促进伤口愈合的制剂及其制备方法及使用方法技术

本发明专利技术涉及一种促进伤口愈合的制剂，包括细胞培养基，细胞培养基将经转质的内皮前躯细胞予以培养而形成，且经转质的内皮前驱细胞为将微小核醣核酸let-7g转质至一内皮前驱细胞而形成，促进伤口愈合的制剂的制备方法包括分离步骤、转质步骤、及培养步骤，分离步骤为自人类全血分离出单核球细胞，并将单核球细胞种在涂布有人类纤维连接蛋白的孔盘(human-fibronectin-coated plate)以得到内皮前躯细胞，转质步骤为将微小核醣核酸let-7g转质至内皮前驱细胞，以得到经转质的内皮前驱细胞，培养步骤为将经转质的内皮前驱细胞予以培养一预定时间而得到促进伤口愈合的制剂。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术相关于一种医药制剂，特别是相关于一种促进伤口愈合的制剂及其制备方法及使用方法。
技术介绍
糖尿病为全球常见的慢性疾病，是一种生物体将葡萄糖(糖类)转换成能量的方式出现变化的疾病。原因为身体无法制造足够的胰岛素，或是无法有效利用体内制造的胰岛素以进行糖类的转换。糖尿病易引发多种并发症，其中之一为血管病变。高血糖使红血球的细胞膜变硬，导致血流不易通过微细血管而到达伤口组织。且，糖尿病患体内的血红素亦不易释放出氧气，而造成伤口组织缺氧以及营养素不足。此外，高血糖亦会影响纤维母细胞以及上皮细胞的增生，因此，糖尿病患的伤口容易停滞在发炎期，而演变成慢性溃疡。目前相关于糖尿病患者伤口愈合的治疗方式主要包括高压氧治疗、含银活性碳纤维敷料、以及人类血小板衍生生长因子(platelet-derivedgrowthfactor,PDGF)凝胶。高压氧治疗系将病患置于高压舱内，舱内加压并维持在2.5绝对大气压下，使人经由其头上所载的氧气面罩吸取纯氧气，以提高血中含氧浓度，进而改善组织缺氧、促进伤口愈合、以及增强白血球的杀菌能力。然而此方式可能因高压造成肺部、耳膜、以及鼻窦的压力伤害、因高浓度氧气而造成抽搐、以及治疗后因水晶体变肿而导致视力改变。再者，此治疗方式对于病患极为不便，因病患无法自行于家中操作。含银活性碳纤维敷料系由PET不织布、含银活性碳纤维布、以及聚乙烯(polyethylene,PE)膜三层结构所组成。当敷料接触伤口渗液时，可藉由活性碳纤维本身良好的吸附性，以吸附血水渗液及细菌。同时，银离子可破坏细菌的细胞膜及细胞核，而达到杀菌的效果。此外，活性碳纤维的远红外线的功能具有促进血液循环以及加速新陈代谢的功效，进而缩短伤口愈合的时间。然而，此产品对于糖尿病患伤口的愈合仍需花费较长的时间。且，将纳米银粒均匀镀设于活性碳纤维布上，是一件繁复且加工不易的制作工序，加上纳米银粒的造价并不便宜，因而导致此产品的成本提高，从而降低商业竞争力。另外，人类血小板生长因子凝胶，含有基因重组的人类血小板源生长因子(Recombinatehumanplatelet-derivedgrowthfactor,rh-PDGF)，藉由其所含的生长因子以促进伤口愈合，然而其费用昂贵。
技术实现思路
本专利技术的目的即在于提供一种促进伤口愈合的制剂及其制备方法及使用方法，能藉由简易且成本相对较低的制备方法以制备出具有加速伤口愈合的制剂，且此制剂能随时随地应用于病患身上。本专利技术为解决习知技术的问题所采用的技术手段提供一种促进伤口愈合的制剂，包括细胞培养基(cellculturemedium)，细胞培养基将经转质的内皮前躯细胞(endothelialprogenitorcell)予以培养而形成，且经转质的内皮前驱细胞为将微小核醣核酸(microRNA)let-7g转质至一内皮前驱细胞而形成。在本专利技术的一实施例中系提供一种制剂，细胞培养基于培养内皮前躯细胞之前系为内皮细胞基础培养基(endothelialbasalmedium,EBM)。在本专利技术的一实施例中系提供一种制剂，还包括至少一种医药学上可接受的载剂、稀释剂或赋形剂。在本专利技术的一实施例中系提供一种促进伤口愈合的制剂，赋形剂为一甘油。本专利技术为解决习知技术的问题所采用的另一技术手段系提供一种促进伤口愈合的制剂的制备方法，包括以下步骤：分离步骤：自人类全血分离出单核球细胞，并将单核球细胞种在涂布有人类纤维连接蛋白的孔盘(human-fibronectin-coatedplate)以得到内皮前躯细胞；转质步骤：将微小核醣核酸let-7g转质至内皮前驱细胞，以得到经转质的内皮前驱细胞；以及培养步骤：将经转质的内皮前驱细胞予以培养一预定时间而得到促进伤口愈合的制剂。在本专利技术的一实施例中系提供一种制备方法，于培养步骤中，将经转质的内皮前驱细胞的培养系为培养于内皮细胞生长培养基(endothelialgrowthmedium-2,EGM-2)7天，并于第7天将内皮细胞生长培养基更换为内皮细胞基础培养基，接着持续培养2天以收集内皮细胞基础培养基而得到促进伤口愈合的制剂。在本专利技术的一实施例中系提供一种制备方法，预定时间为6至10天。在本专利技术的一实施例中系提供一种制备方法，分离步骤中，藉由梯度剂Histopaque-1077以密度梯度离心法自人类全血中分离出单核球细胞。本专利技术为解决习知技术的问题所采用的另一技术手段系提供一种促进伤口愈合的方法，包括：将治疗有效量的制剂投予至一生物体的伤口。在本专利技术的一实施例中系提供一种促进伤口愈合的方法，生物体为一患有糖尿病的患者。经由本专利技术所采用的技术手段，在本专利技术中，特别选用内皮前驱细胞以及微小核糖核酸let-7g以共同制备出促进伤口愈合的制剂。其系因内皮前驱细胞具有分化成血管内皮细胞，以修复不完整的血管内皮层，以及促使血管新生的能力。而微小核醣核酸中let-7g则在过往研究发现其可保护血管内皮细胞，治疗及预防血管硬化等疾病。藉由将let-7g转质入内皮前驱细胞，以调控内皮前驱细胞的表现，并培养此经转质let-7g的内皮前驱细胞，使内皮前驱细胞释放出具有加速伤口愈合的因子至培养基中。此培养基不仅具有良好的治愈伤口的效果，且，制备方法简单，所费的时间及成本皆不高，因此可普遍地应用于伤口不易愈合的患者，例如糖尿病患，而不增加病患于经济上的压力。此外，本发明的制剂的使用方法为直接将制剂施用于病患的伤口处，操作方式简便而可随时随地使用。附图说明图1为显示根据本专利技术的一实施例的一促进伤口愈合的制剂的流程图。图2为显示根据本专利技术的实施例的一促进伤口愈合的制剂用于一测试糖尿病小鼠伤口愈合表现的实验中，糖尿病小鼠的伤口建构的示意图。图3为显示根据本专利技术的实施例的促进伤口愈合的制剂用于测试糖尿病小鼠伤口愈合表现的实验中，各组糖尿病小鼠伤口愈合程度的实际影像图。图4为显示根据本专利技术的实施例的促进伤口愈合的制剂用于测试糖尿病小鼠伤口愈合表现的实验中，各组糖尿病小鼠伤口愈合速率的趋势的折线图。符号说明S1分离步骤S2转质步骤S3培养步骤具体实施方式以下根据图1，而说明本专利技术的实施方式。该说明并非为限制本专利技术的实施方式，而为本专利技术的实施例的一种。依据本专利技术的一实施例的一促进伤口愈合的制剂，包括细胞培养基(cellculturemedium)，细胞培养基将经转质的内皮前躯细胞(endothelialprogenitorcell)予以培养而形成，且经转质的内皮本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种促进伤口愈合的制剂，其特征在于，其包含细胞培养基(cell culture medium)，该细胞培养基系将经转质的内皮前躯细胞(endothelial progenitor cell)予以培养而形成，且该转质的内皮前驱细胞系为将微小核醣核酸(microRNA)let‑7g转质至一内皮前驱细胞而形成。

【技术特征摘要】
1.一种促进伤口愈合的制剂，其特征在于，其包含细胞培养基(cellculturemedium)，
该细胞培养基系将经转质的内皮前躯细胞(endothelialprogenitorcell)予以培养而形成，且该
转质的内皮前驱细胞系为将微小核醣核酸(microRNA)let-7g转质至一内皮前驱细胞而形成。
2.如权利要求1所述的制剂，其特征在于，该细胞培养基于培养该内皮前躯细胞之前系
为内皮细胞基础培养基(endothelialbasalmedium,EBM)。
3.如权利要求1所述的制剂，其特征在于，还包括至少一种医药学上可接受的载剂、稀
释剂或赋形剂。
4.如权利要求3所述的制剂，其特征在于，该赋形剂系为一甘油。
5.一种促进伤口愈合的制剂的制备方法，其特征在于，其包含以下步骤：
分离步骤：自人类全血分离出单核球细胞，并将该单核球细胞种在涂布有人类纤维连接
蛋白的孔盘(human-fibronectin-coatedplate)以得到内皮前躯细胞；
转质步骤：将微小核醣核酸let-7g转质至该内...

【专利技术属性】
技术研发人员：洪挺祯，蓝传清，陆家祺，刘承叡，
申请(专利权)人：洪挺祯，
类型：发明
国别省市：中国台湾;71