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一株抗胃肠道胁迫的人源性嗜酸乳杆菌及其应用制造技术

技术编号:13036504 阅读:128 留言:0更新日期:2016-03-17 12:01
本发明专利技术涉及一株抗胃肠道胁迫性能优良的人源性嗜酸乳杆菌,具体涉及一株新的嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)NCU402,保藏编号为:CGMCC 11887,还涉及含有所述菌株的组合物。本发明专利技术菌株或其组合物具有抗胃肠道胁迫性能。此外,还具有较强的黏附性能,对肠道致病菌具有较好的抑制作用,具有一定的抗药性。本发明专利技术菌株可以是食品形式的组合物,并能发酵大宗果蔬产生酸鲜可口、营养丰富、天然果蔬味浓郁并具有良好保健功能的益生菌高效发酵果蔬产品(泡菜、饮料、浆料),产品中无需添加任何香精香料、色素、酸味剂、稳定剂、防腐剂等食品添加剂,所有风味由益生菌发酵果蔬原料产生。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
,涉及人源性嗜酸乳杆菌。
技术介绍
益生菌是指一类对宿主产生有益作用的活性微生物,通过定植于宿主肠道、生殖 系统内,能够对宿主产生确切的健康功效,从而改善宿主体内微生态平衡、发挥有益作用的 活性微生物的总称。乳酸菌作为益生菌中最具代表性的菌属,具有帮助消化、促进营养物质 的吸收、缓解乳糖不耐症、预防和治疗腹泻、调节肠道菌群和缓解便秘、调节机体免疫功能、 降低血液总的胆固醇、改善食物引起的过敏性疾病、延缓衰老及抗肿瘤等生理活性。 嗜酸乳杆菌作为益生菌的一员,在医药、食品行业应用广泛,但由于胃酸、消化酶 等抑制作用,只有当人体摄入嗜酸乳杆菌达到10 6cfu/mL以上,才能保证到达肠道的嗜酸乳 杆菌有足够数量,发挥应有的益生功能。嗜酸乳杆菌作为生产用菌株在发酵食品工业中也 扮演了重要的角色。嗜酸乳杆菌在肠道中发酵,产生乳酸、过氧化氢以及抗菌素等代谢产 物,对预防和治疗肠道易激综合症、乳糖不耐受症、慢性胃炎、腹泻、阴道炎症等疾病有一定 的疗效;多项研究还表明嗜酸乳杆菌可能通过膜吸附、膜吸收和细胞同化三种途径降低血 液中胆固醇含量;代谢产生的超氧化物歧化酶(SOD)能消减自由基,从而达到抑制某些癌 细胞生长、延缓机体衰老等益生作用。由于人体胃肠道的恶劣环境,大多数不耐酸的益生 菌无法大量定植存活,继而无法发挥其应有的益生作用。因此一株耐酸耐胆盐强、抑菌能力 强、黏附性能好的嗜酸乳杆菌菌株,是开发功能性食品、冻干菌剂、保健药品等产品的关键。 目前,国内外研究比较多的有双歧杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、瑞士乳杆菌 等菌株。然而,由于乳酸菌的益生活性具有菌株特异性,不同菌株之间的益生活性差别较 大。因此,需要更有针对性的筛选具有特殊生理活性的菌株。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一株抗胃肠道胁迫的人源性嗜酸乳杆菌,该菌株为人源性嗜 酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)NCU402,以便解决中国市场上乳酸菌产品使用的 菌株的国产化问题。 本专利技术提供的嗜酸乳杆菌是从7-14天健康新生儿新鲜粪便中有针对性地筛选得 到的人源性嗜酸乳杆菌NCU402,该菌株由南昌大学食品学院食品科学与技术国家重点实 验室分离并保藏,编号NCU402 ;该菌株已于2015年12月16日保藏于中国微生物菌种保 藏管理委员会普通微生物中心,地址,北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微 生物研究所,菌种保藏编号为:CGMCC 11887,建议分类命名为嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)〇 本专利技术同时提供了一种组合物,该组合物包含所述嗜酸乳杆菌NCU402,可以是食 品。所述的嗜酸乳杆菌NCU402为活菌或灭活菌或该菌株的衍生物。 本专利技术所述的食品可以是发酵果蔬、发酵乳、乳酪、含乳饮料、乳粉或其他含有该 菌株或该菌株衍生物的食品的任何一种。 本专利技术所提供的菌株及其组合物抗胃肠道胁迫能力优良。具体包括: 能够耐受人体胃、肠道的恶劣逆性环境,包括人工胃液、人工肠液、低pH、高胆盐、 高渗透压环境,并能成功黏附在胃或肠道细胞上。 本专利技术所提供的体外试验证实,嗜酸乳杆菌NCU402具有较强的黏附性能,对肠道 致病菌具有较好的抑制作用,具有一定的抗药性。 本专利技术所属领域技术人员根据上述说明即可利用本专利技术至最广的程度。因此,以 下说明仅作为示例说明,并非以任何方式限制其余的揭露内容。若本文所述及的明确完整 事物已在与本专利技术有关的相关技术中出现已知的同等物时,这些已知的同等物将视为独立 事项并入本文中。 本专利技术提供了一株抗胃肠道胁迫性能优良的人源性嗜酸乳杆菌,该菌株或其组合 物具有抗胃肠道胁迫性能。此外,嗜酸乳杆菌NCU402还具有较强的黏附性能,对肠道致病 菌具有较好的抑制作用,具有一定的抗药性。本专利技术菌株可以是食品形式的组合物,并能发 酵大宗果蔬产生酸鲜可口、营养丰富、天然果蔬味浓郁并具有良好保健功能的益生菌高效 发酵果蔬产品(泡菜、饮料、浆料),产品中无需添加任何香精香料、色素、酸味剂、稳定剂、 防腐剂等食品添加剂,所有风味由益生菌发酵果蔬原料产生。【附图说明】 图1所示为本专利技术分离菌株嗜酸乳杆菌NCU402耐渗透压能力情况。 图2所示为本专利技术分离菌株嗜酸乳杆菌NCU402在不同pH下的生长曲线。 图3所示为本专利技术分离菌株嗜酸乳杆菌NCU402在不同胆盐浓度下的生长曲线。 图4所示为本专利技术分离菌株嗜酸乳杆菌NCU402在人工胃肠液下的生长曲线。【具体实施方式】 下面将结合附图和实施例对本专利技术进行进一步详细的说明。 实施例1 :菌株的筛选和鉴定。 微生态系统中细菌和寄主有个相应的供需关系,有些益生菌的黏附性对宿主种属 具有特异性;婴幼儿的肠道中微生态系统中的菌种类别相对于成年人较少,但是益生菌的 种类和数目多于成年人;随着婴儿发育,其肠道形态也会发生相应的改变,加上断奶后饮食 的变化,婴儿的肠道菌群会发生巨大的转变:兼性厌氧菌数量下降,严格厌氧菌如拟杆菌等 的数量逐渐增多并成为优势菌群,肠道菌群种类增大,在1岁时肠道内菌群多样性接近成 年人肠道菌群特征。因此为了发挥对人体的更强益生功能,本研究采用7-14天健康新生儿 的新鲜粪便作为筛选样品,目的预期获得能耐受人体胃肠道胁迫环境的人源性嗜酸乳杆菌 菌株;以形态学特征、生理生化特征和分子生物学鉴定所筛菌株,为之后生理生化特性研究 和菌剂制备提供优良菌株。 Ll婴儿粪便样品的采集。 将各医院所提供的7-14天内健康新生儿新鲜粪便用无菌棉签移入装有30mL BP 溶液的无菌采样瓶(038 mmx65 mm)中,置于保温冰盒内冷却,间隔Ih更换冰袋以保证 样品处于低温环境,转移到实验室后进行后续处理。 I. 2嗜酸乳杆菌菌株的筛选。 1.2. 1样品的富集培养。 取适量样品加入MRS液体培养基中,置于37°C恒温培养箱中培养24h。 L 2. 2菌株的初筛和纯化。 取ImL上述富集培养液移入9mL的无菌生理盐水中,依次进行10倍梯度稀释,每 个梯度取100 μ L菌悬液均匀涂布于无菌MRS固体培养基,37°C倒置培养48h ;按照《伯杰氏 细菌鉴定手册》(第八版)中所描述的嗜酸乳杆菌形态特征以及嗜酸乳杆菌ATCC4356标准 菌株在MRS固体培养基上的菌落形态特征挑选单菌落,采用平板划线法,进行3-5次划线分 离获得纯菌株单菌落;对所筛菌株进行制片镜检观察其细菌形态,剔除球菌和革兰氏阴性 菌。 1.2. 3菌株的复筛和保藏。 用接种环将初筛菌株接种于复筛培养基A(在MRS液体培养基基础上用HCl调 节pH为3. 5,121°C高压蒸汽灭菌20min)中,37°C培养18h ;梯度稀释后取适当梯度菌悬液 100 μ L均匀涂布于无菌MRS固体培养基,37°C培养48h,剔除无法生长的菌株;将在复筛培 养基A中长势良好的菌株接种于复筛培养基B (在MRS液体培养基基础上加入0. 3%的牛胆 盐,并用NaOH调节pH为8. 0,121°C高压蒸汽灭菌20min)中,37°C培养24h ;梯度稀释后取 适当梯度菌悬液100 μ L均匀涂布于无菌MRS固体培养基,37°C培养48h,剔除生长缓慢或无 法生长的菌株本文档来自技高网
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【技术保护点】
一株抗胃肠道胁迫的人源性嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)NCU402,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:CGMCC 11887。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:谢明勇熊涛宋苏华帅高平关倩倩
申请(专利权)人:南昌大学
类型:发明
国别省市:江西;36

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