述一种或多种分析物的分子；或者‑所述一种或多种分析物和/或分析物类似物。

【技术特征摘要】
2008.05.27 EP 08156984.01.一种用于检测唾液样品中一种或多种分析物的存在的设备，包括：(a)一个或多个预处理区域，用于特异性或者非特异性移除所述唾液样品中干扰所述一种或多种分析物的检测的组分的至少一部分；以及(b)包括生物传感器表面的检测区域，所述表面包括：-能够特异性结合所述一种或多种分析物的分子；或者-所述一种或多种分析物和/或分析物类似物。2.如权利要求1所述的设备，其是微流体设备。3.如权利要求1所述的设备，其中，所述一个或多个预处理区域被包括在容纳可磁化粒子的一个或多个分离室内，该可磁化粒子涂覆有能够特异性或者非特异性结合到所述唾液样品中干扰所述一种或多种分析物的检测的成分的分子。4.如权利要求1所述的设备，其中，所述一个或多个预处理区域包括表面，该表面包括能够特异性或者非特异性结合到所述唾液样品中干扰所述一种或多种分析物的检测的成分的分子。5.如权利要求4所述的设备，其中，所述表面是多孔的。6.如权利要求5所述的设备，其中，所述表面是烧结多孔结构。7.如权利要求4所述的设备，其中，结合到所述唾液样品中干扰所述一种或多种分析物检测的成分的所述分子是羟基磷灰石。8.如权利要求7所述的设备，其中，所述抗体是抗粘蛋白抗体。9.如权利要求1所述的设备，其还包括中间区域，用于在使所述样品...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·H·尼乌文赫伊斯，A·M·T·杰汉利，F·K·德泰耶，E·G·M·佩尔塞斯，
申请(专利权)人：皇家飞利浦有限公司，
类型：发明
国别省市：荷兰;NL