本发明专利技术的离子液手性固定相，由L‑脯氨酸衍生物模块、N‑乙烯基咪唑形成的阴离子交换器模块和巯丙基硅胶模块构成，其分子结构式为：式中：R1为氢、脂肪烷烃基、环烷烃基、含有取代基或不含取代基的芳基、芳烷基、萘基、蒽基；Y为任一种阴离子。用所述离子液手性固定相分离缬沙坦光学对映体的方法，包括以下步骤：⑴制备流动相；⑵将缬沙坦对映体用所述流动相溶解，获得对映体待分离溶液；⑶采用式Ⅰ的离子液手性固定相；⑷将缬沙坦对映体待分离溶液用离子液手性固定相进行色谱柱分离并在254nm的紫外检测条件下进行检测，记录色谱图。本发明专利技术解决了色谱制备上缬沙坦因流动相溶解小造成上样量小的难题，具备手性色谱制备的潜力。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及化学分析分离学科中的手性固定相
，具体说，是将脯氨酸衍生物与N-乙烯基咪唑连接制成手性选择剂，然后键合到含巯基的硅胶载体表面，得到一种新型的离子液手性固定相；将所述离子液手性固定相用于分离R-和S-缬沙坦光学对映体的方法。
技术介绍
缬沙坦的商品名为Diovan，是由瑞士诺华公司研制并于1998年由美国FDA批准上市的一种口服特异性血管紧张素Ⅱ(AT1)受体拮抗剂，是在临床上用于治疗轻中度原发性高血压的药物。2005年，美国FDA又扩大该药的用药范围为：适用于治疗心力衰竭。缬沙坦化学名为(S)-N-戊酰基-N-[[2’-(1H-5-四氮唑-基)[1,1’-联苯]-4-基]甲基]-缬氨酸，其结构式如式(II)，其有一个手性中心，存在一对对映体即S-缬沙坦和R-缬沙坦(其具有不同的旋光性)，其中，S-缬沙坦的生物活性远远高于R-缬沙坦。关于缬沙坦合成工艺已有美国专利US5339578、US7741507以及世界知识产权组织的WO 2004/026847、WO2006/058701有公开，其中，被广泛采用的缬沙坦的合成工艺为：先制备得到S-缬沙坦甲酯，然后经水解反应再得到S-缬沙坦；然而目前在水解反应的过程中无法避免因消旋反应而生成R-缬沙坦。为了降低缬沙坦中R-缬沙坦杂质的含量，工业上需要严格控制结晶条件，但是这样做会降低S-缬沙坦的收率。为了降低成本提高收率，现有的做法是在制备过程中对母液进行拆分回收。目前，工业上的拆分方法是手性化学拆分法。所述手性化学拆分法即生成非对映体拆分法，其常用的拆分试剂为手性胺类，如α-苯乙胺、N-苄基-α-苯乙胺等。但是，手性化学拆分法的工作量大且效率较低。而手性高效液相色谱法以其快速高效的优势已被广泛应用于手性药物的分析与制备。对于R-和S-缬沙坦光学对映体的分离，根据现有文献，仅有Chiral AGP(α-酸性糖蛋白，J.Chromatogr.B 1996，686，77-83)、ChiraDex(-环糊精，J.Chem.Pharm.Res 2015，7，118-121)和Chiralpak AD-H(淀粉，pharmazie 2009，64，495-498)三款手性色谱柱对其具备分离能力。但是，前两款手性色谱柱(Chiral AGP、ChiraDex)是以磷酸盐为流动相对R-和S-缬沙坦进行手性分离的。这一条件限制了上样量。另外，蛋白柱低的键合量也限制了上样量，且色谱制备效率低，从而限制了前两款手性色谱柱在R-和S-缬沙坦光学对映体制备中的应用。而后一款手性色谱柱(Chiralpak AD-H)是以正己烷/异丙醇为流动相对R-和S-缬沙坦光学对映体进行手性分离的，它同样因为流动相样品溶解度极低而大大限制了上样量，因而也不适于R-和S-缬沙坦光学对映体的制备。总之，文献报道的这三款色谱柱仅对R-和S-缬沙坦光学对映体具有色谱分析能力，而不具有R-和S-缬沙坦光学对映体色谱制备能力。因此，如果能以对R-和S-缬沙坦具有优秀溶解度的溶剂(如甲醇、乙醇)为流动相，研发一种对缬沙坦有较出色的分离能力的手性固定相在本领域是非常需要的。因为，这大大提高了增大上样量的可能，为R-和S-缬沙坦光学对映体的色谱制备提供了可能。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足，提供一种离子液手性固定相；本专利技术的第二个目的是，提供用所述离子液手性固定相分离降血压药R-和S-缬沙坦光学对映体的方法。为实现上述目的，本专利技术采取了以下技术方案。一种离子液手性固定相，其特征在于，由L-脯氨酸衍生物模块、N-乙烯基咪唑形成的阴离子交换器模块和巯丙基硅胶模块构成，其分子结构式为：式中：R1为氢、脂肪烷烃基、环烷烃基、含有取代基或不含取代基的芳基、芳烷基、萘基、蒽基；Y为任一种阴离子。可选的，所述分子结构式(Ⅰ)的手性固定相选自以下分子结构式中的一种：为实现上述第二目的，本专利技术采取了以下技术方案。用所述离子液手性固定相分离缬沙坦光学对映体的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)往极性有机溶剂中添加添加剂，用0.45μm微孔滤膜过滤，超声脱气，得到流动相；(2)将缬沙坦对映体用步骤(1)获得的流动相溶解，用0.22μm微孔滤膜过滤，得到缬沙坦浓度为1.0mg/mL的对映体待分离溶液；(3)采用所述式Ⅰ的离子液手性固定相，其分子结构式为：式(I)中：R1为氢、脂肪烷烃基、环烷烃基、含有取代基或不含取代基的芳基、芳烷基、萘基、蒽基；Y为任一种阴离子；(4)将步骤(2)得到的缬沙坦对映体待分离溶液2μL在柱温为20℃～50℃的条件下对步骤(3)采用的离子液手性固定相进行色谱柱分离，流速为0.5～1.5mL/min，在254nm的紫外检测条件下进行检测，记录色谱图。可选的，步骤(1)所述的极性有机溶剂为甲醇、乙醇、乙腈、异丙醇、乙酸乙酯、二氯甲烷的一种或多种。可选的，步骤(1)所述的添加剂为甲酸、乙酸、三氟乙酸、二乙胺、三乙胺、甲酸铵、乙酸铵、六氟磷酸铵的一种或多种。可选的，步骤(3)所述的离子液手性固定相选自以下分子结构式中的一种：本专利技术的积极效果是：(1)将咪唑模块作为阴离子交换器连接到脯氨酸衍生物上制备适合高效液相色谱用的手性固定相。(2)在极性有机色谱模式下制备的脯氨酸衍生物型手性固定相对R-和S-缬沙坦对映体具有出色的分离能力，解决了色谱制备上缬沙坦因流动相溶解小造成上样量小的难题，具备手性色谱制备的潜力。附图说明图1为实施例8～13离子液手性固定相分离缬沙坦光学对映体的色谱图。图2为实施例14离子液手性固定相CSP3分离缬沙坦光学对映体的色谱图。图3为实施例15在34～37min和37～52min时段内收集的馏分R-缬沙坦和S-缬沙坦分别在同样色谱条件下进行单一对映体光学纯度检测的色谱图。具体实施方式以下结合附图介绍本专利技术离子液手性固定相及分离缬沙坦光学对映体的方法的具体实施方式，但是应该指出，本专利技术的实施不限于以下的实施方式。所述离子液手性固定相的合成方法，包括以下合成步骤：(1)将L-脯氨酸分散在干燥的四氢呋喃中，在加热回流条件下滴加1.2～2.0当量的卤代酰化试剂；1～3h后反应结束，减压蒸除溶剂，用二氯甲烷萃取分散于水中的残留物，有机相以无水硫酸钠干燥，而后减压蒸除溶剂，向残留物中加入异丙醚捣搅析出白色晶体产物，得到卤代酰化的L-脯氨酸。冰水浴下，用二氯甲烷溶解卤代酰化的L-脯氨酸，然后滴加1～1.5当量的二环己基碳二亚胺DCC的二氯甲烷溶液；0.5～1h后，滴加1～1.5当量的伯胺化合物的二氯甲烷溶液；8～24h后反应结束，过滤，用稀盐酸溶液洗涤2～3次，再用碳酸氢钠饱和溶液洗涤2～3次，经无水硫酸钠干燥、减压去除溶剂，残留物用异丙醚捣搅结晶纯化或者用柱色谱纯化，得到L-脯氨酸衍生物。(2)将步骤(1)得到的L-脯氨酸衍生物和1.5当量的N-乙烯基咪唑溶解在乙腈中，氮气氛围下回流反应12～48h，减压蒸除大部分溶剂后，滴加到乙酸乙酯中进行纯化并重复数次，得到手性选择剂。(3)将步骤(2)得到的手性选择剂与偶氮二异丁腈AIBN及巯丙基硅胶加入到烧瓶中，氮气氛围下，在甲醇溶液中回流反应6～12h，得到硅胶。将得到的硅胶进行过滤，用甲醇洗涤数次，在50～60℃温本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种离子液手性固定相，其特征在于，由L‑脯氨酸衍生物模块、N‑乙烯基咪唑形成的阴离子交换器模块和巯丙基硅胶模块构成，其分子结构式为：式中：R1为氢、脂肪烷烃基、环烷烃基、含有取代基或不含取代基的芳基、芳烷基、萘基、蒽基；Y为任一种阴离子。
【技术特征摘要】
1.一种离子液手性固定相，其特征在于，由L-脯氨酸衍生物模块、N-乙烯基咪唑形成的阴离子交换器模块和巯丙基硅胶模块构成，其分子结构式为：式中：R1为氢、脂肪烷烃基、环烷烃基、含有取代基或不含取代基的芳基、芳烷基、萘基、蒽基；Y为任一种阴离子。2.根据权利要求1所述的离子液手性固定相，其特征在于，所述分子结构式（Ⅰ）的手性固定相选自以下分子结构式中的一种： 。3.用权利要求1所述的离子液手性固定相分离缬沙坦光学对映体的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）往极性有机溶剂中添加添加剂，用0.45μm微孔滤膜过滤，超声脱气，得到流动相；（2）将缬沙坦对映体用步骤（1）获得的流动相溶解，用0.22μm微孔滤膜过滤，得到缬沙坦浓度为1.0mg/mL的对映体待分离溶液；（3）采用所述式Ⅰ的离子液手性固定相，其分子结构式为：式中：R1为氢、脂肪烷烃基、环烷烃基、含有取代基或...
【专利技术属性】
技术研发人员：柯燕雄，赵见超，吴海波，王东强，陈龙，吴海霞，杜亚军，韦志深，程玲平，
申请(专利权)人：华东理工大学，
类型：发明
国别省市：上海;31
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