用于治疗和预防癌症的药物组合物制造技术

本发明专利技术涉及治疗和/或预防癌症的药物组合物，其包含作为活性成分的抗体或其片段，具有与CAPRIN‑1蛋白或包含7个或更多个连续氨基酸的所述蛋白片段的免疫学反应性。

【技术实现步骤摘要】
本申请是中国专利申请200980138959.9的分案申请，原申请的申请日是2009年8月5日，专利技术名称是“用于治疗和预防癌症的药物组合物”。专利
本专利技术涉及抗CAPRIN-1抗体或其片段的新药物用途，例如，用于癌症的治疗剂和/或预防剂。
技术介绍
癌症是导致死亡的主要原因。目前，对癌症进行的治疗主要是外科手术治疗，其可与放射治疗和化疗法联合。尽管近年来开发了新的手术方法和发现了新的抗癌剂，但是除了一些癌症之外，癌症治疗的结果仍未得到大的改善。随着近年来分子生物学和癌症免疫学的发展，已经鉴定了与癌症特异性反应的抗体、细胞毒T细胞所识别的癌抗原、以及编码癌抗原的基因，并且对靶向抗原的特异性免疫疗法的期望已经上升(Tsuyoshi AKIYOSHI,“Gan to Kagaku Ryouhou(癌症和化疗法)”,1997,第24卷,第551-519页(日本),(Cancer and Chemotherapy Publishers Inc.,日本))。为减轻副作用，在癌症治疗方法中需要被识别为靶抗原的肽、多肽或蛋白质不存在于几乎所有的正常细胞中，但特异性地存在于癌细胞中。在1991年，比利时路德维希研究所Boon等人通过cDNA表达克隆法，使用自身癌细胞系和癌症反应性T细胞，分离了CD8阳性T细胞识别的人黑素瘤抗原MAGE1(Bruggen P.等人,Science,254:1643-1647,1991)。此后，报道了SEREX(通过重组表达克隆法对抗原的血清学鉴定)方法，其中可应用基因表达克隆技术鉴定肿瘤抗原，其中所述的肿瘤抗原可被通过应答于癌症患者身体中的自身癌症而产生的抗体所识别(Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.,92:11810-11813,1995；和美国专利号5,698,396)。通过SEREX方法，分离了一些基本上不在正常细胞中表达但在癌细胞中特异性表达的癌抗原(Int.J.Cancer,72:965-971(1997)；Cancer Res.,58:1034-1041(1998)；Int.J.Cancer,29:652-658(1998)；Int.J.Oncol.,14:703-708(1999)；Cancer Res.,56:4766-4772(1996)；和Hum.Mol.Genet 6:33-39,1997)。此外，已经进行了一些应用与癌抗原(其为一些分离的癌抗原)特异性反应的免疫细胞、以及使用了包含癌抗原的疫苗等的癌特异性免疫疗法的临床试验。同时，近年来，已开始存在靶向癌细胞上抗原蛋白质的用于癌症治疗的各种抗体药物。此类用作癌特异性治疗剂的药物展示出某些程度的药效，并且因此它们已得到了关注。然而，多数靶抗原蛋白也表达于正常细胞中。施与抗体后，不仅会损伤癌细胞，而且还会损伤已表达了靶抗原的正常细胞，由此会引起副作用(或反作用)，这成为了一个问题。因此，人们预期，如果能够鉴定在癌细胞表面特异性表达的癌抗原，并且将靶向此类抗原的抗体用作药物，则利用更少副作用的抗体药物的治疗将能实现。胞质和增殖相关蛋白1(CAPRIN-1)是当静止期的正常细胞被活化或发生细胞分裂时表达的胞内蛋白。CAPRIN-1还是已知与细胞中的RNA形成胞内应激颗粒并与调节mRNA运输和翻译有关的胞内蛋白。CAPRIN-1具有不同的名称，诸如GPI锚定的膜蛋白1和膜组分表面标记1蛋白(M11S1)，似乎这一蛋白被认为是膜蛋白。这些不同的名称源自这样的报告：CAPRIN-1基因序列最初具有GPI结合区并且CAPRIN-1是在大肠癌细胞中表达的膜蛋白(J.Biol.Chem.,270:20717-20723,1995)。后来报导了该报告中描述的CAPRIN-1基因序列是不正确的，即，单个核苷酸从GenBank等中目前登记的CAPRIN-1基因序列中的缺失造成移码，因而导致80个氨基酸从羧基末端缺失，并且因而所得的人为产物(74个氨基酸)是前述报告中所提及的GPI结合区；并且在该序列的的5’侧也存在错误，由此导致53个氨基酸从氨基端缺失(J.Immunol.,172:2389-2400,2004)。此外，已经报道了由GenBank等中目前所登记CAPRIN-1基因序列编码的蛋白质不是细胞膜蛋白(J.Immunol.,172:2389-2400,2004)。此外，基于J.Biol.Chem.,270:20717-20723,1995对CAPRIN-1是细胞膜蛋白的报告，US 2008/0075722和WO 2005/100998公开了名为M11S1的CAPRIN-1作为癌症治疗抗体药物的靶可用于癌症治疗，并且将其作为一个细胞膜蛋白；然而，实施例中没有包含应用抗该蛋白的抗体治疗癌症的描述。然而，如J.Immunol.,172:2389-2400,2004中所报道的那样，从US 2008/0075722申请以来直到现在，一般认为CAPRIN-1不表达在细胞表面，并且因此，显然仅基于不正确信息即CAPRIN-1是细胞膜蛋白的US 2008/0075722和WO 2005/100998的公开内容不应当理解为本领域技术人员的技术常识。专利技术概述专利技术所要解决的问题本专利技术的一个目标是鉴定在癌细胞表面特异性表达的癌抗原蛋白，以及提供靶向此类蛋白的抗体作为癌治疗剂和/或预防剂的用途。解决问题的手段通过深入的研究，通过SEREX方法，应用衍生自睾丸组织的cDNA文库和来自患乳腺癌的狗的血清，本专利技术人已经获得了编码与存在于荷瘤生物血清中的抗体相结合的蛋白质的cDNA。利用获得的犬基因和与其同源的人、牛、马、小鼠和鸡的基因，现已制备了具有SEQ ID NO:2-30偶数编号(即，偶数编号的SEQ ID NO:2-30)所示氨基酸序列的CAPRIN-1蛋白，以及抗CAPRIN-1蛋白的抗体。此外，本专利技术人已发现CAPRIN-1在乳腺癌、脑肿瘤、白血病、淋巴癌、肺癌、食道癌、大肠癌、胃癌和肾癌细胞中特异性表达，并且CAPRIN-1蛋白的一部分在此类肿瘤细胞表面特异性表达。此外，本专利技术还发现抗表达于癌细胞表面的CAPRIN-1部分的抗体能够损伤(损害)表达CAPRIN-1的癌细胞。这些发现使得完成了本专利技术。因此，本专利技术具有以下描述的特征。本专利技术提供了治疗和/或预防癌症的药物组合物，其包含作为活性成分的具有与CAPRIN-1蛋白、或与包含7个或更多个连续氨基酸的CAPRIN-1蛋白片段的免疫学反应性的抗体或其片段，其中所述的CAPRIN-1蛋白具有偶数编号的SEQ ID NO:2-30任一项所示的氨基酸序列，或与偶数编号的SEQ ID NO:2-30任一项的氨基酸序列具有80％或更多、优选85％或更多、更优选90％或更多、以及更优选95％或更多序列同一性的氨基酸序列。在本专利技术的一个实施方案中，所述癌症是乳腺癌、脑肿瘤、白血病、淋巴癌、肺癌、食道癌、大肠癌、胃癌和肾癌。在本专利技术的另一实施方案中，所述抗体是单克隆抗体或多克隆抗体。在本专利技术的另一实施方案中，所述抗体是人抗体、人源化抗体、嵌合抗体、单链抗体或双特异性抗体。在本专利技术的另一实施方案中，所述抗体是具有与下述多肽、或与该多肽的片段的免疫学反应性的抗体，其中所述的多本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于治疗和/或预防癌症的药物组合物，其包含作为活性成分的具有与CAPRIN‑1蛋白、或与包含7个或更多个连续氨基酸的CAPRIN‑1蛋白片段的免疫学反应性的抗体或其片段，其中所述的CAPRIN‑1蛋白具有偶数编号的SEQ ID NO:2‑30任一项所示的氨基酸序列，或与所述氨基酸序列具有80％或更多序列同一性的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
2008.08.05 JP 2008-201928;2009.03.31 JP 2009-087281.用于治疗和/或预防癌症的药物组合物，其包含作为活性成分的具有与CAPRIN-1蛋白、或与包含7个或更多个连续氨基酸的CAPRIN-1蛋白片段的免疫学反应性的抗体或其片段，其中所述的CAPRIN-1蛋白具有偶数编号的SEQ ID NO:2-30任一项所示的氨基酸序列，或与所述氨基酸序列具有80％或更多序列同一性的氨基酸序列。2.根据权利要求1的药物组合物，其包含作为活性成分的具有与CAPRIN-1蛋白片段的免疫学反应性的抗体或其片段，其中所述的CAPRIN-1蛋白片段是由除了SEQ ID NO:6和18之外的偶数编号的SEQ ID NO:2-30任一项所示氨基酸序列中的氨基酸残基编号50-98或氨基酸残基编号233-305区域内的7个或更多个连续氨基酸组成的多肽，或包含所述多肽作为部分序列的多肽。3.根据权利要求1的药物组合物，其包含作为活性成分的具有与CAPRIN-1的部分多肽、或与包含7个或更多个连续氨基酸的所述部分多肽的片段的免疫学反应性的抗体或其片段，其中所述的CAPRIN-1部分多肽具有SEQ ID NO:37或SEQ ID NO:136所示的氨基酸序列，或与所述氨基酸序列具有80％或更多序列同一性的氨基酸序列。4.根据权利要求1-3任一项的药物组合物，其中所述癌症是乳腺癌、脑肿瘤、白血病、淋巴癌、肺癌、食道癌或大肠癌。5.根据权利要求1-4任一项的药物组合物，其中所述抗体是单克隆抗体或多克隆抗体。6.根据权利要求1-4任一项的药物组合物，其中所述抗体是人抗体、人源化抗体、嵌合抗体、单链抗体或双特异性抗体。7.具有与下述多肽的免疫学反应性的抗体，其中所述的多肽具有SEQ ID NO:37或SEQ ID NO:136所示的氨基酸序列、或与所述氨基酸序列具有80％或更多序列同一性的氨基酸序列。8.抗体，其包含有包含SEQ ID NO:40、41和42所示序列的重链可变区，以及包含SEQ ID NO:44、45和46所示序列的轻链可变区，并且具有与CAPRIN-1蛋白的免疫学反应性。9.抗体，其包含有包含SEQ ID NO:40、41和42所示序列的重链可变区，以及包含SEQ ID NO:50、51和52所示序列的轻链可变区，并且具有与CAPRIN-1蛋白的免疫学反应性。10.抗体，其包含有包含SEQ ID NO:40、41和42所示序列的重链可变区，以及包含SEQ ID NO:55、56和57所示序列的轻链...

【专利技术属性】
技术研发人员：冈野文义，井户隆喜，斋藤孝则，小林真一，
申请(专利权)人：东丽株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP