KRT71基因表达产物在制备肺鳞癌转移诊治产品中的应用制造技术

本发明专利技术公开了KRT71基因作为肺鳞癌转移的诊治标志物的用途。据此可将KRT71基因用于开发诊断肺鳞癌转移的产品、用于开发治疗肺鳞癌转移的药物。本发明专利技术的研究成果为临床医师制定个性化治疗方案提供理论基础、并且能够为肺鳞癌转移药物的开发提供新的药物靶点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，具体地涉及KRT71基因在肺鳞癌转移的诊断、治疗中的用途。
技术介绍
肺癌分为小细胞肺癌(约占肺癌总数的15％)与非小细胞肺癌(约占肺癌总数的85％)两大组织类型，后者又分为鳞状细胞癌、腺癌、大细胞癌、支气管肺泡癌等。流行病学与病因学研究表明，肺癌的发生是遗传与环境相互作用的结果，环境因素导致的细胞内基因结构及表达水平的改变最终导致了肿瘤的发生，在这一过程中涉及到多基因的共同作用。肿瘤细胞的特点为6个方面，包括:无限增殖能力、对外界抑制增殖信号不敏感、抑制凋亡能力、血管形成能力、侵袭与转移能力及免疫逃逸能力。近年来针对这些方面进行的分子机理研究发现了一系列在恶性肿瘤发生演进过程中起关键作用的癌基因和抑癌基因。在恶性肿瘤的所有特性中，侵袭与转移是造成患者预后差的重要原因。有研究表明，90％的肺鳞癌病人死于肿瘤的转移。陈首英等针对肺癌所作的5年生存率及生存因素的分析表明，存在远处淋巴转移将明显降低肺癌病人的5年生存率，是影响肺癌病人预后的主要危险因素。因此，研究肿瘤的侵袭与转移机制，以达到抑制或减少肿瘤的转移，对于提高病人生存率具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种可用于肺鳞癌转移诊断的分子标志物。使用基因标志物来诊断肺鳞癌转移的具有及时性、特异性和灵敏性，从而使患者在转移早期就能知晓疾病风险，针对风险高低，采取相应的预防和治疗措施。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术提供了检测KRT71基因表达的产品在制备诊断肺鳞癌转移的工具中的应用。进一步，所述检测KRT71基因表达的产品包括检测KRT71基因mRNA水平的产品、和/或检测KRT71蛋白水平的产品。进一步，所述检测KRT71基因表达的产品包括：通过RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或芯片检测KRT71基因表达以诊断肺鳞癌转移的产品。进一步，所述用RT-PCR诊断肺鳞癌转移的产品至少包括一对特异扩增KRT71基因的引物；所述用实时定量PCR诊断肺鳞癌转移的产品至少包括一对特异扩增KRT71基因的引物；所述用免疫检测诊断肺鳞癌转移的产品包括：与KRT71蛋白特异性结合的抗体；所述用原位杂交诊断肺鳞癌转移的产品包括：与KRT71基因的核酸序列杂交的探针；所述用芯片诊断肺鳞癌转移的产品包括：蛋白芯片和基因芯片；其中，蛋白芯片包括与KRT71蛋白特异性结合的抗体，基因芯片包括与KRT71基因的核酸序列杂交的探针。所述用实时定量PCR诊断肺鳞癌转移的产品至少包括的一对特异扩增KRT71基因的引物如SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示。所述检测KRT71基因表达的产品可以是检测KRT71基因表达的试剂、也可以是包含所述试剂的试剂盒、芯片、试纸等，也可以是使用所述试剂的高通量测序平台。所述诊断肺鳞癌转移的工具包括但不限于芯片、试剂盒、试纸、或高通量测序平台；高通量测序平台是一种特殊的诊断肺鳞癌转移的工具，随着高通量测序技术的发展，对一个人的基因表达谱的构建将成为十分便捷的工作。通过对比疾病患者和正常人群的基因表达谱，容易分析出哪个基因的异常与疾病相关。因此，在高通量测序中获知KRT71基因的异常与肺鳞癌转移相关也属于KRT71基因的用途，同样在本专利技术的保护范围之内。本专利技术还提供了一种诊断肺鳞癌转移的工具，所述工具包括检测KRT71基因表达的试剂；所述试剂包括检测KRT71基因mRNA的引物和/或探针、检测KRT71蛋白的抗体。所述工具包括但不限于芯片、试剂盒、试纸、或高通量测序平台。其中，所述芯片包括基因芯片、蛋白质芯片；所述基因芯片包括固相载体以及固定在固相载体的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针包括用于检测KRT71基因转录水平的针对KRT71基因的寡核苷酸探针；所述蛋白质芯片包括固相载体以及固定在固相载体的KRT71蛋白的特异性抗体；所述基因芯片可用于检测包括KRT71基因在内的多个基因(例如，与肺鳞癌转移相关的多个基因)的表达水平。所述蛋白质芯片可用于检测包括KRT71蛋白在内的多个蛋白质(例如与肺鳞癌转移相关的多个蛋白质)的表达水平。通过将多个与肺鳞癌转移的标志物同时检测，可大大提高肺鳞癌转移诊断的准确率。其中，所述试剂盒包括基因检测试剂盒和蛋白免疫检测试剂盒；所述基因检测试剂盒包括用于检测KRT71基因转录水平的试剂；所述蛋白免疫检测试剂盒包括KRT71蛋白的特异性抗体。进一步，所述试剂包括使用RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或芯片方法检测KRT71基因表达水平过程中所需的试剂。优选度，所述试剂包括针对KRT71基因的引物和/或探针。根据KRT71基因的核苷酸序列信息容易设计出可以用于检测KRT71基因表达水平的引物和探针。所述试纸包括检测KRT71基因表达的试剂。所述高通量测序平台包括检测KRT71基因表达的试剂。与KRT71基因的核酸序列杂交的探针可以是DNA、RNA、DNA-RNA嵌合体、PNA或其它衍生物。所述探针的长度没有限制，只要完成特异性杂交、与目的核苷酸序列特异性结合，任何长度都可以。所述探针的长度可短至25、20、15、13或10个碱基长度。同样，所述探针的长度可长至60、80、100、150、300个碱基对或更长，甚至整个基因。由于不同的探针长度对杂交效率、信号特异性有不同的影响，所述探针的长度通常至少是14个碱基对，最长一般不超过30个碱基对，与目的核苷酸序列互补的长度以15-25个碱基对最佳。所述探针自身互补序列最好少于4个碱基对，以免影响杂交效率。进一步，所述KRT71蛋白的特异性抗体包括单克隆抗体、多克隆抗体。所述KRT71蛋白的特异性抗体包括完整的抗体分子、抗体的任何片段或修饰(例如，，嵌合抗体、scFv、Fab、F(ab’)2、Fv等。只要所述片段能够保留与KRT71蛋白的结合能力即可。用于蛋白质水平的抗体的制备时本领域技术人员公知的，并且本专利技术可以使用任何方法来制备所述抗体。在本专利技术的具体实施方案中，所述检测KRT71基因mRNA的引物包括SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示的引物对。本专利技术还提供了KRT71基因和/或其表达产物的抑制剂在制备治疗肺鳞癌转移的药物中的应用。所述抑制剂包括抑制KRT71基因表达的试剂、和/或抑制KRT71基因表达产物的试剂。进一步，所述抑制KRT71基因表达的试剂包括抑制基因转录的试剂、抑制基因翻译本文档来自技高网...

【技术保护点】
检测KRT71基因表达的产品在制备诊断肺鳞癌转移的工具中的应用。

【技术特征摘要】
1.检测KRT71基因表达的产品在制备诊断肺鳞癌转移的工具中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包括：通过RT-PCR、
实时定量PCR、免疫检测、原位杂交、芯片或高通量测序平台检测KRT71基因
表达以诊断肺鳞癌转移的产品；所述用RT-PCR诊断肺鳞癌转移的产品至少包括
一对特异扩增KRT71基因的引物；所述用实时定量PCR诊断肺鳞癌转移的产品
至少包括一对特异扩增KRT71基因的引物；所述用免疫检测诊断肺鳞癌转移的
产品包括：与KRT71蛋白特异性结合的抗体；所述用原位杂交诊断肺鳞癌转移
的产品包括：与KRT71基因的核酸序列杂交的探针；所述用芯片诊断肺鳞癌转
移的产品包括：蛋白芯片和基因芯片；其中，蛋白芯片包括与KRT71蛋白特异
性结合的抗体，基因芯片包括与KRT71基因的核酸序列杂交的探针。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述用实时定量PCR诊断肺鳞
癌转移的产品至少包括的一对特异扩增KRT71基因的引物如SEQIDNO.3和SEQ
IDNO.4所示。
4.一种诊断肺鳞...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨承刚，李曙光，林慧芳，
申请(专利权)人：北京泱深生物信息技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11