一种对称单羰基姜黄素类似物6b及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及含烯丙基取代的以1,4‑二烯‑3‑酮为母核的小分子化合物及制备方法和应用。本发明专利技术对称单羰基姜黄素类似物6b，具有很好的稳定性，化合物6b在细胞层面具有较好的抗肿瘤活性，尤其对人胆管癌，是一个很有开发前景的临床抗癌小分子先导化合物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及属于化合物药物领域，具体涉及具有抗肿瘤作用的含烯丙基取代的以1,4-二烯-3-酮结构为母核的化合物及制备方法和这种化合物的抗肿瘤用途。
技术介绍
肿瘤，分为良性肿瘤和恶性肿瘤。在我国，根据调查显示，平均每天就有8550人死于癌症。目前的癌症治疗方式主要通过化疗、放疗、手术、靶向药物治疗及现在热门的免疫治疗方法。传统的治疗方式如化疗、放疗对癌症患者来说伤害太大，容易引起免疫力低下，脱发等症状。对于靶向药物，虽然目前应用的较多，但是对于一些特定的癌症类型，如肺癌、乳腺癌、胰腺癌等并不能达到根治的效果，甚至一些靶向药物用药久后患者体内会出现耐药的现象。因此开发新型抗癌药物仍然是目前面临的一项重要的任务。姜黄素，是中药姜黄、郁金和莪术中的主要活性成分。近年来，药理学研究发现姜黄素具有抗肿瘤、抗炎、抗菌等多种药理作用，姜黄素在美国已经进入了多项II期临床实验阶段。但是，姜黄素本身的β-二酮结构母核非常不稳定，导致其在人体内被很快的降解掉。研究发现，将β-二酮结构母核改成1,4-二烯-3-酮母核后化合物的稳定性得到很大的提升。在一些传统的天然植物中，我们发现有些含有烯丙基结构的天然植物分子如和厚朴酚等具有较好的抗肿瘤活性。因此，在提升化合物稳定性的基础上，引入烯丙基作为取代基，发现了化合物6b。化合物6b在细胞层面具有较好的抗肿瘤活性，尤其对人胆管癌，是一个很有开发前景的临床抗癌小分子先导化合物。
技术实现思路
针对上述存在的问题，本专利技术的目的之一在于提供一种含烯丙基取代的以1,4-二烯-3-酮为母核的小分子化合物。本专利技术的目的之二在于提供一种含烯丙基取代的以1,4-二烯-3-酮为母核的小分子化合物的制备方法。本专利技术的目的之三在于提供一种含烯丙基取代的以1,4-二烯-3-酮为母核的小分子化合物抗肿瘤的用途。为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案为：一种对称单羰基姜黄素类似物6b,具有下述结构式(1)，化合物6b为：(3E,5E)-3,5-双(3-烯丙基-4-羟基苯亚甲基)二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮(3E,5E)-3,5-Bis(3-allyl-4-hydroxybenzylidene)dihydro-2H-pyran-4(3H)-one。一种对称单羰基姜黄素类似物6b的制备方法，按如下步骤制得：一种对称单羰基姜黄素类似物6b在制备抗肿瘤药物中的应用。利用稳定性测定方法评价了化合物6b与姜黄素在磷酸盐缓冲液(简称PBS,PH＝7.4)中的稳定性情况，发现化合物6b具有比姜黄素更好的化学稳定性(详情见实施例2)。细胞层面上实验评价了化合物6b对人胆管癌细胞RBE细胞存活率的影响及IC50值的测定，发现化合物6b在对人胆管癌细胞RBE细胞具有比姜黄素更好的杀伤效果，其对RBE细胞的IC50值大约15μM左右。有益效果：本专利技术对称单羰基姜黄素类似物6b，具有很好的稳定性，化合物6b在细胞层面具有具有较好的抗肿瘤活性，尤其对人胆管癌，是一个很有开发前景的临床抗癌小分子先导化合物。附图说明图1为姜黄素的稳定性曲线图；图2为本专利技术化合物6b的稳定性曲线图；图3为化合物6b对人胆管癌细胞RBE细胞的存活率柱状图；图4为化合物6b对人胆管癌细胞RBE细胞的IC50值柱状图。具体实施方式实施例化合物b6的制备：中间体2的制备：称取10g对羟基苯甲醛(1)于反应瓶中，加入适量丙酮溶解原料，再称取10g碳酸钾，油浴条件下慢慢加入14ml烯丙基溴，最后缓慢加入10g碳酸钾固体，65℃搅拌回流18小时，TLC监测反应。反应结束后旋干丙酮，用水/乙酸乙酯萃取产物，除去碳酸钾，旋干乙酸乙酯层，湿法装柱，石油醚：乙酸乙酯＝10:1过柱，得无色透明重排原料中间体2(4-烯丙氧基苯甲醛)。中间体3的制备：称取3g重排原料，加入5ml N,N-二乙基苯胺，气球通N2，反应装置真空抽滤5分钟，除掉反应液中的溶解氧，沙浴条件下(200℃)搅拌回流5小时，TLC监测反应。反应结束后反应体系冷却到室温，直接湿法装柱，硅胶柱层析法纯化得绿色重排产物即中间体3-烯丙基-4-羟基苯甲醛(3)。化合物6b的制备：按2:1的比例分别称取150mg中间体3和60.5mg四氢吡喃酮，分别装于反应瓶和大型EP管中，加入适量冰醋酸，分别通5分钟氯化氢气体，观察到重排产物溶液变红。将四氢吡喃酮溶液缓慢滴加到重排产物溶液中，室温搅拌反应48小时，保持反应瓶密封性要好，TLC监测反应。反应结束后，用饱和NaHCO3调节溶液PH至7-8，用水/乙酸乙酯萃取，收集乙酸乙酯层，旋干乙酸乙酯，干法上柱，硅胶柱层析法纯化得黄色终产物6b(总产率35％左右)。化合物6b的基本信息及核磁共振图谱数据如下：(3E,5E)-3,5-Bis(3-allyl-4-hydroxybenzylidene)dihydro-2H-pyran-4(3H)-one(6b)(3E,5E)-3,5-双(3-烯丙基-4-羟基苯亚甲基)二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮Yellow power.Yield:40％.m.p:162.3-165.0℃.1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm):10.07(2H,s,Ar-OH),7.55(2H,s,H-β,H-β'),7.15(2H,d,J＝8.4Hz,H-6,H-6'),7.13(2H,s,H-2,H-2'),6.90(2H,d,J＝8.4Hz,H-5,H-5'),6.01-5.94(2H,m,A,B-ArCH2CH＝CH2),5.08-5.03(4H,m,A,B-ArCH2CH＝CH2),4.85(4H,s,CH2-O-CH2),3.31(4H,d,J＝6.6Hz,A,B-ArCH2CH＝CH2).13C NMR(150MHz,DMSO-d6)δ(ppm):184.3,156.7×2,136.6×2,135.0×2,132.8×2,130.5×2,130.5×2,126.6×2,125.4×2,115.7×2,115.3×2,67.7×2,33.5×2.ESI-MS,m/z:387.1[M-H]-.calcd for C25H24O4:388.16化合物6b与姜黄素的稳定性测定化合物溶解于DMSO中，配制成1mM浓度的DMSO溶液。取20μl化合物的DMSO溶液，加入980μl的PBS溶液，得到稀释50倍后的溶液，取适量的溶液，用酶标仪测定化合物在0min、5min、10min、15min、20min、25min不同时间点的吸光度大小(设置波长范围250nm-600nm，间隔5nm)。将得到的数据在Excel表格中，可以得到化合物6b和姜黄素的稳定性曲线图(见图1、图2)。细胞水平上化合物6b的抗肿瘤活性验证细胞培养和给药在含5％CO2的37℃环境下，细胞培养于含10％胎牛血清的RPMI 1640培养基中。化合物6b溶解于DMSO中，配制成50μg/ml的储备液并存储于-20℃冰箱中。剂量控制在0,5,7.5,10μM 4个浓度。每一个工作液浓度都用基础培养基配制出DMSO浓度小于0.1％的终溶液。不加化合物的细胞组别作为阴性对照组，给予20μM姜黄素的组别作为阳性对照组。化合物6b抗人胆管癌细胞增殖测定RBE细胞培养于包含1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种对称单羰基姜黄素类似物6b,具有下述结构式(1)，

【技术特征摘要】
1.一种对称单羰基姜黄素类似物6b,具有下述结构式(1)，2.根据权利要求1所述对称单羰基姜黄素类似物6b的制...

【专利技术属性】
技术研发人员：邱晨宇，李珊珊，马玥，杨柯，周俐娜，吴轲，赵惠妍，王楠，刘菁，刘志国，梁广，
申请(专利权)人：温州医科大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33