一种细胞凋亡高质量小片段DNA的快速提取及评价方法技术

技术编号:13549360 阅读:58 留言:0更新日期:2016-08-18 15:18
本发明专利技术公开了一种细胞凋亡高质量小片段DNA的快速提取及评价方法,包括用凋亡诱导物A进行凋亡诱导,进行验证细胞凋亡;凋亡诱导物A诱导大量细胞凋亡后进行等分;一份离心后收集细胞沉淀加细胞裂解液,充分裂解细胞,测定样品蛋白的浓度;经过100μg/ml蛋白酶K处理2小时,盐浓度为200mM,在锁相胶对水相和有机相隔离下,吸取锁相胶上方的水相,乙醇沉淀凋亡小片段凋亡DNA;相同体积TE溶解沉淀,根据蛋白的浓度标准化小片段DNA在TE溶解后上样体积从而确定上样的量,电泳后,根据凋亡小片段亮弱确定细胞凋亡的多少。本发明专利技术操作方便,有利于保护操作人员,小片段DNA提取条带亮、质量高,评价凋亡效果容易判断。

【技术实现步骤摘要】
201610370483

【技术保护点】
一种细胞凋亡高质量小片段DNA的快速提取及评价方法,其特征在于,所述细胞凋亡高质量小片段DNA的快速提取及评价方法包括:凋亡试剂A诱导细胞,收获细胞并进行等分;一份离心后收集细胞沉淀加细胞裂解液,充分裂解细胞,测定样品蛋白的浓度,根据等量总蛋白中内参基因的表达一致性作为参考来标准化小片段DNA;一份经过100μg/ml蛋白酶K处理2小时,盐浓度为200mM,在锁相胶对水相和有机相隔离下,吸取锁相胶上方的水相,乙醇沉淀凋亡小片段凋亡DNA;相同体积TE溶解沉淀,根据蛋白的浓度标准化小片段DNA在TE溶解后上样体积从而确定上样的量,电泳根据凋亡小片段亮弱确定细胞凋亡的多少。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:余国武黄玉碧张军杰刘汉梅胡育峰刘应红李炀平吕亚楠王德
申请(专利权)人:四川农业大学
类型:发明
国别省市:四川;51

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