一种防治苹果树腐烂病的菌株，微生物菌剂及其制备方法，所述菌株61239已于2015年7月1日保藏于中国典型培养物保藏中心，其简称为CGTCC，保藏编号为CCTCC M2015420。本发明专利技术还包括含有防治苹果树腐烂病的球毛壳菌的微生物菌剂及其制备方法。本发明专利技术生防真菌来源于自然界中，无污染、无公害、无残留，对人畜无毒副作用，无论是对苹果树还是对人体、生态环境都相当的安全，可运用于苹果树的任何生育期，特别是休眠期，不产生任何抗性，可彻底控制和根治苹果腐烂病。实验证明，本发明专利技术之球毛壳菌株61239对苹果树腐烂病菌特异性强，控制效果好，平均防效在95％以上。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术设及一种菌株，微生物菌剂及其制备方法，具体设及一种防治苹果树腐烂 病的菌株，微生物菌剂及其制备方法。
技术介绍
苹果树腐烂病（Valsacankerofapple)为一区域性病害，主要发生在我国、日本 和朝鲜，在美国、加拿大、英国和俄罗斯等国零星分布。历史上我国先后有5次腐烂病大流 行，给各个时期的苹果产业造成了毁灭性打击。自20世纪50年代W来，先后采用保护性化 学杀菌剂全园喷洒，预防发病，W及对苹果树患病部位采取手术刮治、涂抹內吸治疗性杀菌 剂，杀菌治病的方法，均未能取得预期的效果。 近年来，苹果腐烂病的防治，仍W化学药剂为主要防治方式，但是由于苹果腐烂 病菌在树体内的潜伏侵染特性，使化学农药无法解决老瘤的复发问题，使得该病年复一年， 至今无法有效控制；同时，由于化学农药的药效期较短，使用次数和使用剂量在不断加大， 已对果品安全和环境安全构成了巨大的威胁，直接影响着我国在国际上的苹果贸易。因此， 采用生物防治无害化技术，生产高档优质绿色或有机果品，已日益成为人们追求的时尚。 目前，生物防治苹果腐烂病的方法主要包括中草药提取物防治、生防真菌防治和 利用农用抗生素防治。例如，段泽敏，王贤萍，周柏玲等.苹果树腐烂病无公害防治技术研 究，山西农业科学，2002, 30(4) : 55~59中公开茵陈、苦参和黄琴等多味中药用于腐烂 病的防治，但中药成分复杂，提取过程繁琐，生产成本高，因此，难W广泛应用。焦荣斌.防 治苹果腐烂病的新药一抗生素S- 921 ，河北农业科技，1988, 3:15中公开农用抗生素 S- 921对苹果腐烂病病斑有很好的治疗效果，但不能解决老瘤的复发问题。茹振川，王桂 荣，魏建梅等.木霉菌对苹果树腐烂病菌的抑制作用，河北果树，1999,4:12~13中利 用木霉作为生防菌防治苹果腐烂病，但受环境影响大，难W在田间长期定殖，而且至今未见 在苹果生产中应用。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是，提供一种防治苹果树腐烂病的微生物菌剂及其制 备方法。 本专利技术解决其技术问题采用的技术方案是，一种防治苹果树腐烂病的球毛壳菌 (化aetomiumglobosum)菌株61239,已于2015年7月1日保藏于中国典型培养物保藏中 屯、，其简称为CCTCC，保藏编号为CCTCCM2015420,保藏地址：中国武汉武汉大学，中国典型 培养物保藏中屯、，邮编：430072。 该菌株分离自陕西省白水县苹果园的苹果树翅皮中，该菌的分类地位为真菌界、 子囊菌口、粪壳菌纲、粪壳目、毛壳科、毛壳属，在CMA培养基上菌落呈灰白色，气生菌丝灰 白色。子囊果表生，球形或楠圆形，有孔口，顶生附属丝茂密，不分枝，直或弯曲，波浪状。子 囊棍棒状，簇生，含8个子囊抱子，具柄，易消解。子囊抱子褐色，巧樣形，厚壁，两侧平滑，两 端突起，大小为7. 5-8. 75X8. 75-12. 5μm，有一顶生萌发孔。经形态学特征、培养习性W及rDNA-ITS序列分析鉴定，菌株61239属于球毛壳菌Qiaetomiumglobosum。 本专利技术进一步解决其技术问题采用的技术方案是，一种防治苹果树腐烂病的微生 物菌剂，将球毛壳菌化aetomiumglobosum菌株61239经固体发酵得到发酵物，阴干或在 20~40°C烘干，粉碎，然后与湿润剂、发泡剂、分散剂和填料混合，制成可湿性菌剂，可兑水 喷雾，也可制成涂抹剂。 进一步，所述湿润剂为二异下基糞横酸钢，例如拉开粉bx;所述发泡剂为十二烧 基硫酸钢；所述分散剂为木质素横酸巧；所述填料为娃藻±。 本专利技术进一步解决其技术问题采用的技术方案是，一种防治苹果树腐烂病的微生 物菌剂的制备方法，包括W下步骤： (1) 一级种子培养：将权利要求1所述的球毛壳菌株61239斜面抱子接到已灭菌 好一级种子培养基中，在培养溫度32~36°C，通气量1 :0. 4~0.8v/v/min并揽拌的条件 下培养45~60虹； (2)二级种子培养：按接种量5~15%接入到灭菌好的二级种子培养基中，在培养 溫度32~36°C，通气量1 :0.8~1. 2v/v/min并揽拌的条件下培养20~30虹，得到二级种 子； (3)固体发酵培养：在灭菌后冷却至25~30°C的固体发酵培养基中按4~6% 比例接入二级种子，混合后放入固体发酵罐内培养，整个发酵过程分为Ξ个阶段，第一阶段 (0~2地）：0~1化静止培养，物料升溫后间断通风降溫使物料溫度控制在25~30°C;12~ 2地第一次翻曲，并将溫度控制在25°C~28°C;第二阶段（24~10化）：24~3化第二次翻 曲，并将溫度控制在26°C~27°C;之后每1化翻曲一次，并间隔一次补加无菌水lOOKg，将溫 度控制在25°C~27°C;第Ξ阶段（lOOhW后）：10化后不再补水，保持溫度控制在26°C~ 28°C，直至发酵结束，得到含有球毛壳菌株61239的发酵液； (4)微生物菌剂的制备：将发酵物阴干或在在20~40°C烘干，粉碎过90~120目， 然后与湿润剂、发泡剂、分散剂和填料混合，制成可湿性菌剂。 进一步，步骤（1)中，所述一级种子培养基是由500mlΞ角瓶加入50g大麦和40g 水，pH自然，揽拌均匀后，在121°C灭菌40min制成。 进一步，步骤（2)中，二级种子培养基是由5Kg大麦和4Kg水，拌匀后，在12rC灭 菌40min，冷却后接入50g-级种子，平均装入4个曲盘，置于28°C±1曲房中培养5天， 期间补加无菌水1~2次，每间隔1天翻曲一次制成。 进一步，步骤（3)中，所述固体发酵培养基是在6m3蒸煮锅内加入500Kg玉米粉和 500Kg过60目玉米賴杆粉，5KgKH2PO4和550Kg水，揽拌均匀后，直接蒸汽加热至m°C，保 溫40min后冷却至28°C制成。 本专利技术筛选的球毛壳菌株61239对苹果腐烂病菌具有显著的抑菌和杀菌活性，特 别是能W苹果树体上的老翅皮、各个剪银口处死组织上的纤维素和木质素为养分，长期定 殖存活于苹果树上，既能预防新病斑的产生，又能防止原有老瘤的复发，可持久地控制苹果 腐烂病菌，从而达到彻底控制和根治苹果腐烂病的目的。 本专利技术生防真菌来源于自然界中，无污染、无公害、无残留，对人畜无毒副作用，无 论是对苹果树还是对人体、生态环境都相当的安全，可运用于苹果树的任何生育期，特别是 休眠期，不产生任何抗性。 实验证明，本专利技术之球毛壳菌株61239对苹果树腐烂病菌特异性强，控制效果好， 平均防效在99. 34%。【附图说明】 图1为球毛壳61239对苹果树腐烂病菌的括抗效果。 图2为球毛壳61239对苹果树腐烂病菌的离体防治效果。 图3为涂抹球毛壳菌剂的腐烂病瘤处老翅皮保湿结果。【具体实施方式】 下面结合实施例对本专利技术进一步加W说明。实施例1:防治苹果树腐烂病的球毛壳菌的分离、纯化、鉴定 1、分离、纯化 分离自陕西省白水县苹果园的苹果树翅皮中。取苹果树翅皮干样5g，剪成1cm左 右小段，装入1000mlΞ角瓶中，向内加入特制消毒液10ml，振摇6-8min。再加入无菌水 600ml，吸取此悬浮液2ml涂布于马下培养基平面，倾去水液，用綴子夹出翅皮于无菌培养 皿中，剪成小段一并放入马下培养基平面，28°本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种防治苹果树腐烂病的球毛壳菌(Chaetomium globosum)菌株61239，其特征在于，所述菌株61239已于2015年7月1日保藏于中国典型培养物保藏中心，其简称为CGTCC，保藏编号为CCTCC M 2015420。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：郭云忠，朱明旗，孙广宇，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：陕西;61
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。