提供了具有高含量的Abu、γ-Glu-Abu和/或γ-Glu-Abu-Gly的酵母和酵母提取物。通过修饰酵母以使得胞内乙酰乳酸合酶活性降低，获得了具有高含量的Abu、γ-Glu-Abu和/或γ-Glu-Abu-Gly的酵母。通过使用以此种方式获得的酵母作为原材料制备了酵母提取物。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及具有高含量的Abu、γ -Glu-Abu和/或γ -Glu-Abu-Gly的酵母和酵母提取 物。所述酵母和酵母提取物在例如调味料和保健食品的食品领域有用。
技术介绍
乙酰乳酸合酶已知为催化由两分子的丙酮酸生成乙酰乳酸和(：02的反应和由丙酮 酸和α-丁酮酸（α-ΚΒ)生成α-乙酰羟基丁酸和CO 2的反应的酶。已知/ZFi和/Z附为 编码酵母的乙酰乳酸合酶的基因，且iZFi和/Z附分别编码催化亚基和调节亚基。 已知若乙酰乳酸合酶从细菌中缺失，则α-ΚΒ在细胞中的蓄积量增加（非专利文 件1)。 还已知若抑制编码乙酰乳酸合酶的71_因，特别是对于啤酒酵母特征性的 _因在酿造酵母中的表达量，则连位二酮，特别是二乙酰二酮的生产量增加，其 中二酮起到产品的异味的作用（专利文件1)。 α -氨基丁酸（Abu)由a-KB通过氨基转移酶的作用生成。因此，通过增强参与 Abu的生物合成的酶的活性，例如α - 丁酮酸合成酶和氨基转移酶的活性，可增加 Abu或 γ -Glu-Abu在细胞中的蓄积量（专利文件2)。 但是，乙酰乳酸合酶活性和Abu、γ -Glu-Abu和/或γ -Glu-Abu-Gly在细胞中的 蓄积量之间的任何关系均是未知的。 现有技术参考 专利文件 专利文件1:日本专利公开（Kohyo)No. 2009-527218 专利文件 2: W02012/046731。 非专利文件 非专利文件 I: Bioessays, (3): I25-I3O (I987)0 专利技术概述 通过本专利技术实现的目的 本专利技术的目的是提供具有高含量的Abu、γ -Glu-Abu和/或γ -Glu-Abu-Gly的酵母和 酵母提取物。 实现所述目的的手段 本专利技术的专利技术人进行了各种研究以实现前述的目的。结果，他们发现通过降低酵母 中乙酰乳酸合酶的活性，其中酵母的Ct-丁酮酸合成酶和氨基转移酶的活性增强，Abu、 γ -Glu-Abu和γ -Glu-Abu-Gly在酵母细胞中的蓄积量增加，从而完成了本专利技术。 因而，可如下具体化本专利技术。 酵母，其具有高含量的α-氨基丁酸（Abu)-相关的化合物，其中酵母经修饰以使得胞 内乙酰乳酸合酶活性降低， 其中所述Abu-相关的化合物由选自Abu、γ-Glu-Abu和γ-Glu-Abu-Gly的一种或更 多种化合物组成。 根据所述的酵母，其经进一步修饰以使得选自α - 丁酮酸合成酶和氨基转移酶的 一种或更多种酶的活性增加。 根据所述的酵母，其中所述α-丁酮酸合成酶是由基因编码的酶。 根据所述的酵母，其中所述氨基转移酶是由似77基因编码的酶。 根据至中任一项所述的酵母，其经进一步修饰以使得γ-谷氨酰半胱氨酸合 成酶活性增加。 根据至中任一项所述的酵母，其为酵母菌属酵母yeast」或 假丝酵母菌属酵母yeast人 根据所述的酵母，其为酿酒酵母（/&^1^(3/'<9^^ 1?6>6106^6>1^6^(36>/)或产肮假丝酵母 {Candida 。 用于生产酵母提取物的方法，所述方法包括通过使用根据至中任一项所述的 酵母作为原材料来制备酵母提取物。 用于生产Abu-相关的化合物的方法，所述方法包括： 在培养基中培养根据至中任一项所述的酵母；和 从培养物中收集所述Abu-相关的化合物。 根据所述的方法，其中所述Abu-相关的化合物是γ-Glu-Abu和/或 γ-Glu-Abu-Gly0 附图简述图1是显示当将Μ007Υ株（亲株）和Μ013Υ株（/ZC启动子置换株）各自在 SD培养基中培养时观察到的/ZC mRNA表达量的图表。数据显示为/ZC mRNA的量与作为 内部标准的JiTV mRNA的量的比例。 图2是显示当将M007Y株（亲株）和M013Y株（/ZC启动子置换株）各 自在SD培养基中培养时观察到的Abu、γ-Glu-Abu和γ-Glu-Abu-Gly在细胞中的含量的 图表。数据显示为基于干燥细胞重量的化合物的含量（Mfflol/g-DCW)。在图表中，黑色部分 显示γ -Glu-Abu含量，斜线部分显示Abu含量，及灰色部分显示γ -Glu-Abu-Gly含量。 图3是显示当将Μ007Υ株、Μ013Υ株和Μ014Υ株（/ZFi破坏株）各自在含 有异亮氨酸和缬氨酸的SD培养基中培养时观察到的/ZC mRNA表达量的图表。数据显示 为/ZC mRNA的量与作为内部标准的M77 mRNA的量的比例。 图4是显示当将M007Y株、M013Y株和M014Y株（/ZFi破坏株）各自在含 有异亮氨酸和缬氨酸的SD培养基中培养时观察到的Abu、γ-Glu-Abu和γ-Glu-Abu-Gly 在细胞中的含量的图表。数据显示为基于干燥细胞重量的化合物的含量（Mm〇l/g-DCW)。 在图表中，黑色部分显示γ-Glu-Abu含量，斜线部分显示Abu含量，及灰色部分显示 γ -Glu-Abu-Gly 含量。 图5是显示当将Μ007Υ株、Μ013Υ株和Μ014Υ株（/ZFi破坏株）各自在含 有异亮氨酸和缬氨酸的SDTE培养基中培养时观察到的Abu、γ -Glu-Abu和γ -Glu-Abu-Gly 在细胞中的含量的图表。数据显示为基于干燥细胞重量的化合物的含量（Mm〇l/g-DCW)。 在图表中，黑色部分显示γ-Glu-Abu含量，斜线部分显示Abu含量，及灰色部分显示 γ -Glu-Abu-Gly 含量。 图6是显示当将Υ006Υ株（亲株）和Μ015Υ株（/ZFi破坏株）各自在含 有异亮氨酸和缬氨酸的SD培养基中培养时观察到的Abu、γ-Glu-Abu和γ-Glu-Abu-Gly 在细胞中的含量的图表。数据显示为基于干燥细胞重量的化合物的含量（Mm〇l/g-DCW)。 在图表中，黑色部分显示γ-Glu-Abu含量，斜线部分显示Abu含量，及灰色部分显示 γ -Glu-Abu-Gly 含量。 图7是显示当将Υ006Υ株（亲株）和Μ015Υ株（71?皮坏株）各自在含 有异亮氨酸和缬氨酸的SDTE培养基中培养时观察到的Abu、γ -Glu-Abu和γ -Glu-Abu-Gly 在细胞中的含量的图表。数据显示为基于干燥细胞重量的化合物的含量（Mm〇l/g-DCW)。 在图表中，黑色部分显示γ-Glu-Abu含量，斜线部分显示Abu含量，及灰色部分显示 γ -Glu-Abu-Gly 含量。 实施本专利技术的方式 以下将详细地解释本专利技术。 〈1>本专利技术的酵母 〈1-1>本专利技术的酵母 本专利技术的酵母是具有高含量的Ct-氨基丁酸（AbU)-相关的化合物的酵母，其中酵母经 修饰以使得胞内乙酰乳酸合酶活性降低。 在本专利技术中，"Abu-相关的化合物"指选自Abu、γ-Glu-Abu和γ-Glu-Abu-Gly的 化合物。在本专利技术中，Abu和Glu是L-异构体。 表述〃具有/含有高含量的Abu-相关的化合物〃意指当在培养基中培养本专利技术 的酵母时，所述酵母在其细胞中以使得所述化合物可被检测到的程度产生并蓄积Abu-相 关的化合物。本专利技术的酵母可为能够以比对于非修饰株观察到的更大的量在细胞中蓄积 Abu-相关的化合物的酵母。非修饰株的实例包括酵母的野生株和本文档来自技高网...
【技术保护点】
酵母，其具有高含量的α‑氨基丁酸(Abu)‑相关的化合物，所述酵母经修饰以使得胞内乙酰乳酸合酶活性降低， 其中所述Abu‑相关的化合物由选自Abu、γ‑Glu‑Abu和γ‑Glu‑Abu‑Gly的一种或更多种化合物组成。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：森田京，西内博章，
申请(专利权)人：味之素株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP
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