一种交枝顶孢霉菌株（Acremonium implicatum）CQBBW8，保藏编号为CGMCC No.11440，该菌的rDNA-ITS序列和Acremonium implicatum isolate LR2的序列同源性高达98%。本发明专利技术从柑桔全爪螨体上分离得到的交枝顶孢霉菌株CQBBW8，其生产性状好、生长迅速，培育15天之后的菌落直径可达5.083cm；同时对多种害虫的杀虫活性强、杀虫效果好，106个/mL杀灭柑桔凤蝶3龄幼虫死亡率高达100%，灭杀蚜虫死亡率高达100%，灭杀柑桔全爪螨死亡率高达100%。利用该菌株生产的杀虫真菌制剂，有效地控制了多种害虫种群数量。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种微生物新菌株，具体涉及，属于生 物农药领域。 技术背景 自专利技术化学农药之后，化学农药以每年5%惊人速度增长。虽然在过去的几十年 中，化学农药在农业作为增产和害虫防治中起到了重要作用，但化学农药的大量使用，带来 了严重的"3R"问题（即抗药性Resistance，农药残留Residence，再娼獗Resurgence)，也 带来了一系列的生态环境问题。长期大量使用化学农药导致抗药性害虫增加，特别是近10 年来，棉铃虫、蚜虫、小菜蛾、斜纹夜蛾等多发性害虫对菊酯类、有机磷类化学农药的抗药性 增加了几百乃至数千倍。化学农药的施用，使农产品中农药残留量增加，严重污染了环境， 危及人类建康及生命。随着人们生活水平的提高，人们对环境的要求越来越高，因此迫使人 们寻找一种害虫防治替代方法。 随着无公害农产品需求的日益增长和市场的良性发展，应用微生物杀虫剂防治害 虫的呼声越来越高，因此亟需研究开发新型微生物杀虫剂及其产业化关键技术。由于虫生 真菌对人类具有经济和生态意义，因而早就受到人们的关注，尤其是近几十年，全国对其研 究的广度和深度都有所加强。虫生真菌种类多，代谢类型复杂，以安全有效，显著的流行潜 力，容易大量生产等优点，在害虫的生物防治中占有越来越重要的地位。世界上许多国家的 科学工作者已对它们进行了广泛深入的研究，到目前为止，世界各国已有50多种真菌杀虫 剂登记注册，其中以球孢白僵菌的种类最多。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种杀虫杀螨、生产性状好的交枝顶孢霉菌株CQBBW8。 本专利技术菌株是通过柑桔全爪螨体上分离得到的一株生产性状好、对杀虫杀螨具有 高毒力的交枝顶抱霉（Acremonium implicatum)菌株CQBBW8,已于2015年09月22日在 中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC)保藏，地址：北京市朝阳区北辰 西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号：CGMCC No. 11440。 本专利技术交枝顶孢霉菌株CQBBW8接种在PDA平板上，显示在PDA培养基上菌落缓慢 生长，在25°C温度下PDA培养基生长10d，菌落直径为40-45mm，气生菌丝乳白色，绒毛状，随 后慢慢的在菌落中间会呈现橙红色，潮湿，有刺鼻性气味；菌落背面橙黄色；分生孢子长椭 圆形，纺锤状，链生或簇生；有厚垣孢子产生。 本专利技术技术方案是经过采集柑桔全爪螨一分离纯化菌株一鉴定菌株的分类地位 -确定菌株的培养条件一平板和固体发酵一干孢子粉收集一杀虫效果测定等步骤，反复 筛选出的一株具有高杀虫活性、生产性状好的交枝顶孢霉（Acremonium implicatum)菌株 CQBBW8。 为了进一步提高本专利技术菌株的生长势及其产孢性状、以便更适于孢子批量生产， 对本专利技术菌株发酵培养基优选为PDA-糖培养基（pH 8. 0)，121°C高压湿热灭菌30min ;自然 冷却后按1 : 10 (菌液：PDA，V/W)比例接种交枝顶孢霉菌CQBBW8菌液25°C发酵罐培养3 天后与大米培养基（比如为了降低成本、可以采用低值陈米培养基）中混匀，置于25°C的发 酵室中静止发酵10天收集孢子粉，产孢量达5 X IO11Vg13本领域均明确PDA-糖培养基，发 酵过程中在PDA培养基中加入糖成分在大批量生产中发酵更完全。 一种杀菌、杀螨农药组合物，其特征在于：其包含氧化亚铜、丙森锌、嘧菌酯中一种 或多种任意组合，与交枝顶孢霉（Acremonium implicatum)CQBBW8的分生孢子粉。 一种杀螨农药组合物，其特征在于：其包含四螨嗪或/和螺螨酯，与交枝顶孢霉 (Acremonium implicatum)CQBBW8 的分生抱子粉。 本专利技术交枝顶孢霉菌株CQBBW8具体如下的有益效果： 本专利技术从柑桔全爪螨体上分离得到的交枝顶孢霉菌株CQBBW8,其生产性状好、生 长迅速，培育20天时产孢量达5X IO1Vg ;同时对多种害虫的杀虫活性强、杀虫效果好，IO6 个/mL孢子悬液灭杀柑桔凤蝶3龄幼虫死亡率高达100 %，灭杀蚜虫死亡率高达100 %，灭 杀相結全爪蝴死亡率尚达100%。利用该菌株生广的杀虫真菌制剂，有效地控制了多种害虫 种群数量。【附图说明】 图I :CQBBW8菌株分生孢子与产孢结构形态； 图 2 :交枝顶抱霉（Acremonium implicatum) CQBBW8 菌落正面； 图 3 :交枝顶抱霉（Acremonium implicatum)CQBBW8 菌落背面； 图4 :实施例6不同碳源对交枝顶孢霉CQBBW8菌丝生长的影响； 图5 :实施例6不同氮源对交枝顶孢霉CQBBW8菌丝生长的影响； 图6 :实施例6不同温度对交枝顶孢霉CQBBW8菌丝生长的影响； 图7 :实施例6不同pH对交枝顶孢霉CQBBW8菌丝生长的影响； 图8 :实施例8交枝顶孢霉CQBBW8生长最适培养基的筛选。【具体实施方式】 下面通过实施例对本专利技术进行具体的描述，有必要在此指出的是以下实施例只用 于对本专利技术进行进一步说明，不能理解为对本专利技术保护范围的限制，在不背离本专利技术精神 和实质的情况下，对本专利技术方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本专利技术的范围。若 未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。 实施例1菌株的分离 将采集到的自然感染的柑桔全爪螨体用70%酒精表面消毒，放入25°C培养箱中 保湿培养3-5天，使其昆虫表面生长出新鲜孢子；在无菌条件下，用接种环挑取微量新鲜孢 子在含有100 μ g/ml氨苄青霉素的PDA培养基平板上划线；将划线好的培养皿翻转放置于 25°C恒温箱中培养；3-4日后挑选长出的典型而无杂菌的菌落，在菌落边缘用移菌针挑取 带有菌丝的培养基一小块，转入试管斜面培养基中央，25°C恒温培养10天。 实施例2菌株的鉴定 (1)形态鉴定 将分离到的（CQBBW8)菌株接种在PDA平板上，25 °C培养观察菌落形态特征，产孢 结构和孢子形状与大小。参见图1、2、3,结果显示菌落生长缓慢，在25°C温度下PDA培养 基IOd直径为40-45mm，气生菌丝乳白色，绒毛状，随后慢慢的在菌落中间会呈现橙红色，潮 湿，有刺鼻性气味；菌落背面橙黄色。分生孢子长椭圆形，纺锤状，链生或簇生，有厚垣孢子 产生。分生孢子梗稀缺，分生孢子纺锤形，光滑透明，大小6. 5-9. 8X2. 0-3. 2 μm。多形成 粘孢团，少数形成干燥的短链，大量孢子聚集产生微弱的红棕色。 (2) CQBBW8菌株的ITS序列扩增、序列测定及分子鉴定 以ITSl和ITS4为引物（参见表1)，从该菌株基因组DNA中扩增出1条约600bp 的序列，PCR产物经测序后所得序列通过Blast与GenBank中已有的核酸序列进行对比， 结果表明，该菌株的:rDNA-ITS序列测序结果见SEQ ID No.l，和Acremonium implicatum isolate LR2的序列同源性高达98%。 表1交枝顶孢霉（A. implicatum)的扩增条件及体系 实施例3CQBBW8对柑桔凤蝶3龄幼虫室内杀虫活性的测定 刮取生长于PDA平板上7d的CQBBW8菌丝于0. 02%吐温的无本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种交枝顶孢霉菌株，其特征在于：所述菌株为交枝顶孢霉菌株（Acremonium implicatum）CQBBW8，保藏编号为CGMCC No.11440。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：胡军华，王娟，姚廷山，刘浩强，李鸿筠，冉春，
申请(专利权)人：中国农业科学院柑桔研究所，
类型：发明
国别省市：重庆;85
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