黄瓜花叶病毒RT-LAMP检测试剂盒及检测方法技术

一种黄瓜花叶病毒RT‑LAMP检测试剂盒及检测方法，所述检测方法包括以下步骤：S1使用由10％的乙酸乙酯、2～10％的二甲基甲硫胺和1M Tris‑HClpH7.5构成的快速提取液，从待测样品中提取总RNA，并作为RNA模板；S2使用设计的上游引物、下游引物及环引物，构建RT‑LAMP反应体系；S3将所述RT‑LAMP反应体系，置于65℃水域中，反应60分钟，得到反应液；S4对所述反应液进行检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种黄瓜花叶病毒RT-LAMP检测试剂盒及检测方法，具体涉及雀麦花叶病毒科黄瓜花叶病毒属黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)RT-LAMP引物组的建立，CMV RT-LAMP检测试剂盒的应用。
技术介绍
黄瓜花叶病毒(CMV)是雀麦花叶病毒科黄瓜花叶病毒属代表种，为三分体基因组和一个亚基因组，均为正单链RNA病毒，RNA1长3357bp，RNA2长3050bp，RNA3长2216bp，RNA4为RNA3的亚基因组，长1000bp。CMV是一种非常严重的病毒病害，病毒可达到除生长点以外的任何部位。该病毒寄主范围多、分布广，具经济重要性的植物病毒之一，能侵染1000多种双子叶和单子叶植物。CMV可由60多种蚜虫以非持久方式传播，易机械接种传播，是我国十字花科、茄科、豆科及葫芦科蔬菜上最主要的病院病毒，也是烟草、香蕉、西番莲的重要病原，我国已从38个科的120多种植物上分离到CMV。环介导的等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是根据目的基因的6个特异区域，设计4-6条特异性引物，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种黄瓜花叶病毒RT‑LAMP检测试剂盒，其特征在于，包括RT‑LAMP引物，所述RT‑LAMP引物为：上游外引物FIP序列SEQ ID NO.3；上游内引物BIP序列SEQ ID NO.4；下游外引物F3序列SEQ ID NO.1；下游外引物B3序列SEQ ID NO.2；以及环引物LB序列SEQ ID NO.5。

【技术特征摘要】
1.一种黄瓜花叶病毒RT-LAMP检测试剂盒，其特征在于，包括RT-LAMP引物，所述RT-LAMP引物为：上游外引物FIP序列SEQ ID NO.3；上游内引物BIP序列SEQ ID NO.4；下游外引物F3序列SEQ ID NO.1；下游外引物B3序列SEQ ID NO.2；以及环引物LB序列SEQ ID NO.5。2.如权利要求1所述的试剂盒，还包括黄瓜花叶病毒的RNA的快速提取液，所述快速提取液由10％的乙酸乙酯、2～10％的二甲基甲硫胺和1M Tris-HClpH7.5构成。3.如权利要求2所述的试剂盒，其中，所述二甲基甲硫胺的浓度为6％。4.一种黄瓜花叶病毒RT-LAMP检测方法，其特征在于，包括以下步骤S1使用由10％的乙酸乙酯、2～10％的二甲基甲硫胺和1M Tris-HClpH7.5构成的快速提取液，从待测样品中提取总RNA，并...

【专利技术属性】
技术研发人员：王莹，
申请(专利权)人：临沂大学，
类型：发明
国别省市：山东;37