一种取胚缓冲液及其应用制造技术

本发明专利技术属于生物化学领域，涉及一种取胚缓冲液及其应用，步骤如下：将取胚缓冲液水浴备用，向培养皿中加入PBS缓冲液；取出冷藏的子宫组织移至恒温台；在恒温台上，放置另一培养皿和子宫组织，剪掉子宫的肠系膜，在远端输卵管处剪开子宫角，捏紧远端子宫角，剪开近端子宫角，将子宫分成两个部分，在剪开的子宫角近端处，注入取胚缓冲液，冲刷子宫角，从子宫角远端开始，向子宫角近端挤压包含取胚缓冲液在内的子宫角内容物到培养皿内；将培养皿移至体视镜下寻找胚胎，并逐个分离胚胎至加有PBS缓冲液的培养皿中漂洗并编号记录。本发明专利技术可高效地收获胚胎，且能保证所收获胚胎的活力，收获到的胚胎可用于细胞培养及发育学和繁殖学研究。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物化学领域，涉及一种取胚缓冲液及其应用。
技术介绍
从两性胚子结合开始，经过细胞分裂、细胞分化、胚层形成和组织发生、特定基因表达等的复杂过程，形成了器官系统，组成了一个完整的生命个体。经过多年的发展，人们虽然对生命的系统发生过程有了很多了解，但其中的许多奥秘，至今尚未被揭露。其中，猪的基因组序列和生理代谢状况与人高度相似，因此，猪被认为是研究人类复杂疾病的良好模型。在猪胚快速发育的神经胚时期，此时仔猪的神经系统发育快速，心脏、肾脏、肠道及耳朵等原基也开始形成，因此，是研究这些组织器官的发育过程及其相关疾病的良好模型。我国是世界生猪生产的第一大国，猪肉是我国居民的主要肉食来源，在肉类的消费比重中占到了65%左右，但我国生猪产业的生产水平却不高。其中，产仔数不高是影响生猪产业发展的一个重要因素，而妊娠最初35天内的损失占整个妊娠期的70%左右，提高受精卵的着床率可以显著提高母猪的产仔数。猪神经胚时期前后，呈半管状，胚长3mm左右，并开始着床于子宫角的内膜上，因此，此时的猪胚不能通过常规的冲胚手段获得。而目前没有高效收获神经胚时期猪胚的方法。专利技术内容本专利技术的目的在本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种取胚缓冲液，其特征在于：主要是由磷酸二氢钾溶液、磷酸氢二钠溶液、BSA干粉和蒸馏水组成，所述取胚缓冲液的配制方法为：取磷酸二氢钾溶液和磷酸氢二钠溶液按体积比3:7混匀，调pH至7.2，制得的1×PBS缓冲液，然后加入1×PBS缓冲液质量的0.1%的BSA干粉，完成取胚缓冲液的配制。

【技术特征摘要】
1.一种取胚缓冲液，其特征在于：主要是由磷酸二氢钾溶液、磷酸氢二钠溶液、BSA干粉和蒸馏水组成，所述取胚缓冲液的配制方法为：取磷酸二氢钾溶液和磷酸氢二钠溶液按体积比3:7混匀，调pH至7.2，制得的1×PBS缓冲液，然后加入1×PBS缓冲液质量的0.1%的BSA干粉，完成取胚缓冲液的配制。2.如权利要求1所述的取胚缓冲液，其特征在于：所述磷酸二氢钾溶液和磷酸氢二钠溶液的浓度都为0.1mol/L。3.如权利要求1所述的取胚缓冲液的应用，其特征在于：步骤如下：（1）将取胚缓冲液置于37℃恒温水浴备用，向培养皿中加入1×PBS缓冲液，冰浴备用，取出冷藏的子宫组织，将子宫组织移至37℃恒温台；（2）在37℃恒...

【专利技术属性】
技术研发人员：乔瑞敏，李景，徐盼，吕刚，李改英，韩雪蕾，李新建，任广志，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：河南;41