本发明专利技术公开了一种卵巢癌辅助诊断或者疗效预测用的生物标记物及其应用，主要是用于制备卵巢癌辅助诊断或者疗效预测的实时荧光定量检测试剂。通过研究证实LINC01420在卵巢癌组织中表达上调，高表达的LINC01420的卵巢癌患者比低表达LINC01420的卵巢癌患者预后差，因此，LINC01420的表达水平可以为卵巢癌患者的预后提供强有力的分子生物学依据，具有深远的临床意义和重要的推广应用前景。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于肿瘤分子生物学领域，具体涉及一种卵巢癌辅助诊断或者疗效预测用的生物标记物长链非编码RNA LINC01420，以及检测该RNA表达量的试剂用于制备卵巢癌辅助诊断或者疗效预测制剂的用途。
技术介绍
人类基因组计划及其后续的DNA元件百科全书计划(The Encyclopedia of DNA Elements Project,ENCODE)研究成果表明，蛋白编码基因序列仅占人类基因组序列的1-3％，而人基因组中绝大部分可转录的序列为长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)。LncRNA广泛地存在于各种生物中，且随着生物复杂程度的升高，基因组中lncRNA序列的比例也相应地增大，提示lncRNA在生物进化过程中有重要意义。随着lncRNA不断被发现，它们的功能逐渐被诠释，科学家们发现lncRNA广泛而活跃地参与到生命活动不同层面的功能调控中，作为一个崭新的领域，已经成为国际生命科学研究领域新的前沿与热点。LncRNA可作为功能蛋白质的信号(signal)、诱导(guide)、诱饵(decoy)或支架(scaffold)分子等多种方式，在染色质重构、基因转录、翻译及蛋白修饰等多重水平调控基因的表达，并在包括发育、免疫、生殖等基本生理过程中扮演了不可替代的角色，更重要的是，lncRNA的表达与功能失调已经与包括恶性肿瘤在内的人类多种疾病紧密联系在了一起。因此，深入研究lncRNA的功能，揭示由lncRNA介导的遗传信息传递方式和表达调控网络，不仅可以从蛋白编码基因以外的角度重新注释和阐明基因组的结构与功能，深入发现生命活动的本质和规律，还有望从一个新的视角认识包括肿瘤在内的多种人类常见疾病的发病机理，并为这些疾病的诊断与治疗提供新的分子标志物与治疗靶点。卵巢癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一，其死亡率居妇科肿瘤之首，对妇女生命造成严重威胁。由于卵巢的组织解剖结构及内分泌功能较复杂，卵巢癌早期症状不典型，术前鉴别卵巢肿瘤的组织类型及良恶性相当困难。肿瘤的发生发展是多基因参与、多步骤、多阶段的复杂过程，LncRNA在卵巢癌的发生发展过程中可能也起到了重要的作用。最近我们在卵巢癌中发现lncRNA LINC01420(NCBI accession number:NR_015367)在卵巢癌中表达显著上调，LINC01420表达高的患者更容易发生转移，其生存时间短于该lncRNA表达低的患者，因此针对该lncRNA的检测制剂可以用于卵巢癌的预后判断。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种卵巢癌辅助诊断或者疗效预测用的生物标记物长链非编码RNA LINC01420，以及检测卵巢癌组织中该RNA表达量的试剂用于制备卵巢癌辅助诊断或者疗效预测制剂的用途。一种卵巢癌辅助诊断或者疗效预测用的生物标记物为长链非编码RNA LINC01420，该长链非编码RNA LINC01420的序列如SEQ NO:1所示。检测卵巢癌组织中长链非编码RNA LINC01420表达量的试剂的应用，所述的试剂用于制备卵巢癌辅助诊断或者疗效预测制剂；该长链非编码RNA LINC01420的序列如SEQ NO:1所示。所述的卵巢癌辅助诊断或者疗效预测制剂为实时荧光定量检测试剂。所述的实时荧光定量检测试剂中包含用于实时荧光定量检测LINC01420表达的引物序列：正向引物：5'-CACTCTACCCTCCGCACC-3'，反向引物：5'-AGGAAGTGAAATCGTGCTGA-3'。所述的实时荧光定量检测试剂中包含内参基因GAPDH特异性PCR引物：正向引物5’-ACCACAGTCCATGCCATCAC-3’反向引物5’-TCCACCACCCTGTTGCTGTA-3’。本专利技术从卵巢癌和卵巢癌旁样本中抽提RNA后逆转录，实时荧光定量法检测了LINC01420的表达，结果显示LINC01420在卵巢癌组织中表达上调。提示LINC01420可作为卵巢癌预后预测的分子标志。本专利技术为卵巢癌的辅助诊断和预后预测提供了强有力的分子生物学工具，具有深远的临床意义和重要的推广应用前景。附图说明图1为卵巢癌中LINC01420的表达与卵巢癌患者预后的关系；实时荧光定量PCR技术检测lncRNA LINC01420在卵巢癌(28例)中的表达情况，卵巢癌中LINC01420的高表达与卵巢癌患者的不良预后相关，即LINC01420高表达的患者总的生存时间(Over-all survival)要明显低于LINC01420低表达或不表达的患者，LINC01420表达高的患者更容易由于肿瘤复发、转移而死亡。具体实施方式以下结合具体实施方式进一步说明本专利技术，而非限制本专利技术。实施例1，实时荧光定量PCR法检测证实LINC01420在卵巢癌中表达上调1.材料与方法：收集28例卵巢癌组织，抽提总RNA，1μg RNA经逆转录成cDNA后，进行实时荧光定量PCR。LINC01420正向引物5’-CACTCTACCCTCCGCACC-3’，如SEQ NO:2所示，和反向引物5’-AGGAAGTGAAATCGTGCTGA-3’。如SEQ NO:3所示。用于对照的GAPDH正向引物为5’-ACCACAGTCCATGCCATCAC-3’如SEQ NO:4所示，和反向引物5’-TCCACCACCCTGTTGCTGTA-3’，如SEQ NO:5所示。实时荧光定量PCR反应体系实时荧光定量PCR反应步骤反应结束后确认实时荧光定量PCR的扩增曲线和熔解曲线，各基因的表达强度根据CT值(threshold cycle values)、内参基因(GAPDH)标化后，采用group t-test检验计算P值。2.结果对28例卵巢癌患者进行了电话随访，详细询问了他们的首发时间、治疗情况、有无复发、有无再患其他疾病、复发及死亡时间等，并登记了生存时间和状态，并对卵巢癌组织中LINC01420的表达与病人的生存时间和状态进行的生存分析，发现LINC01420高表达患者(High,16例)平均生存时间明显短于LINC01420低表达或不表达的患者(Low，12例，图1)。说明LINC01420是一个与卵巢癌预后相关的分子标记，该lncRNA表达高，病人预后差。本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种卵巢癌辅助诊断或者疗效预测用的生物标记物为长链非编码RNA LINC01420，该长链非编码RNA LINC01420的序列如SEQ NO:1所示。
【技术特征摘要】
1.一种卵巢癌辅助诊断或者疗效预测用的生物标记物为长链非编码RNA LINC01420，该长链非编码RNA LINC01420的序列如SEQ NO:1所示。2.检测卵巢癌组织中长链非编码RNA LINC01420表达量的试剂的应用，其特征在于，所述的试剂用于制备卵巢癌辅助诊断或者疗效预测制剂；该长链非编码RNALINC01420的序列如SEQ NO:1所示。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的卵巢癌辅助诊断或者疗效预测制剂为实时荧光定量检测试剂。4.根据权利...
【专利技术属性】
技术研发人员：熊炜，曾朝阳，李桂源，李小玲，王裕民，唐艳艳，李夏雨，彭淑平，周艳宏，李征，龚朝建，张文玲，
申请(专利权)人：中南大学，
类型：发明
国别省市：湖南;43
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