一种烧伤动物模型的制作方法技术

本发明专利技术涉及一种用激光制造烧伤动物模型的方法，其特征在于用激光直接照射无毛或脱毛动物皮肤，通过调节输出功率、照光时间、照射距离可复制I～IV°烧伤。本模型操作简便，烧伤程度可精确控制，成功率高，重现性好且安全性高，对动物造成的痛苦较小，符合动物福利原则，本模型可用于人类烧伤的病理机理研究，治疗药物筛选、药效评价、作用机制研究等。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种激光制造烧伤动物模型的方法，适用于烧伤病理机理研究及烧伤药物筛选、疗效评价、作用机制研究等。本专利技术属于医学及生命科学实验研究领域。
技术介绍
烧伤是指热力、化学、电、射线、激光等因素所引起的皮肤、黏膜乃至皮下组织的损伤。急诊室每年接收大量的烧伤病人，对于轻度烧伤往往存在重视不足，因未及时治疗而留下疤痕，对中重度烧伤又存在易感染、难治愈、治疗周期长等现象。烧伤病理机制较为复杂，对治疗药物、方法的验证缺乏有效的动物模型。目前常用于制作烧伤模型的方法主要有化学法和物理法两种。其中物理法常用的有水热、电热、高能射线、强脉冲激光、火烧、机械损伤等，但均存在较大的缺点。如电热、射线等方法存在极大的危险性，如操作不当有引起操作人烧伤的危险，机械损伤(剪切，磨损)等方法与临床表现差别较大，而且现有的烧伤模型大多是针对某一种损伤程度(如深II°)损伤的，且烧伤的面积、程度难以控制，不同实验条件下的重复性和精确度较差，给烧伤机制研究及治疗药物、方法的研究带来一定的局限性。另外，现有的烧伤模型制作过程给动物带来的痛苦较大，不符合动物福利的原则。因此寻找一种安全、简单、可重复、多深度，符合临床表现的动物烧伤模型，对于烧伤机制及治疗的研究极其重要。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种用激光制造烧伤动物模型的方法，具有操作简便，烧伤程度可精确控制，成功率高，重现性好，安全性高，对动物造成的痛苦较小，符合动物福>利原则等优点，可用于烧伤的病理机理研究，治疗药物筛选、药效评价、作用机制研究等。采用无毛动物如裸鼠，有毛动物如小鼠、大鼠、小型猪、家兔等先经过剃毛、化学脱毛等处理。用激光器直接照射无毛或脱毛动物皮肤，所用激光光源可采用半导体激光或氦-氖激光等其他类型激光光源，所用激光器输出功率范围在0～2000mW，波段为可见光及红外波段，照射时间连续可调。调节输出功率、照光时间、照射距离、光斑面积以控制烧伤深度及烧伤面积。肉眼观察动物皮肤照射部位的生物学改变、恢复时间等，将动物麻醉处死后采集损伤部位皮肤置于10％福尔马林溶液中固定，常规脱水，石蜡包埋，切片，HE染色，封片后于显微镜下观察，结合肉眼观察和病理切片观察确定烧伤深度，采用四度五分法进行烧伤深度诊断。具体实施方式下面列举典型实施例，对本专利技术进一步说明，但不以任何形式构成对本专利技术的限制。实施例1：固定照射距离和输出功率，改变照射时间对损伤程度的影响Wistar大鼠采用戊巴比妥钠麻醉后剃除背毛，造成约4×6cm无毛区，将无毛区等分为6个区域，每个区域约2×2cm，用记号笔标号，自上至下自左到右分别标为①②③④⑤⑥，见附图1。采用PDT-670型激光器(桂林市兴达光电医疗器械有限公司生产)，调节输出功率为2000mW，调节光纤头与大鼠背部皮肤①号区域中央部位的距离，使其固定在2cm，设置照射时间为45s，点击开始键开始照射，照射完毕后激光自动关闭。按上述方法固定输出功率2000mW，照射距离2cm，调节照射时间为90s，120s，240s，15s，30s，分别照射②③④⑤⑥区域。照射结束24h后，将大鼠麻醉致死，剪取照射区域皮肤，10％甲醛溶液固定后，①～⑥每个区域各剪取约1×0.3cm皮肤，分别置于包埋盒中，常规脱水，石蜡包埋，自动切片机切片，切片厚度为4μm，HE染色，封片，显微镜下观察，根据《第七届全国烧伤外科学术会议烧伤深度诊断标准修订决议》的标准确定损伤程度。结果显示，固定输出功率2000mW，照射距离2cm，随照射时间的延长，皮肤损伤程度加重，15s和30s的照射时间未造成大鼠皮肤明显损伤，当照射时间为45s，90s，120s，240s时，损伤程度分别为浅II°，深II°，深II°和IV°，见表1。表1固定照射距离和输出功率，改变照射时间对损伤程度的影响附图说明附图1大鼠背部皮肤照射区域划分图，按图所示，将大鼠背部无毛区域分为6个区域，按图中黑框所示位置进行病理取材。输出功率2000mw，照射距离2cm，①～⑥照射时间分别为45s，90s，120s，240s，15s，30s。附图2损伤程度病理观察，HE染色，40×，输出功率2000mw，照射距离2cm，①～⑥照射时间分别为45s，90s，120s，240s，15s，30s，损伤程度分别为浅II°，深II°，深II°，IV°，无损伤，无损伤。以上所述仅为本专利技术的较佳实施例，凡依本专利技术申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本专利技术的涵盖范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用激光制造烧伤动物模型的方法，其特征在于用半导体激光直接照射无毛或脱毛动物皮肤。

【技术特征摘要】
1.一种用激光制造烧伤动物模型的方法，其特征在于用半导体激光直接照射无毛或脱毛动物
皮肤。
2.根据以上权利要求所述的激光制造烧伤动物模型的方法，其特征在于：烧伤深度及面积通
过调节输出功率、照光时间、照射距离进行控制。
3.根据以上权利要求所述的激光制造烧伤动物模型的方法，其特征在于：烧伤深度诊断标准
采用四度五分法，可复制I°，浅II°，深II°，III°，IV°共5种程度的损伤，可在一只动
物上复制出不同程度的损伤。
4.根据以上权利要求所述的激光制造烧伤动物模型的方法，其特征在于：可选用...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘汉清，王爱平，魏金峰，靳洪涛，郭新苗，张倩倩，林妮，阎晓丹，李烨，冯婧怡，刘天天，秦丹，张飘飘，
申请(专利权)人：北京协和建昊医药技术开发有限责任公司，
类型：发明
国别省市：北京;11