一种植物乳杆菌增殖剂及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种植物乳杆菌增殖剂，该植物乳杆菌增殖剂是通过蛋白酶或含有蛋白酶的物质降解植物蛋白反应后的酶解混合物，其中蛋白酶是植物蛋白酶、动物蛋白酶或者微生物蛋白酶中一种或混合物，用于降解的植物蛋白是大豆蛋白、绿豆蛋白、鹰嘴豆蛋白、蚕豆蛋白、豌豆蛋白、扁豆蛋白、小麦蛋白中的一种或其混合蛋白；本申请还公开了该植物乳杆菌增殖剂用于增加植物乳杆菌活菌的应用，使用植物乳杆菌增殖剂可以增殖植物乳杆菌活菌达到1.0×109cfu/g。本申请的植物乳杆菌增殖剂：(1)属于天然可食用混合物，对人体不会产生副作用；(2)增殖剂在使用中缩短了发酵时间，可避免有害杂菌的污染；(3)活菌数大大高于其他增殖剂所产生的活菌数；(4)使用成本低。

Plant lactobacillus proliferation agent and application thereof

The invention discloses a plant lactobacillus plantarum breeder, the breeder is a mixture of plant protein by protease degradation reaction or containing protease after enzymatic hydrolysis, the protease is plant protease, protease or animal microbial protease or a mixture used for the degradation of plant protein is soy protein, mung bean protein chickpea protein, protein, bean, lentil, pea protein protein, wheat protein in one or the mixture of proteins; the invention also discloses the application of Lactobacillus proliferation agent for increasing plant Lactobacillus bacteria bacteria, plant lactobacillus proliferation can reach 1 * 109cfu/g using Lactobacillus proliferation agent. The application of Lactobacillus proliferation agent: (1) is a kind of natural edible mixture, have side effects on the human body does not; (2) the proliferation of agents in use shortens the fermentation time, can avoid the harmful bacteria pollution; (3) the number of live bacteria is much higher than the number of living bacteria proliferation caused by other agents; (4) the use of low cost.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物发酵及食品加工
中,特别是在发酵类食品中，对提高植物乳杆菌活菌数量起重要作用的一种植物乳杆菌增殖剂及其应用。
技术介绍
益生菌是一类对宿主有益的活性微生物，是定植于人体肠道、生殖系统内，能产生确切健康功效从而改善宿主微生态平衡、发挥有益作用的活性有益微生物的总称。目前世界上研究的功能最强大的产品主要是各类微生物组成的复合活性益生菌，其广泛应用于生物工程、工农业、食品安全以及生命健康领域，其益生功能越来越受广大消费者的认同和欢迎。植物乳杆菌属于益生菌中的一种，它能够有效耐受人体消化系统,具有调节肠内菌群平衡、促进人体消化吸收、调节胆固醇、调节血脂、增强人体免疫及预防癌症和抑制肿瘤生长等益生保健功能。因此,开发高活菌数的纯植物乳杆菌产品,对于提高消费者健康具有积极意义。目前市场上的益生菌产品主要是以嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌为主要发酵剂，同时添加其它有功能的益生菌，纯益生菌发酵产品少之又少，且所有活菌产品都未进行杂菌检测。由于植物乳杆菌在牛乳中生长缓慢，产酸能力差，难以凝乳。国内外有不少研究尝试解决此问题，但都存在一些缺陷，实际生产困难。论文《植物乳杆菌ST-Ⅲ在脱脂乳体系中生长限制因子的研究》[陈帅等,食品与发酵工业,2008,34(10):53～57]以及《有效外源添加物鱼蛋白胨组分的分级分离研究》[陈帅等,乳业科学与技术,2010,4:201～204〕研究了鱼蛋白胨中不同蛋白组分等对植物乳杆菌在乳中发酵的促进作用,但所用的鱼蛋白胨为试剂级的；同时发酵时间较长(24h),成本高，难以满足实际产品生产要求。专利《一种活性植物乳杆菌饮品及其制备方法》[马成杰等，CN102715235A：2012-10-10]公开了一种活性植物乳杆菌增殖剂配方，植 物乳杆菌活含量高。但所用试剂组成复杂，发酵时间较长(24-72h)。专利《一种植物乳杆菌发酵乳及其制备方法》[马成杰等,CN103004984A：2013-04-03]公开了一种植物乳杆菌发酵乳及其制备方法，主要是添加适量氨基酸、核苷酸，解除了植物乳杆菌在乳中生长繁殖的限制性因子。但添加剂组成复杂，成本高；且纯植物乳杆菌发酵时发酵时间较长(15h)。论文《植物乳杆菌ST-Ⅲ脱脂乳的发酵工艺优化》[华宝珍等，农业工程学报,2014,30(23711):276-284]研究了大豆多肽对植物乳杆菌的增殖作用，活菌数较高；但发酵时间较长(48h)。国外研究植物乳杆菌增殖的较少,其中有家日本公司利用谷物酒糟提取物增殖植物乳杆菌,但只对部分植物乳杆菌有增殖作用,且发酵时间较长(大于16h)，特别是对有些植物乳杆菌(如植物乳杆菌ST-Ⅲ)增殖效果不理想。这主要是因为植物乳杆菌基因差异较大，不同菌株营养需求不一样。以上国内外研究都忽略植物乳杆菌纯发酵产品中的杂菌污染检测。如果所研究的增殖方法即使具有发酵时间短，活菌数高的特点，但没有检测杂菌，都是没有意义的。大家知道乳及常见食品中常含有耐热的芽孢杆菌污染，难以杀灭，如果植物乳杆菌不能尽快生长从而抑制杂菌生长，发酵乳中的杂菌将大大超标；特别是一些有害菌如蜡状芽孢杆菌、葡萄球菌等将严重危害人体健康。这就要求所研究的植物乳杆菌的增殖方法不但有增菌效果好，活菌数高；而且要生长快速，从而抑制杂菌生长。为缩短植物乳杆菌在乳中生长与产酸时间，在发酵的过程中添加增殖剂是一种可行的方案。探索增殖剂的成份是提高植物乳杆菌活性(增加活菌数量)、降低发酵时间以实现有害杂菌的控制的关键。
技术实现思路
本申请的技术方案要解决的技术问题是针对现有的植物乳杆菌增殖剂在对部分特定植物乳杆菌有增殖作用，且发酵时间较长，增殖效果并不明显的缺陷，提出一种新型增殖剂。通过该增殖剂的添加可以显著提高植 物乳杆菌含量、发酵时间较短、口感良好、降低了杂菌污染，解决了发酵活菌产品的技术难题。实现上述专利技术目的技术方案为：一种植物乳杆菌增殖剂，该植物乳杆菌增殖剂是通过蛋白酶或含有蛋白酶的物质降解植物蛋白反应后的酶解混合物。上述蛋白酶是植物蛋白酶、动物蛋白酶或者微生物蛋白酶中一种或混合物；含有蛋白酶的物质是含有植物蛋白酶的物质、动物蛋白酶的物质或者微生物蛋白酶的物质中一种或混合物。植物蛋白可以选择大豆蛋白、绿豆蛋白、鹰嘴豆蛋白、豌豆蛋白、蚕豆蛋白、扁豆蛋白、小麦蛋白或上述蛋白的混合物。上述植物蛋白酶通常选择水果蛋白酶、蔬菜蛋白酶、药用植物蛋白酶(如罗汉果蛋白酶、山药蛋白酶)或其混合物。含有这些植物蛋白酶的物质是水果、蔬菜或药用植物。若选择动物蛋白酶，则具体可以是胰蛋白酶、胃蛋白酶、胰凝乳蛋白酶或其混合物。若选择微生物蛋白酶，则可以具体为地衣芽孢杆菌蛋白酶、黑曲霉蛋白酶、解淀粉芽孢杆菌蛋白酶、枯草芽孢杆菌蛋白酶、米黑根毛霉蛋白酶、米曲霉蛋白酶、乳克鲁维酵母蛋白酶、微小毛霉蛋白酶、蜂蜜曲霉蛋白酶、寄生内座壳(栗疫菌)蛋白酶中的一种或其混合物。本专利技术还提出了该植物乳杆菌增殖剂的应用，其应用在于增加植物乳杆菌活菌的数量，植物乳杆菌活菌达到1.0×109cfu/g。本申请技术方案提出的植物乳杆菌增殖剂具有以下优点：(1)该增殖剂属于天然可食用混合物，对人体不会产生副作用；(2)该增殖剂在使用中缩短了发酵时间，从而避免了有害杂菌的污染；(3)利用该增殖剂实现植物乳杆菌增殖时的活菌数能达到1.0×109cfu/g，活菌数大大高于其他增殖剂所产生的活菌数；(4)该增殖剂的使用成本低，降低了植物乳杆菌产品的生产成本。具体实施方式为更清楚说明本专利技术技术方案，下面具体进行介绍。植物乳杆菌增殖剂采用蛋白酶降解植物蛋白反应后生成的酶解混合物；植物蛋白可以选择大豆蛋白或绿豆蛋白、鹰嘴豆蛋白、豌豆蛋白、蚕豆蛋白、扁豆蛋白、小麦蛋白或上述蛋白的混合物。上述植物蛋白酶通常选择水果蛋白酶、蔬菜蛋白酶、药用植物蛋白酶(如罗汉果蛋白酶、山药蛋白酶)或其混合物。含有这些植物蛋白酶的物质是水果、蔬菜或药用植物。若选择动物蛋白酶，则具体可以是胰蛋白酶、胃蛋白酶、胰凝乳蛋白酶。若选择微生物蛋白酶，则可以具体为地衣芽孢杆菌蛋白酶、黑曲霉蛋白酶、解淀粉芽孢杆菌蛋白酶、枯草芽孢杆菌蛋白酶、米黑根毛霉蛋白酶、米曲霉蛋白酶、乳克鲁维酵母蛋白酶、微小毛霉蛋白酶、蜂蜜曲霉蛋白酶、寄生内座壳(栗疫菌)蛋白酶中的一种或其混合物。上述植物乳杆菌增殖剂的制作方法是将植物蛋白和植物蛋白酶在水溶液中在25℃-80℃下酶解反应0.5～8h。实施例1：为确定该增殖剂的作用，将上述制备的植物乳杆菌增殖剂0.5-10％添加至牛奶中，在95℃下灭菌10min，接种得到了终浓度为1.0×105-1.0×108cfu/g植物乳杆菌ST-III，经发酵至凝乳(不超过12h)，通过LB平板计数好氧菌落总数检测污染情况、并通过MRS平板计数植物乳杆菌活菌数。方法制得的凝乳测试结果如表1：表1.植物乳杆菌纯发酵乳实验结果表1的实验结果证明，该增殖剂:能促进植物乳杆菌ST-Ⅲ在牛奶中快速生长凝乳，30天保质期内活菌数变化不大，无杂菌污染；且植物乳杆菌活菌计数较高。实施例2：采用大豆蛋白和无花果蛋白酶进行酶解反应生成增殖剂，用该增殖 剂和生牛乳混合、接种、发酵，观察凝乳情况，样品梯度稀释计数，上述样品冷藏30天后再计数；为比较增殖剂的效果用本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种植物乳杆菌增殖剂，其特征在于，该植物乳杆菌增殖剂是通过蛋白酶或含有蛋白酶的物质降解植物蛋白反应后的酶解混合物。

【技术特征摘要】
1.一种植物乳杆菌增殖剂，其特征在于，该植物乳杆菌增殖剂是通过蛋白酶或含有蛋白酶的物质降解植物蛋白反应后的酶解混合物。2.根据权利要求1所述的植物乳杆菌增殖剂，其特征在于，蛋白酶是植物蛋白酶、动物蛋白酶或者微生物蛋白酶中一种或其混合物。3.根据权利要求1所述的植物乳杆菌增殖剂，其特征在于，含有蛋白酶的物质是含有植物蛋白酶的物质、动物蛋白酶的物质或者微生物蛋白酶的物质中一种或其混合物。4.根据权利要求1所述的植物乳杆菌增殖剂，其特征在于，用于降解的植物蛋白是大豆蛋白、绿豆蛋白、鹰嘴豆蛋白、蚕豆蛋白、豌豆蛋白、扁豆蛋白、小麦蛋白中的一种或其混合蛋白。5.根据权利要求1所述的植物乳杆菌增殖剂，其特征在于，蛋白酶或含有蛋白酶的物质降解植物蛋白反应按照质量比1:1-50混合。6.根据权利要求2所述的植物乳杆菌增殖剂，其特征在于，植物蛋...

【专利技术属性】
技术研发人员：张红发，刘振民，游春苹，
申请(专利权)人：光明乳业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31