【技术实现步骤摘要】
201610051673
【技术保护点】
一种等离子体正向诱变耐铅乳酸菌的筛选及其分析方法,其特征在于,包括以下步骤:S1,细菌培养:将甘油管中菌种划线接种到MRS固体培养基上,在36‑38℃培养47‑49h后,将菌种转接于MRS液体培养基,在36‑38℃下180r/min震荡需氧培养23‑25h,在对数末期获得菌体;S2,诱变:在无菌条件下分别取培养后的菌液1.5mL于18个一次性小平板中,分别作标签1min,3min,5min,7min,9min,每个时间做3个平行,同时做3个空白对照,无菌条件下,置于等离子体发生室诱变,诱变完成后,将相同时间的3个平行混合,每个时间取100μL用于菌落计数,0.5mL用于菌种保存,取剩余1ml菌液进行铅吸附试验;S3,一次筛选:采用48孔板高通量筛选方法,用牙签挑取诱变的单菌落于装有1.0mL培养液的48孔深孔板中,并接种出发菌株JT1‑YB作为对照,并置于36‑38℃的摇床培养23‑25h,待培养完成后,通过与JT1‑YB比较48孔深孔板中变浑浊的初步判断为疑似突变体菌株;S4,二次筛选:将疑似突变体菌株分别均匀涂布于含有600mg/mL、800mg/mL、1000mg/mL乙酸铅的M ...
【技术特征摘要】
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