一种治疗溃疡性结肠炎的药物及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种治疗溃疡性结肠炎的药物及其制备方法，其中，治疗溃疡性结肠炎的药物即牛初乳生长因子与益生菌联合使用。本发明专利技术以Balb/c小鼠为试验对象，建立溃疡性结肠炎模型，从试验小鼠的表观状态、体重变化、结肠长度、病理学状况等角度出发，研究本发明专利技术药物的抗溃疡性结肠炎作用；试验结果表明，本发明专利技术药物不仅具有良好的抗溃疡性结肠炎作用，而且短期内不会出现复发的症状，能够很好的修复溃疡性结肠炎肠黏膜损伤，可广泛应用于基础医学领域。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，即三株益生菌与牛初乳 生长因子联合使用的药物，属于医药

技术介绍
溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC)是炎症性肠病（inflammatory bowel disease，IBD)的一个主要类型，是一种原因不明的慢性非特异性肠道炎症。资料显示，每 年美国UC患病率为200/10万人，治疗UC的花费在1至1. 5亿美元左右，截止到2012年， UC患者总数是2000年的2. 5倍，且复发率达72% ;近年来我国UC的患病人数呈明显上升 趋势。 溃疡性结肠炎病变主要位于结肠粘膜和粘膜下层；临床表现为腹泻，黏液脓血便， 腹痛，里急后重等，多呈反复发作的慢性病程。溃疡性结肠炎的发生已经严重影响到患者的 身体健康和生活质量，被世界卫生组织列为现代难治病之一。溃疡性结肠炎的病因与发病 机制尚不十分清楚。多认为UC的病因可能与环境因素、遗传因素、免疫因素等有关；其中， 遗传及免疫因素在UC致病中起着至关重要的作用。UC发病机制虽还未完全阐明，但可以肯 定肠黏膜屏障功能失调参与了 UC的发生。肠黏膜屏障主要包括机械屏障、免疫屏障及生物 屏障。机械屏障由肠上皮细胞、肠黏液组成；免疫屏障（即肠道免疫防御系统），主要由分 泌性免疫球蛋白和肠相关淋巴组织构成；生物屏障由肠道正常菌群构成。肠道上皮屏障破 坏，黏膜通透性增加，肠组织长期暴露于大量抗原中，导致肠道免疫系统过度反应和错误识 另IJ，引起巨噬细胞和淋巴细胞的激活，释放一系列细胞因子和炎症介质，激活机体的免疫应 答，炎症反应逐级放大，最终导致组织损伤，出现UC的病理改变和临床表现。 目前治疗溃疡性结肠炎的方法主要包括药物治疗、营养治疗、心理治疗及手术治 疗，其中药物治疗是最主要的方法。在临床上用于治疗UC的药物主要有氨基水杨酸类药 物、肾上腺糖皮质激素类和免疫抑制剂类等。氨基水杨酸类药物能很好的抑制前列腺素合 成，清除氧自由基从而减轻炎症反应；然而其无法根治UC，且患者服药剂量偏大时，易产生 诸多不良反应（如：头疼、恶心、白细胞下降等）。糖皮质激素是重度或爆发性UC患者的首 选药；然而该类药物易导致机体代谢紊乱、水潴留等副作用，可作为应急药物，无法长期使 用。免疫抑制类药物药物依赖性大，治疗期较长，且可能致毒致癌，副作用较大，所以一般 只作为辅助治疗使用。总体来说，上述药物治疗见效快、疗效好，可缓解UC患者燃眉之苦， 但仍存在很多问题。首先，无法根治患者UC，治标不治本；其次，不良作用大，易引起患者头 疼、恶心，造成机体消化系统、血液系统异常；然后，潜在的致毒致癌性；最后，抗生素类药 物（如应用最广的SASP)易导致机体耐药抗药性。 牛初乳生长因子可通过与肠黏膜细胞酪氨酸激酶受体结合，从而促使肠黏膜细胞 生长和增殖，增加肠绒毛高度，促进肠道发育；并可通过调控炎性因子水平来促进机体免疫 力。益生菌可通过与有害菌竞争位点来调节肠道菌群平衡，而且植物乳杆菌可产生细菌素， 抑制有害菌的增殖；嗜酸乳杆菌具有很好的益生作用。因此，我们假设牛初乳生长因子联合 益生菌具有很好的抗溃疡性结肠炎用途。因此，开发一种高效、安全且副作用较小的安全的 治疗UC的药物，具有十分重要的现实意义。
技术实现思路
本专利技术的目的之一是提供一种治疗溃疡性结肠炎的药物，可以有效的治疗溃疡性 结肠炎，并且毒副作用较小，不易产生抗性。 本专利技术的另一个目的是提供一种治疗溃疡性结肠炎的药物的制备方法。 为了实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案： 一种治疗溃疡性结肠炎的药物，包括132~198体积份益生菌和432~684质量 份牛初乳生长因子，其中体积份/质量份=ml/mg。 优选地，上述治疗溃疡性结肠炎的药物，包括165体积份益生菌和540质量份牛初 乳生长因子。所述的牛初乳生长因子为从牛初乳中提取的生长因子粗提物。所述的益生菌 为嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌和瑞士乳杆菌；且均为活菌菌体形式。所述的益生菌活菌菌体是 由均处于稳定初期的乳杆菌液体培养物分别离心收集的菌泥。 优选地，所述的嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌和瑞士乳杆菌的数量比为1 : 1 : 1。 上述治疗溃疡性结肠炎的药物中，所述益生菌用量为I. 5X IOwCFlVkg,所述的牛 初乳生长因子用量为216~342mg/kg。即每千克的动物、人体等所用的药物中嗜酸乳杆菌、 植物乳杆菌和瑞士乳杆菌的总数量为I. 5 X IOwCFU,牛初乳生长因子用量为216~342mg， 具体地，可以根据实际情况进行计算，比如，一个重量为20g的大鼠，其用药中含有嗜酸乳 杆菌、植物乳杆菌和瑞士乳杆菌的总数量为3X IO8CFU,牛初乳生长因子用量为4. 32~ 6. 84mg ;-个重量为50kg的人，其用药中嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌和瑞士乳杆菌的总数量 为7. 5 X IO11CFU,牛初乳生长因子用量为10. 8~17. lg。 前述治疗溃疡性结肠炎的药物的制备方法，包括如下步骤： (1)分别将嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌和瑞士乳杆菌在MRS培养基培养； (2)分别选取培养14~18h的瑞士乳杆菌、培养12~16h的嗜酸乳杆菌和培养 12~16h的植物乳杆菌； (3)分别取步骤（2)得到的瑞士乳杆菌菌液77~115体积份，嗜酸乳杆菌菌液 40~60体积份，植物乳杆菌菌液15~23体积份，离心取菌泥，然后分别将它们溶于10体 积份无菌PBS中，得混合菌泥； (4)对牛初乳离心脱脂、酸沉酪蛋白、二次超滤、透析及冷冻干燥制得牛初乳生长 因子粗提物； (5)将牛初乳生长因子粗提物432~684质量份加入到上述混合菌泥中，搅拌均 匀，然后加入合适的辅料制成临床可接受的剂型。 优选地，治疗溃疡性结肠炎的药物的制备方法，包括如下步骤： (1)分别将嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌和瑞士乳杆菌在MRS培养基培养； (2)选取对数期末稳定期初的益生菌，即分别选取培养16h的瑞士乳杆菌、培养 14h的嗜酸乳杆菌和培养14h的植物乳杆菌； (3)分别取步骤（2)得到的瑞士乳杆菌菌液96体积份，嗜酸乳杆菌菌液50体积 份，植物乳杆菌菌液19体积份，离心取菌泥，然后分别将它们溶于10体积份无菌PBS中，得 混合菌泥； (4)对牛初乳离心脱脂、酸沉酪蛋白、二次超滤、透析及冷冻干燥制得牛初乳生长 因子粗提物； (5)将牛初乳生长因子粗提物540质量份加入到上述混合菌泥中，搅拌均勾，然后 加入合适的辅料制成临床可接受的剂型。 本专利技术的有益效果： 本专利技术以益生菌与牛初乳生长因子粗提取物制成的药物具有较好的抗溃疡性结 肠炎作用。具体表现在显著改善溃疡性结肠炎小鼠的表观状态，增加溃疡性结肠炎小鼠的 体重、结肠长度，并显著提高小鼠结肠组织的完整性。【附图说明】 图1为嗜酸乳杆菌镜检图片（100倍）； 图2为嗜酸乳杆菌菌落图； 图3为瑞士乳杆菌镜检图片（100倍）； 图4为瑞士乳杆菌菌落图； 图5为植物乳杆菌镜检图片（100倍）； 图6为植物乳杆菌菌落图； 图7为三株乳酸杆菌生长曲线； 图8为肠炎组小鼠表观状态； 图9为肠炎组小鼠表观状态特写； 图10为肠炎组小鼠解剖图； 图11为肠炎组小鼠结肠长度代表图； 图12为完全空白组小鼠结肠长度代表图； 图13为肠炎组小鼠 H本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗溃疡性结肠炎的药物，其特征在于，包括132～198体积份益生菌和432～684质量份牛初乳生长因子，其中体积份/质量份＝ml/mg。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：霍贵成，徐敏，王松，
申请(专利权)人：东北农业大学，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23