本发明专利技术涉及一种雪峰虫草菌株(Ophiocordyceps xuefengensis)ZJ3和雪峰虫草子实体及其人工栽培方法和应用，所述雪峰虫草菌株(Ophiocordyceps xuefengensis)ZJ3，保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏日期为2015年12月24日，保藏编号为CCTCC M 2015777。通过对所述雪峰虫草菌株进行活化培养、扩大培养、固体培养基培养以及暗培养和光照培养，获得了雪峰虫草子实体，得到的该人工培养的雪峰虫草子实体粗壮、组织紧密，子座为棒状，单生或分枝，锈色，长约1‑13cm，直径为1‑6mm，雪峰虫草子实体生物转化率可达10％‑20％，可将其广泛用于食品或保健品领域。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药物栽培
，尤其涉及一种人工培养雪峰虫草子实体的方法。
技术介绍
雪峰虫草(Ophiocordyceps xuefengensis)在分类上隶属于子囊菌门(Ascomycota)、粪壳菌纲(Sordariomycetes)、肉座菌目(Hypocreales)、虫草菌科(Cordycipitaceae)、线虫草属(Ophiocordyceps)，是寄生于疖蝙蛾昆虫幼虫上的一类重要的虫生真菌，而疖蝙蛾幼虫寄生于马鞭草科植物大青(Clerodendrum cyrtophyllum Turca.)的近地面根髓或茎髓中。雪峰虫草于2012年首次在湖南洞口县雪峰山区被发现并命名，是与冬虫夏草(Ophiocordyceps sinensis)亲缘关系很近的同属于线虫草属(Ophiocordyceps sp.)的一个新种。雪峰虫草是一种低海拔虫草，是已知的最大的虫草，目前仅在湖南省雪峰山区有发现。现代科学研究表明，虫草中的许多种类都含有对人体有益的营养成分及其虫草素、虫草酸、腺苷和虫草多糖等有效成份，具有抗病毒、抗肿瘤、抗氧化和增强免疫力等功效。目前野生虫草资源资稀少，由于连年过度采挖，其生态环境破坏严重，野生虫草资源日趋枯竭。目前，国内外还没有有关雪峰虫草子实体培养方面的报道，雪峰虫草可能作为一种潜在的药食两用真菌进行开发，加之野生雪峰虫草资源较少，采挖对植被大青破坏严重，所以人工培养其子实体是解决开发利用该资源的有效途径之一，也为虫草药用价值的开发利用提供宝贵的资源。
技术实现思路
鉴于现有技术中存在的问题，本专利技术的目的在于提供一种雪峰虫草菌株(Ophiocordyceps xuefengensis)ZJ3和雪峰虫草子实体及其人工栽培方法和应用。为达此目的，本专利技术采用以下技术方案：第一方面，本专利技术提供了一种雪峰虫草菌株(Ophiocordyceps xuefengensis)ZJ3，保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏日期为2015年12月24日，保藏编号为CCTCC M 2015777，保藏地址：湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学保藏中心。雪峰虫草菌株(Ophiocordyceps xuefengensis)ZJ3在马铃薯葡萄糖平板培养基上生长较慢，通过点种法接种后，22℃培养45天，菌落直径在75mm的培养皿上可达50mm。菌落圆形，与培养基接触紧密，并形成褶皱，不易挑起，气生菌丝呈无色，粉末状，后期菌丝颜色逐渐变锈色，培养皿背面呈锈色；菌丝呈无色，有隔膜，有分支，直径为4-6μm；分生孢子锈色，单胞，椭圆形，顶端稍尖，基部稍尖，大小8-12μm×5-7μm；分生孢子梗短小，直径为1-5μm，长31-78μm，基部淡锈色，无分枝，分生孢子梗无隔膜或有一个隔膜。本专利技术所提供的雪峰虫草(Ophiocordyceps xuefengensis)ZJ3菌种的获得是通过野外采集的雪峰虫草拟菌核、子座柄或可孕部分经过表面消毒后采用组织分离的方法分离纯化获得原始菌株，原始菌株再经过培育得到本专利技术所使用的菌株。包含所述雪峰虫草菌株和/或其代谢产物，并以其为活性成分的微生物制剂也属于本专利技术的保护范围。第二方面，本专利技术还提供了一种雪峰虫草子实体，其由如第一方面所述雪峰虫草菌株ZJ3经人工培养获得。本专利技术所述雪峰虫草子实体生长初期以及生长顶端为白色，后期子实体从根部往顶端逐渐变成锈色，粗壮、组织紧密，子座为棒状，单生或分枝，锈色，长约1-13cm，直径为1-6mm。第三方面，本专利技术还提供了一种雪峰虫草子实体的人工培养方法，其包括以下步骤：(1)将雪峰虫草菌株进行活化培养；(2)将活化培养后的菌种进行扩大培养，得到种子液，将其接种到固体培养基上进行培养；(3)将步骤(2)得到的菌株先进行暗培养，再进行光照培养，即得到所述的雪峰虫草子实体；任选地，(4)将步骤(3)得到的雪峰虫草子实体进行组织分离，利用其进行所述步骤(1)-(3)的培养，得到雪峰虫草子实体。本专利技术的步骤(2)中是采用将种子液直接接种于固体培养基上进行培养，而不采用将种子液先扩大培养成发酵液后再接种于固体培养基上；与现有的先扩大培养种子液的方式相比，将种子液直接接种于固体培养基上，有利于提高子实体的基原形成数量和形成粗壮子实体，从而大大提高子实体的生物转化率。本专利技术的步骤(3)采用先暗培养再光照培养的方式，有利于形成粗壮的子实体，并大大提高子实体的生物转化率。本专利技术中，在进行步骤(3)之后，利用其得到的部分雪峰虫草子实体作为原料，对其进行组织分离，利用其进行所述步骤(1)-(3)的培养，同样能够得到生产上所需规模的、高生物转化率的雪峰虫草子实体，其中提及的组织分离是采用本领域公知的分离技术进行。通过上述方法获得的雪峰虫草子实体，其子实体粗壮、组织紧密，子座为棒状，单生或分枝，锈色，长约1-13cm，直径为1-6mm，雪峰虫草子实体生物转化率可达10％-20％，可将其广泛用于食品或保健品领域。本专利技术中，步骤(1)可以采用野生雪峰虫草或者是本专利技术第一方面所述的雪峰虫草菌株(Ophiocordyceps xuefengensis)ZJ3，在此不做特殊限定，然而优选采用本专利技术第一方面所述的雪峰虫草菌株(Ophiocordyceps xuefengensis)ZJ3进行雪峰虫草子实体的人工培养，利用该菌株可以使雪峰虫草子实体生物转化率可达15％以上，大大提高其利用价值。根据本专利技术，步骤(1)所述活化培养的温度为18-22℃，例如18℃、18.2℃、18.3℃、18.5℃、18.8℃、19℃、19.5℃、20℃或22℃，活化培养的时间为10-15天，例如10天、10.5天、11天、12天、13天、14天或15天。根据本专利技术，步骤(1)所述活化培养是在斜面培养基上进行的，优选在斜面试管培养基上进行，其中，斜面培养基的组成典型但非限制性的实例为：马铃薯100-200g、葡萄糖10-20g、琼脂10-15g，加水至1000mL，pH值为5-6.5，具体可以是：马铃薯100g、葡萄糖10g、琼脂10g，加水至1000mL，pH值为5；或者，马铃薯120g、葡萄糖11g、琼脂12g，加水至1000mL，pH值为5.5；或者，马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂15g，加水至1000mL，pH值为6.5等，优选斜面培养基的组成为马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂15g，加水至1000mL，pH值为6.5。本专利技术中，步骤(2)所述扩大培养是在温度为20-22℃、转速为150-180r/min、黑暗条件下恒温振荡培养7-10天；其中温度例如可以是20℃、20.5℃、21℃、21.5℃或22℃；转速例如可以是150r/min、155r/min、160r/min、165r/min、170r/min、175r/min或180r/min；培养例如7天、7.5天、8天、8.5天、9天或10天。本专利技术中，步骤(2)所述扩大培养采用液体种子培养基进行的，对于液体种子培养基的组成，其典型但非限制性的实例为：蔗糖10-15g、蛋白胨5-10g、磷酸氢二钠1-1.18g、磷酸二氢钾1-1.13g、硫酸镁1-3g、硝酸钾1-3g，加水至1000mL，pH值为本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种雪峰虫草菌株(Ophiocordyceps xuefengensis)ZJ3，保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏日期为2015年12月24日，保藏编号为CCTCC M 2015777。
【技术特征摘要】
1.一种雪峰虫草菌株(Ophiocordyceps xuefengensis)ZJ3，保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏日期为2015年12月24日，保藏编号为CCTCC M 2015777。2.一种雪峰虫草子实体，其特征在于，其由如权利要求1所述的雪峰虫草菌株ZJ3经人工培养获得。3.如权利要求2所述的雪峰虫草子实体，其特征在于，所述子实体的子座为棒状，单生或分枝，锈色，长度在1-13cm，直径为1-6mm。4.一种雪峰虫草子实体的人工培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将雪峰虫草菌株进行活化培养；(2)将活化培养后的菌种进行扩大培养，得到种子液，将其接种到固体培养基上进行培养；(3)将步骤(2)得到的菌株先进行暗培养，再进行光照培养，即得到所述的雪峰虫草子实体；任选地，(4)将步骤(3)得到的雪峰虫草子实体进行组织分离，利用其进行所述步骤(1)-(3)的培养，得到雪峰虫草子实体。5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述活化培养的温度为18-22℃，活化培养的时间为10-15天；优选地，所述活化培养是在斜面培养基上进行；优选地，所述斜面培养基的组成为：马铃薯100-200g、葡萄糖10-20g、琼脂10-15g，加水至1000mL，pH值为5-6.5。6.如权利要求4或5所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述扩大培养是在温度为20-22℃、转速为150-180r/min、黑暗条件下恒温振荡培养7-10天；优选地，所述扩大培养采用液体种子培养基进行；优选地，所述液体种子培养基的组成为：蔗糖10-15g、蛋白胨5-10g、磷酸氢二钠1-1.18g、磷酸二氢钾1-1.13g、硫酸镁1-3g、硝酸钾1-3g，加水至1000mL，pH值为5-6.5；优选地，步骤(2)所述固体培养基的配制方法为：先将大米5-10g、燕麦1-5g、小米1-5g和玉米1-5g进行混合，再按料液比为(1-2):1将该混合物加入子实体栽培营养液中，得到固体培养基；优选地，所述子实体栽培营养液的组成为：马铃薯150-200g、蚕蛹粉5-10g、蔗糖10-15...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈作红，邹娟，张平，
申请(专利权)人：湖南师范大学，怀化学院，
类型：发明
国别省市：湖南;43
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