【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及活性药物的
,尤其涉及一种从中华鲎尾中制备犬尿酸的方法。
技术介绍
犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)是人体必需氨基酸色氨酸(tryptophan,Trp)的代谢产物之一。人体摄入的Trp除用于合成蛋白质之外,主要在肝、肾、脑等组织器官进行代谢,生成多种具有生理作用的生物活性分子,如Kyn、5-羟色胺、喹啉酸等。Kyn及其代谢产物与多种神经精神疾病、肾功能衰竭、白内障、各种慢性恶性疾病等密切相关。因此,Kyn对相关疾病的诊断治疗、疗效监测及发病机制等研究具有重要参考价值。在现有技术中,尚未有报道犬尿酸存在于中华鲎尾中。有鉴于此,本专利技术人研究和设计了一种从中华鲎尾中制备犬尿酸的方法,本案由此产生。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种从中华鲎尾中制备犬尿酸的方法,通过在中华鲎尾中加入抽提液逐步抽提后,并通过反相硅胶柱及正相硅胶柱的色谱分离,以最终制得犬尿酸。为实现上述目的,本专利技术解决其技术问题的技术方案是:一种从中华鲎尾中制备犬尿酸的方法,包括以下步骤:步骤一、中华鲎尾干粉的制备:将中华鲎尾自然晾晒干燥,在常温下,用药用粉碎机粉碎,得到干粉,装于密封袋中,于干燥器中保存备用;步骤二、中华鲎尾粗体物的制备:称取已经打粉的中华鲎尾5份,每份1000g,分别置于5个2L的三角瓶中,按料液比1:3:16分别加入乙酸、乙酸乙酯和甲醇,封口后置于摇床中,在40℃,15 ...
【技术保护点】
一种从中华鲎尾中制备犬尿酸的方法,其特征在于:包括以下步骤:步骤一、中华鲎尾干粉的制备:将中华鲎尾自然晾晒干燥,在常温下,用药用粉碎机粉碎,得到干粉,装于密封袋中,于干燥器中保存备用;步骤二、称取已经打粉的中华鲎尾5份,每份1000g,分别置于5个2L的三角瓶中,按料液比1:3:16分别加入乙酸、乙酸乙酯和甲醇,封口后置于摇床中,在40℃,150rpm条件下进行第一次提取48h,抽滤,收集滤液;再向残渣中加入相应溶剂进行第二次提取,在同样的条件下提取24h,抽滤,收集滤液,待残渣中溶剂挥干后,再交换溶剂提取1次,进行第三次提取,在同样的条件下提取,合并滤液,45℃减压浓缩至圆底烧瓶中,回收溶剂,分别得有机提取物浸膏,合并提取物浸膏,得到中华鲎尾粗体物,4℃贮存备用;步骤三、中华鲎尾粗体物的初步分离纯化:将中华鲎尾粗体物用甲醇溶解后过滤,40℃减压浓缩后,用硅胶粉干法拌样,上6cm×35cm反相硅胶柱,用100%水进行洗脱,洗脱体积为2L,每250ml收集一个组分,共得到8个馏分,45℃进行减压浓缩后除去溶剂后,合并得到组分A;步骤四、组分A的分离纯化:组分A用适量甲醇溶解后,直接上Se ...
【技术特征摘要】
1.一种从中华鲎尾中制备犬尿酸的方法,其特征在于:包括以下步骤:
步骤一、中华鲎尾干粉的制备:将中华鲎尾自然晾晒干燥,在常温下,用药用粉碎机粉
碎,得到干粉,装于密封袋中,于干燥器中保存备用;
步骤二、称取已经打粉的中华鲎尾5份,每份1000g,分别置于5个2L的三角瓶中,按料液
比1:3:16分别加入乙酸、乙酸乙酯和甲醇,封口后置于摇床中,在40℃,150rpm条件下进行
第一次提取48h,抽滤,收集滤液;再向残渣中加入相应溶剂进行第二次提取,在同样的条件
下提取24h,抽滤,收集滤液,待残渣中溶剂挥干后,再交换溶剂提取1次,进行第三次提取,
在同样的条件下提取,合并滤液,45℃减压浓缩至圆底烧瓶中,回收溶剂,分别得有机提取
物浸膏,合并提取物浸膏,得到中华鲎尾粗体物,4℃贮存备用;
步骤三、中华鲎尾粗体物的初步分离纯化:将中华鲎尾粗体物用甲醇溶解后过滤,40℃
减压浓缩后,用硅胶粉干法拌样,上6cm×35cm反相硅胶柱,用100%水进行洗脱,洗脱体积为
2L,每250ml收集一个组分,共得到8个馏分,45℃进行减压浓缩后除去溶剂后,合并得到组
分A;
步骤四、组分A的分离纯化:组分A用适量甲醇溶解后,直接上SephadexLH20凝胶柱,用甲
醇作为洗脱剂进行洗脱,控制流速为8-9s/drop,使用自动收集器收集各馏分,每60min收集
1管,共收集得到130管馏分;合并第123管至第130管的馏分,再进行减压浓缩,得到组分A8;
步骤五、组分A8的分离纯化:组分A8用适量甲醇溶解后,直接上SephadexLH20正相硅胶
柱,用甲醇作为洗脱剂进行洗脱,经若干次凝胶柱分离,最终收集得到40管馏分,合并24管
至35管馏分得到样品,将该部分样品标记为组分A8-24;
步骤六、组分A8-24的分离纯化:取组分A8-24加适量甲醇溶解后,过正相柱分离;用硅
胶粉拌样,硅胶用石油醚饱和后装柱,样品上柱后,用石油醚与丙酮进行洗脱,收集石油醚:
丙酮=1:10时的馏分,共60管,合并25管至40管,合并馏分后减压浓缩,蒸干溶剂后,制得犬
尿酸。
2.如权利要求1所述的一种从中华鲎尾中制备犬尿酸的方法,其特征在于:所述步骤五
中采用的正相硅胶进行分离的步骤:
a、硅胶粉活化:
取200~300目硅胶粉于试剂瓶中,用扎孔的锡箔纸包好瓶口,置于110℃...
【专利技术属性】
技术研发人员:李健,苏文金,刘鹏飞,苏国成,刘静雯,王力,
申请(专利权)人:集美大学,
类型:发明
国别省市:福建;35
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