一株景天根际促生阿氏芽孢杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种景天根际促生阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)JIA2，已于2016年1月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.11967，本发明专利技术的景天根际促生阿氏芽孢杆菌具有很强的针对性，能够成功定殖于景天科多肉植物的根际土壤，并能够显著促进景天科多肉植物的生长。

【技术实现步骤摘要】
一株景天根际促生阿氏芽孢杆菌及其应用
本专利技术涉及一种景天根际促生阿氏芽孢杆菌及其应用。
技术介绍
景天科植物(Crassulaceae)为多年生肉质草本，外观小巧玲珑，植株肥厚多汁，造型特异，仪态万千，深受消费者的喜爱。景天科多肉植物在园林绿化及室内装饰中发挥着重要作用，还是屋顶绿化的主要材料。随着多肉植物产业的快速发展，提高培育质量、缩短培育周期、降低培育成本是景天科多肉植物生产的迫切需求。根际微生物对植物的有益作用主要表现在改善植物的营养吸收和对植物生长的促进作用，运用生物接种技术改良根际微生物区系被普遍认为是一种环境友好、经济有效的提高植物培育质量和效益的方法。植物根际促生菌(PGPR)是指生存在植物根际范围中，对植物生长有促进或对病原菌有拮抗作用的有益细菌统称。近些年来，国内外开展了许多种植物的PGPR筛选研究与应用，并获得了理想的应用效果。但关于景天科植物PGPR菌株的筛选及应用研究，目前尚未见报道。应用景天科植物PGPR菌株，提升景天科多肉植物的培育质量和生产效益，对于多肉植物产业的可持续发展具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的就是为了解决上述问题，提供一种景天根际促生阿氏芽孢杆菌及其应用。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一株景天根际促生阿氏芽孢杆菌(Bacillusaryabhattai)JIA2，已于2016年1月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.11967。一种组合物，含有上述的阿氏芽孢杆菌。一种菌剂，活性成分为上述的阿氏芽孢杆菌。上述的菌剂，还包括载体；所述载体为固体载体或液体载体。优选：所述菌剂的剂型为液剂、悬浮剂、粉剂、颗粒剂、可湿性粉剂或水分散粒剂。一种复配菌，含有上述的阿氏芽孢杆菌。上述的阿氏芽孢杆菌、菌剂或复配菌在景天栽培中的应用。优选：所述的景天科植物为雪莲。本专利技术的有益效果：本专利技术的景天根际促生阿氏芽孢杆菌JIA2具有很强的针对性，能够成功定殖于景天科多肉植物的根际土壤，并能够显著促进景天科多肉植物的生长。附图说明图1是本专利技术菌株的菌落形态图；图2是本专利技术菌株的光学显微镜镜检图。具体实施方式下面结合附图与实施例对本专利技术作进一步说明。1.筛选过程采集山东省青州市黄楼镇景天科多肉植物生产基地的景天科多肉植物根际土样样品3个。通过梯度稀释法，从根际土样中分离出细菌分离物。通过三区划线法对分离到的细菌进行纯化，并通过镜检判断菌株是否纯化，对纯化后的细菌进行编号，挑取单菌落，转接到LB斜面上保存备用。向含有L-色氨酸的R2A液体培养基中接菌，28℃，180rpm，摇床培养4d。取50微升菌悬液滴于白色陶瓷板上，同时加入50微升Salkowski比色液(50ml35％HCLO4+1ml0.5mol/LFeCl3)。将加入50mg/LIAA的比色液作为阳性对照。白色陶瓷板于室温避光放置30min后观察，颜色变红者表示能够分泌IAA，初筛出分泌IAA的细菌。对初筛获得的分泌IAA的细菌进行定量测定，继续筛选具有应用潜力的根际促生细菌。最后通过景天的盆栽实验，确定一株促进蓝莓生长效果最好的细菌，编号为JIA2。所述的LB斜面：蛋白胨10g；NaCl10g；酵母浸膏5g；琼脂15-20g；水1000ml；pH7.0-7.2，121℃灭菌20min。L-色氨酸的R2A液体培养基：酵母粉0.5g；葡萄糖0.5g；胰蛋白胨0.5g；酪蛋白氨基酸0.5g；可溶性淀粉0.5g；磷酸氢二钾0.3g；七水硫酸镁0.05g；丙酮酸钠0.3g；溶于1000ml水，用磷酸氢二钾与磷酸二氢钾将pH值调至7.2，1L培养基加入L-色氨酸200mg)2.菌株的鉴定(1)菌落特征及菌体形态菌落呈圆形规则且菌落较大，表面凸起较湿润，微黄色不透明，镜检菌体为短杆状，有芽孢，如图1、2所示。(2)生理生化特征淀粉水解试验阳性，V-P试验阴性，甘露醇试验阳性，葡萄糖产酸试验阳性，阿拉伯糖试验阳性，乳糖试验阴性，接触酶试验阳性。(3)产吲哚乙酸(IAA)能力测定将JIA2接种于含有L-色氨酸的R2A液体培养基中，28℃，180rpm，摇床培养4d。用分光光度法测定菌悬液的OD600值，然后将菌悬液10000rpm离心10min，取上清液加入等体积Salkowski(50mL35％HClO4+1mL0.5MFeCl3)比色液，避光静置30min，测定其OD530值。计算菌浓度OD600值为1时，单位体积发酵液中IAA的含量，通过IAA梯度稀释的标准曲线计算IAA的含量。通过测定，JIA2产IAA含量为18.4μg/(mL·OD600)-1。(4)16SrDNA序列分析16SrDNA基因序列如SEQIDNO.1所示。将JIA2的16SrRNA基因序与数Genbank据库中的序列进行BLAST比对分析，结果表明：JIA2与Bacillusaryabhattai同处于一个最小的分支，进化距离最近JIA2的16SrRNA基因序列与Bacillusaryabhattai(EF114313.2)的相似性达％。综合生理生化特征和菌落形态特征，将其鉴定为阿氏芽孢杆菌(Bacillusaryabhattai)，并进行保藏，保藏日期：2016年1月7日，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.11967，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮编：100101。具体的16SrDNA序列如下：ccttagcggctagctccttacggttactccaccgacttcgggtgttacaaactctcgtggtgtgacgggcggtgtgtacaaggcccgggaacgtattcaccgcggcatgctgatccgcgattactagcgattccagcttcatgtaggcgagttgcagcctacaatccgaactgagaatggttttatgggattggcttgacctcgcggtcttgcagccctttgtaccatccattgtagcacgtgtgtagcccaggtcataaggggcatgatgatttgacgtcatccccaccttcctccggtttgtcaccggcagtcaccttagagtgcccaactgaatgctggcaactaagatcaagggttgcgctcgttgcgggacttaacccaacatctcacgacacgagctgacgacaaccatgcaccacctgtcactctgtcccccgaaggggaacgctctatctctagagttgtcagaggatgtcaagacctggtaaggttcttcgcgttgcttcgaattaaaccacatgctccaccgcttgtgcgggcccccgtcaattcctttgagtttcagtcttgcgaccgtactccccaggcggagtgcttaatgcgttagctgcagcactaaagggcggaaaccctctaacacttagcactcatcgtttacggcgtggactaccagggtatctaatcctgtttgctccccacgctttcgcgcctcagcgtcagtta本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种景天根际促生阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)JIA2，已于2016年1月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.11967。

【技术特征摘要】
1.一种景天根际促生阿氏芽孢杆菌(Bacillusaryabhattai)JIA2，已于2016年1月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.11967。2.一种菌剂，其特征是：活性成分为权利要求1所述的阿氏芽孢杆菌。3.如...

【专利技术属性】
技术研发人员：马海林，刘方春，杜秉海，马丙尧，丁延芹，李丽，杜振宇，姚良同，单连娟，
申请(专利权)人：山东省林业科学研究院，
类型：发明
国别省市：山东;37