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一种可共用于阔叶薰衣草愈伤组织和不定芽诱导的培养基制造技术

技术编号:12913792 阅读:108 留言:0更新日期:2016-02-24 18:44
本发明专利技术公开了一种可共用于阔叶薰衣草愈伤组织和不定芽诱导的培养基,其组成是:MS培养基+6-BA1.5mg/l~2.5mg/l+NAA0.25mg/l~0.75mg/l+蔗糖20g/l~30g/l。该培养基既可以快速产生大量疏松愈伤组织,用于后续的植物细胞培养技术,也可以同时诱导产生不定芽,将芽剪切后,可用于阔叶薰衣草的后续组培扩繁,实现一种培养基达到两个目的,对实际应用具有指导意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术设及阔叶薰衣草培养
,尤其设及一种可共用于阔叶薰衣草愈伤组 织和不定芽诱导的培养基W及用该培养基诱导阔叶薰衣草和不定芽的诱导方法。
技术介绍
阔叶薰衣草化avan化IaIati化IiaVill)是唇形科薰衣草属植物,为多年生亚灌 木,有强烈芳香气味,原产地中海沿岸国(裴鉴,1979)。阔叶薰衣草主要用于精油的提取, 被广泛应用于医疗、化妆、洗涂和食品行业,常用作芳香剂、驱虫剂及配制香精的原料(张 俊等,2011)。阔叶薰衣草精油主要从其花、叶、茎等部分提取,不同产区、不同收获时间,精 油成份差异巨大,特别是主要精油成份如芳精醇、乙酸芳精醋等差异明显,造成精油品质不 稳定。因此,利用组织培养技术诱导阔叶薰衣草愈伤组织,进一步开展阔叶薰衣草植物细胞 培养技术,工厂化生产具有高含量很稳定含量的精油成份,具有重大的理论意义与市场前 景。 与大量栽培的狭叶薰衣草化avan化IaangustifoliaL.)不同,阔叶薰衣草种子 繁殖与杆插繁殖均比较困难,少见报道,利用组织培养的方法诱导不定芽,可为阔叶薰衣草 的栽培繁殖提供种苗材料。目前关于宽叶薰衣草不定芽的诱导尚未见报道。中国专利申请 号CN201210453289.3公开了一种羽叶薰衣草的壮苗生根培养基,所述的羽叶薰衣草的壮 苗生根培养基为:MS+喀晚醇0. 2~Img/L+薦糖30g/l,抑=5. 8。用本专利技术方法既能使羽 叶薰衣草生根多、生根快,还能使生根苗矮化进而苗壮,因而移栽也易成活。但是,在一般情 况下,植物诱导愈伤组织与诱导不定芽采用两种不同的培养基,培养基的配方往往有较大 差异,不能共用。
技术实现思路
有鉴于此,本专利技术提供了一种可共用于阔叶薰衣草愈伤组织和不定芽诱导的培养 基,解决了现有技术中阔叶薰衣草诱导愈伤组织与诱导不定芽需要采用两种不同的培养基 来培养的技术问题。 阳〇化]本专利技术采用的技术手段如下: 一种可共用于阔叶薰衣草愈伤组织和不定芽诱导的培养基,其组成是:MS培养基 +6-BA1. 5mg/l~2. 5mg/l+NAA0. 25mg/l~0. 75mg/l+ 薦糖 20g/l~30g/l。 优选地,所述6-BA为2. 5mg/l,所述NAA为0.5mg/l,所述薦糖为30g/l。 本专利技术还提供了一种可共用于阔叶薰衣草愈伤组织和不定芽诱导的培养基用于 诱导阔叶薰衣草和不定芽的诱导方法,包括如下步骤: 1)将阔叶薰衣草幼嫩茎段在洗衣粉水中浸洗IOmin~15min,用自来水冲洗 15min~20min,渐干,在洁净工作台上用酒精溶液浸泡,浸泡时间为IOs~15s; 2)随后将经过酒精浸泡后的阔叶薰衣草幼嫩茎段迅速转入含Tween-60的升隶溶 液中浸泡Smin~12min并不断晃动,然后用无菌水冲洗4~5次,将水吸干备用; 3)切取灭菌好的叶薰衣草幼嫩茎段直立接种到所述可共用于阔叶薰衣草愈伤组 织和不定芽诱导的培养基上,每茎段长为0. 8cm~1. 5cm,每茎段至少带1个芽; 4)将切好的叶薰衣草幼嫩茎段置于组培室里培养,培养条件为:溫度22°C~ 25°C、光照 12h/d、光强度为 1500 ~25001X。 优选地,在步骤1)中,所述酒精溶液的体积百分比浓度为72%,浸泡时间为15s。 优选地,在步骤2)中,所述含Tween-60的升隶溶液的体积百分比浓度为1%,浸泡 时间为Smin。 优选地,在步骤4)中,所述培养条件为:溫度25°C、光照12hAl、光强度为23001X。 采用本专利技术所提供的一种可共用于阔叶薰衣草愈伤组织和不定芽诱导的培养基, 即可W快速产生大量疏松愈伤组织,可用于后续的植物细胞培养技术,也可W同时诱导产 生不定芽,将芽剪切后,可用于阔叶薰衣草的后续组培扩繁,实现一种培养基达到两个目 的,对实际应用具有指导意义。【具体实施方式】W下对本专利技术的原理和特征进行描述,所举实施例只用于解释本专利技术,并非用于 限定本专利技术的范围。W下各实施例中愈伤组织诱导率、不定芽诱导率、平均每茎段芽分化数 的统计方法均采用常规方法进行。 阳〇1引 实施例1 一种可共用于阔叶薰衣草愈伤组织和不定芽诱导的培养基,其组成是:MS培养基 +6-BA1. 5mg/l+NAA0. 5mg/l+ 薦糖 25g/l。 该培养基用于诱导阔叶薰衣草和不定芽的诱导方法,包括如下步骤: 1)将阔叶薰衣草幼嫩茎段在洗衣粉水中浸洗lOmin,用自来水冲洗15min,渐干, 在洁净工作台上用体积百分比浓度为72%的酒精溶液浸泡,浸泡时间为10s。 2)随后将经过酒精浸泡后的阔叶薰衣草幼嫩茎段迅速转入含Tween-60的体积百 分比浓度为1 %的升隶溶液中浸泡IOmin并不断晃动,然后用无菌水冲洗4次,将水吸干备 用。 3)切取灭菌好的叶薰衣草幼嫩茎段直立接种到所述可共用于阔叶薰衣草愈伤组 织和不定芽诱导的培养基上,每茎段长1cm,每茎段至少带1个芽。 4)将切好的叶薰衣草幼嫩茎段置于组培室里培养,培养条件为:溫度23°C、光照 12h/d、光强度为 22001X。30天后统计愈伤组织诱导率73. 08%,不定芽诱导率为65. 38%,平均每茎段芽分 化数为1. 71,其中不定芽诱导率和平均每茎段芽分化数最高。 实施例2 一种可共用于阔叶薰衣草愈伤组织和不定芽诱导的培养基,其组成是:MS培养基 +6-BA2. 5mg/l+NAA0. 5mg/l+ 薦糖 30g/l。 该培养基用于诱导阔叶薰衣草和不定芽的诱导方法,包括如下步骤: 1)将阔叶薰衣草幼嫩茎段在洗衣粉水中浸洗llmin,用自来水冲洗16min,渐干, 在洁净工作台上用体积百分比浓度为72%的酒精溶液浸泡,浸泡时间为12s。 2)随后将经过酒精浸泡后的阔叶薰衣草幼嫩茎段迅速转入含Tween-60的体积百 分比浓度为I%的升隶溶液中浸泡8min并不断晃动,然后用无菌水冲洗5次,将水吸干备 用。 3)切取灭菌好的叶薰衣草幼嫩茎段直立接种到所述可共用于阔叶薰衣草愈伤组 织和不定芽诱导的培养基上,每茎段长1cm,每茎段至少带1个芽。 4)将切好的叶薰衣草幼嫩茎段置于组培室里培养,培养条件为:溫度25°C、光照 12h/d、光强度为 25001X。 30天后统计愈伤组织诱导率100%,不定芽诱导率为64. 0%,平均每茎段芽分化 数为1. 31,其中为愈伤组织诱导率最高。 实施例3 一种可共用于阔叶薰衣草愈伤组织和不定芽诱导的培养基,其组成是:MS培养基 +6-BA2. 5mg/l+NAA0. 75mg/l+ 薦糖 20g/l。 该培养基用于诱导阔叶薰衣草和不定芽的诱导方法,包括如下步骤: 1)将阔叶薰衣草幼嫩茎段在洗衣粉水中浸洗15min,用自来水冲洗20min,渐干, 在洁净工作台上用体积百分比浓度为72%的酒精溶液浸泡,浸泡时间为15s。 2)随后将经过酒精浸泡后的阔叶薰衣草幼嫩茎段迅速转入含Tween-60的体积百 分比浓度为1 %的升隶溶液中浸泡12min并不断晃动,然后用无菌水冲洗4次,将水吸干备 用。 3)切取灭菌好的叶薰衣草幼嫩茎段直立接种到所述可共用于阔叶薰衣草愈伤组 织和不定芽诱导的培养基上,每茎段长0. 8cm,每茎段至少带1个芽。 4)将切好的叶薰衣草幼本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种可共用于阔叶薰衣草愈伤组织和不定芽诱导的培养基,其特征在于,其组成是:MS培养基+6‑BA1.5mg/l~2.5mg/l+NAA0.25mg/l~0.75mg/l+蔗糖20g/l~30g/l。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:王健蔡文娟宋希强赵钟鑫黄雯君
申请(专利权)人:海南大学
类型:发明
国别省市:海南;66

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