人源化的IL-15动物制造技术

提供了包含人源化的白细胞介素‑15(IL‑15)基因的经遗传修饰的非人动物。提供了包含人IL‑15基因的细胞、胚胎和非人动物。提供了表达人源化或人的IL‑15蛋白质的啮齿类动物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】领域提供了在其种系中包含人源化的内源非人IL-15基因座的非人动物。提供了在其种系中包含处于内源非人调节元件的控制之下的人源化IL-15编码序列的非人动物。提供了包含经遗传修饰的非人动物(例如哺乳动物，例如啮齿类动物例如小鼠、大鼠和仓鼠)，所述遗传修饰包括在内源基因座上用人或人源化的IL-15基因序列替换非人IL-15基因序列。提供了从内源的经修饰的非人IL-15基因座表达人或人源化IL-15的啮齿类动物及其它非人动物。提供了在非人IL-15启动子和/或调节序列的控制下表达人或人源化IL-15的非人动物。通过引用并入的序列表以ASCII文本文件形式，命名为31013_SEQ.txt，于2014年10月14日创建，并且经由EFS-Web提交给美国专利商标局的9KB的序列表通过引用并入本文。背景具有随机插入的包含人IL-15序列的转基因的转基因小鼠是本领域已知的。然而，从随机整合的转基因表达人IL-15的转基因小鼠在一个方面或另一个方面不是最佳的。例如，大多数对于人IL-15是转基因的小鼠显示出某些细胞包括淋巴细胞(例如T细胞)的异常水平和/或比率，这可能是由于免疫细胞功能的失调。这样的小鼠还显示出一系列病理状态，推测根本地是由于转基因IL-15的失调。这样的失调可起因于例如内源控制元件的缺失，和/或人IL-15序列置于远离内源IL-15基因座之处。本领域存在对于包含人IL-15编码序列的非人动物的需要，其中所述人IL-15编码序列在内源非人IL-15基因座上，和/或处于内源非人IL-15元件(例如上游和/或下游非编码区)的调节控制下。本领域存在对于在内源非人调节元件的控制下表达人IL-15的非人动物的需要。本领域存在对于非人动物的需要，所述非人动物以在非人动物中生理学相关的方式表达人IL-15。本领域存在对于表达人IL-15的非人动物的需要，其中所述非人动物没有在淋巴细胞群体例如T细胞群体中的显著异常性。本领域还存在对于非人动物的需要，所述非人动物表达人或人源化的IL-15，并且没有由对于人IL-15是转基因的非人动物所显示出的病理状态中的一种或多种。概述在各个方面和实施方案中，提供了包含人源化的IL-15基因座的遗传修饰的非人生物体。提供了包含人源化的IL-15基因的非人生物体，其中所述人源化的IL-15基因处于一种或多种内源非人调节元件的控制之下。提供了在内源非人IL-15基因座上包含人源化的IL-15基因的非人生物体。提供了包含内源的人源化的IL-15基因座的非人生物体，所述内源的人源化的IL-15基因座能够通过生物体的种系传递。提供了从经修饰的内源IL-15基因座表达人IL-15的非人动物，例如哺乳动物(例如啮齿类动物，例如小鼠或大鼠)，其中所表达的IL-15是完全或部分人的。提供了经遗传修饰的非人动物、胚胎、细胞、组织和核酸，其包含通过非人IL-15调节控件调节的人IL-15基因组序列。非人动物表达人源化的IL-15蛋白质或完全人IL-15蛋白质(例如完全人成熟IL-15蛋白质)，并且不显示出本领域已知的转基因人IL-15非人动物的病理状态中的一种或多种。在各个实施方案中，非人动物是哺乳动物，例如啮齿类动物，例如小鼠、大鼠、仓鼠等。在具体实施方案中，哺乳动物是啮齿类动物；在另一个具体实施方案中，啮齿类动物是小鼠或大鼠。提供了经遗传修饰的非人动物、胚胎、细胞、组织和核酸，其包含在内源非人IL-15基因座上的人IL-15基因组序列。非人动物从经修饰的内源非人基因座(其通过经修饰的内源IL-15基因座的一种或多种内源非人调节序列调节)表达人源化的IL-15蛋白质或完全人IL-15蛋白质(例如完全人成熟IL-15蛋白质)，并且不显示出本领域已知的转基因人IL-15非人动物的病理状态中的一种或多种。在各个实施方案中，非人动物是哺乳动物，例如啮齿类动物，例如小鼠、大鼠、仓鼠等。在具体实施方案中，哺乳动物是啮齿类动物；在另一个具体实施方案中，啮齿类动物是小鼠或大鼠。在各个实施方案和方面中，非人动物包含在非人动物的基因组中的经修饰的IL-15基因座，以使得经修饰的IL-15基因座能够通过种系传递，其中经修饰的内源IL-15基因座包含内源IL-15基因座的至少成熟蛋白质编码部分的人源化。在各个实施方案中，非人动物是哺乳动物。在各个实施方案中，哺乳动物是啮齿类动物，并且啮齿类动物就经修饰的IL-15基因座而言是杂合或纯合的。在各个实施方案中，啮齿类动物选自小鼠和大鼠。在各个实施方案中，小鼠和大鼠对于经修饰的IL-15基因座是纯合的，并且不能表达内源的完全小鼠或完全大鼠IL-15蛋白质，并且小鼠和大鼠表达成熟人IL-15蛋白质。在一个实施方案中，提供了包含第一内源野生型IL-15等位基因和人源化的第二内源IL-15等位基因的非人动物。在一个实施方案中，提供了包含第一内源IL-15等位基因的缺失和第二内源IL-15等位基因的人源化的非人动物。在一个实施方案中，提供了包含功能性内源IL-15等位基因的缺失，并且包含处于内源非人调节元件的控制之下的至少一个拷贝的人源化IL-15等位基因的非人动物。在一个实施方案中，所述至少一个拷贝的人源化IL-15等位基因在内源IL-15基因座上。在各个实施方案和方面中，人源化是在内源非人IL-15基因座上的一个或多个外显子和/或内含子的人源化。在各个实施方案和方面中，提供了具有经修饰的IL-15基因座的非人动物，其中内源非人5'非翻译区和内源非人3'非翻译区之一或两者保留在经修饰的非人动物中。在一个实施方案中，内源非人IL-15基因座的人源化是具有其为人IL-15基因座的基因组片段的编码区(或其片段)，所述人IL-15基因座的基因组片段包含至少一个人IL-15蛋白质编码外显子。在一个实施方案中，内源非人IL-15基因座的人源化是具有其为人IL-15基因座的基因组片段的编码区，所述人IL-15基因座的基因组片段包含每个人IL-15蛋白质编码外显子，但不包含非人IL-15蛋白质编码外显子。在一个实施方案中，包含人基因组片段的IL-15基因座导致当成熟时为完全人的IL-15蛋白质的表达。在一个实施方案中，内源非人IL-15基因座的人源化是具有编码人IL-15蛋白质的cDNA，以使得在非人动物中加工后，通过人源化的基因座产生的成本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种包含经修饰的内源IL‑15基因座的非人动物，其中所述经修饰的基因座包含非人IL‑15基因组序列，其包含含有至少一个人IL‑15外显子的人核酸序列，以及野生型非人上游调节区和野生型非人下游调节区。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.10.15 US 61/891,0131.一种包含经修饰的内源IL-15基因座的非人动物，其中所述经
修饰的基因座包含非人IL-15基因组序列，其包含含有至少一个人
IL-15外显子的人核酸序列，以及野生型非人上游调节区和野生型非
人下游调节区。
2.权利要求1的非人动物，其包含含有至少三个人IL-15外显子
的人核酸序列。
3.权利要求1的非人动物，其包含含有至少四个人IL-15外显子
的人核酸序列。
4.权利要求3的非人动物，其中所述至少四个人IL-15外显子包
含人IL-15外显子3、4、5和6。
5.权利要求1的非人动物，其中所述经修饰的内源IL-15基因座
包含IL-15编码序列，其产生与人IL-15蛋白质至少95％同一的IL-15
蛋白质。
6.权利要求1的非人动物，其为啮齿类动物。
7.权利要求6的啮齿类动物，其选自小鼠和大鼠。
8.一种包含经修饰的IL-15基因座的非人动物，其中所述经修饰
的基因座包含含有至少一个人IL-15外显子的人核酸序列，以及野生
型非人上游调节区和野生型非人下游调节区。
9.权利要求8的非人动物，其包含含有至少三个人IL-15外显子

\t的人核酸序列。
10.权利要求8的非人动物，其包含含有至少四个人IL-15外显
子的人核酸序列。

【专利技术属性】
技术研发人员：J·F·罗加斯，KM·V·莱，A·J·莫菲，
申请(专利权)人：瑞泽恩制药公司，
类型：发明
国别省市：美国;US