一种经DAB染色的植物叶片的脱色方法技术

本发明专利技术涉及一种经DAB染色的植物叶片的脱色方法，包括以下步骤：首先在每50ml Na(ClO)2中加入2g CaCl2和1g Ca(OH)2，充分溶解，配制强效脱色液；其次按照体积比为1:1:2:6的比例，取冰醋酸、甘油、强效脱色液和无水乙醇，混合均匀后，配制得到样品脱色液；最后取样品脱色液置于玻璃器皿中，将待脱色的经DAB染色液染色的植物叶片完全浸入样品脱色液中；将玻璃器皿置于沸水浴中加热，至叶片的绿色完全脱去。采用此脱色方法，脱色效果明显，能将叶片上的杂色脱尽，更为直观、准确地反映由胁迫导致的H2O2累积情况。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种经DAB染色的植物叶片的脱色方法。
技术介绍
过氧化氢（H2O2）是重要的活性氧之一，激素等发育信号和胁迫刺激可以诱导细胞内H2O2的产生和积累，继而调控植物的气孔运动、生长发育、衰老和逆境应答等诸多生理过程。因此，对H2O2的测定，是植物生理学最常用的测定指标。DAB，即3,3-二氨基联苯胺，DAB染色方法是目前比较常见的H2O2测定方法，其测定原理：H2O2在过氧化酶的催化下可与DAB迅速反应生成棕色化合物，从而定位组织中的H2O2。该技术是对H2O2进行原位定位染色的方法，通过观察产生的斑点便可检测H2O2的聚集情况。该方法操作简单，成本较低，H2O2的产生具有专一性，同时能够肉眼直观地看到由于H2O2的积累产生的斑点大小与深度，常被用来检测植物受到环境胁迫时H2O2的累积情况。在DAB染色结束后，需要通过脱去叶片叶绿素和非DAB染色，从而计算DAB染色后的面积以及颜色深度。因此，DAB染色后的脱色步骤，是DAB对H2O2染色指示准确度的考验。但是，目前DAB染色后脱色的方法，分辨率不高，脱色效果不甚显著，常常无法将杂色脱尽，从而不能准确地反映由胁迫导致的H本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种经DAB染色的植物叶片的脱色方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、配制强效脱色液：每50ml Na(ClO)2中加入2g CaCl2和1g Ca(OH)2，充分溶解，配制强效脱色液；步骤二、配制样品脱色液：按照体积比为1:1:2:6的比例，取冰醋酸、甘油、强效脱色液和无水乙醇，混合均匀后，得到样品脱色液；步骤三、取样品脱色液置于玻璃器皿中，将待脱色的经DAB染色液染色的植物叶片完全浸入样品脱色液中；将玻璃器皿置于沸水浴中加热，至叶片的绿色完全脱去。

【技术特征摘要】
1.一种经DAB染色的植物叶片的脱色方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、配制强效脱色液：每50ml Na(ClO)2中加入2g CaCl2和1g Ca(OH)2，充分溶解，配制强效脱色液；步骤二、配制样品脱色液：按照体积比为1:1:2:6的比例，取冰醋酸、甘油、强效脱色液和无水乙醇，混合均匀后，得到样品脱色液；步骤三、取样品脱色液置于玻璃器皿中，将待脱色的经DAB染色液染色的植物叶片完全浸入...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑轶琦，赵燕，刘晶，许晓利，臧国长，
申请(专利权)人：河南科技大学，
类型：发明
国别省市：河南;41