The invention relates to the field of water environment monitoring, in particular to a method for extracting and determining chlorophyll a in water. The specific steps are as follows: (1) the collection of water samples; (2) the concentration of water samples; (3) extraction of chlorophyll a; (4) the standard curve drawing; (5) determination of chlorophyll a. The present invention provides a method and determination, phytoplankton chlorophyll a extraction has the advantages of simple operation, transfer less, reduce the sample loss; human error in grinding is avoided, the data is stable, high precision and quick detection; at the same time, as far as possible to reduce the human body and the contact time of acetone.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及水环境监测领域,具体的说是一种水体中浮游植物叶绿素a提取与测定方法。
技术介绍
叶绿素a是植物光合作用中的重要光合色素,其含量可以反映植物的生长状况。叶绿素a属于合成天然低分子有机化合物,不溶于水,溶于有机溶剂,如丙酮、乙醚、氯仿等。在水环境的富营养化研究中,叶绿素a的含量是表征浮游植物生物量的最常用指标之一。如今广泛应用于水质评价和水体富营养化评价等方面,水质监测技术规范中明确规定湖泊水库叶绿素属于常规监测项目。目前对水体中浮游植物叶绿素a提取与测定的的方法众多,目前使用较多的是依据《水和废水监测分析方法(第四版)》书中采用研磨-丙酮提取分光光度法作为方法。该法采用90%丙酮为溶剂,通过反复研磨、浓缩、离心来提取测定叶绿素a的浓度。但是在实验中发现此法存在一些问题:比如研磨过程中易造成组织中叶绿素的流失,操作繁琐,人为误差较大,准确性和安全性低等。鉴于此,对现有方法进行一定的改进,研究一种新的提取与测定叶绿素a的方法:提取方法为反复冻融-浸提法,测定方法为荧光光度法,对监测水体富营养化程度,治理受损水环境具有重要的意义。
技术实现思路
针对现有技术中的问题,本专利技术提供了一种水体中浮游植物叶绿素a提取与测定方法。其能有效提取水中浮游植物叶绿素a,具有人为误差小、稳定性好、操作简单、快捷且安全,也提高了测量精度,减少了实验误差。本专利技术所要解决的技术问题采用以下技术方案来实现:一种水体中浮游植物叶绿素a提取与测定方法,其具体步骤如下:(1)水样的采集:在水面以下0.5m通过水样采集器采集500ml水样,存于棕色玻璃瓶中,并加入0.5%碳酸镁 ...
【技术保护点】
一种水体中浮游植物叶绿素a提取与测定方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)水样的采集:在水面以下0.5m通过水样采集器采集500ml水样,存于棕色玻璃瓶中,并加入0.5%碳酸镁悬浊液1ml,以防止酸化引起色素溶解;(2)水样的浓缩:在抽滤器上装好滤膜,使用0.45μm醋酸纤维滤膜,倒入100ml水样进行抽滤,抽滤时负压不能过大,在水样刚刚完全通过滤膜时结束抽滤,用滤纸吸干剩余水分,每个水样需准备2个滤膜用来做平行实验;(3)叶绿素a的提取:将抽滤后的滤膜放入比色管中,放入‑5℃低温中冷冻20min,取出放置于室温下5min,此过程反复5次后向比色管中加入10ml的90%丙酮溶液,剧烈震荡后放置于4℃中避光提取12小时,期间应再震荡3次以上,最后放入高速离心机以5000r/min速度离心30min;(4)标准曲线的绘制:使用标准储备液稀释至一定浓度作为标准使用液,通过分子荧光光谱仪以定量模式进行荧光强度测定,并以90%丙酮溶液为空白参比测定荧光强度,绘制一定叶绿素a浓度与荧光强度标准曲线;(5)叶绿素a的测定:取上清液于分子荧光光谱仪比色皿中,用90%丙酮溶液作参比,即空白荧光强度测定, ...
【技术特征摘要】
1.一种水体中浮游植物叶绿素a提取与测定方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)水样的采集:在水面以下0.5m通过水样采集器采集500ml水样,存于棕色玻璃瓶中,并加入0.5%碳酸镁悬浊液1ml,以防止酸化引起色素溶解;(2)水样的浓缩:在抽滤器上装好滤膜,使用0.45μm醋酸纤维滤膜,倒入100ml水样进行抽滤,抽滤时负压不能过大,在水样刚刚完全通过滤膜时结束抽滤,用滤纸吸干剩余水分,每个水样需准备2个滤膜用来做平行实验;(3)叶绿素a的提取:将抽滤后的滤膜放入比色管中,放入-5℃低温中冷冻20min,取出放置于室温下5min,此过程反复5次后向比色管中加入10ml的90%丙酮溶液,剧烈震荡后放置于4℃中避光提取12小时,期间应再震荡3次以上,最后放入高速离心机以5000r/min速度离心30min;(4)标准曲线的绘制:使用标准储备液稀释至一定浓度作为标准使用液,通过分子荧光光谱仪以定量模式进行荧光强度测定,并以90%丙酮溶液为空白参比测定荧光强度...
【专利技术属性】
技术研发人员:欧阳卓智,雒建伟,杨茗,高良敏,刘诗敏,黄肖萌,
申请(专利权)人:安徽理工大学,
类型:发明
国别省市:安徽;34
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