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含糖聚合物修饰纳米粒的制备方法技术

技术编号:12846366 阅读:51 留言:0更新日期:2016-02-11 13:09
含糖聚合物修饰纳米粒的制备方法属于药品技术领域,尤其涉及一种含糖聚合物修饰纳米粒的制备方法。本发明专利技术提供一种成功率高且环境友好的一种含糖聚合物修饰纳米粒的制备方法。含糖聚合物修饰纳米粒的制备方法,包括下步骤。(1)主要材料:N’N-二甲基甲酰胺(DMF)、乙酰丙酮,对氯甲基苯乙烯,异硫氰酸荧光素。(2)主要仪器:动态光散射粒径仪,倒置位相差显微镜,荧光显微镜,核磁共振波谱仪,CO2细胞培养箱。(3)乙酰丙酮(1)溶于DMF,在冰浴中分多次向溶液中加入NaCN。(4)采用PVG处理35mm聚苯乙烯培养皿表面,培养后观察细胞吸附情况。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药品
,尤其涉及一种。
技术介绍
纳米粒是药物传输系统(DrugDeliverySystem, DDS)中的重要载体,但注射入血管后,大部分会被网状内皮系统吞噬,这成为药物生物利用度低的主要原因之一。通过对纳米球进行修饰,不仅可增强其表面亲水性从而减少被RES的摄取,还可使其与特定细胞结合从而提高靶向生物利用度。含糖聚合物通常亲水性较好,且可被细胞膜表面大量存在的糖基受体识别而产生特异吸附,是用于修饰纳米粒、使其与细胞特异结合的良好生物相容性材料。葡萄糖是最简单的单糖,可被血液中红细胞表面大量存在的葡萄糖转运蛋白(GLUT)特异识别并吸收利用。利用这一特性,合成含有葡萄糖基的聚苯乙烯衍生物——聚,并以PVG修饰聚乳酸(PLA)纳米粒,通过红细胞吸附实验以及抑制吸附实验考察PVG与红细胞膜表面的GLUT发生的特异结合作用,以及PVG修饰的纳米粒与红细胞间的特异吸附作用。但现有的还存在缺陷,如成功率低、造成环境的污染,限制了制剂的产业化前景。
技术实现思路
本专利技术就是针对上述问题,提供一种成功率高且环境友好的一种。为了实现上述目的,本专利技术采用如下技术方案。,包括下步骤。(1)主要材料:N’N-二甲基甲酰胺(DMF)、乙酰丙酮,对氯甲基苯乙烯,异硫氰酸荧光素,细胞松弛素B,聚;DMEM培养基,EDTA胰酶,胎牛血清,其它试剂均为分析纯。(2)主要仪器:动态光散射粒径仪,倒置位相差显微镜,荧光显微镜,核磁共振波谱仪,C02细胞培养箱。(3)乙酰丙酮(1)溶于DMF,在冰浴中分多次向溶液中加入NaCN。冷却2h后,撤去冰浴,在50°C油浴条件下,滴加对氯甲基苯乙烯,使1与2通过置换反应脱去HC1生成单体I。将单体I溶于苯,在60° C下反应6h聚合,冷却后加入甲醇使聚合物完全沉淀后,冻干得到聚合物II。将聚合物II溶解于氘代三氟乙酸与水混合液中,室温下搅拌40min,置于半透膜中,以去离子水透析3天后,蒸发溶剂,冻干,得到PVG。(4)采用PVG处理35mm聚苯乙烯培养皿表面,培养后观察细胞吸附情况。表面处理过程如下:将2mlPVG水溶液加入培养皿中静置2h,吸出PVG溶液,用lmLPBS洗涤三次。实验中除了采用PVG处理的培养皿外,采用另一种含糖聚合物PVLA处理的培养皿以及未处理的培养皿作为对比。作为一种优选方案,取成年人血2mL,用10mL0.04%EDTA溶液稀释,离心得到红细胞,PBS洗涤三次后接种至上述培养皿中,置于细胞培养箱培养2h,吸除上层液体,使用等量PBS洗涤,用EDTA胰酶胰解,离心后计算吸附细胞数。计算细胞吸附率:细胞吸附率=细胞吸附数/接种细胞数X 100%。本专利技术有益效果。本专利技术通过对纳米球进行修饰,不仅可增强其表面亲水性从而减少被RES的摄取,还可使其与特定细胞结合从而提高靶向生物利用度。含糖聚合物通常亲水性较好,且可被细胞膜表面大量存在的糖基受体识别而产生特异吸附,是用于修饰纳米粒、使其与细胞特异结合的良好生物相容性材料。另外,本专利技术成功率高且环境友好。【具体实施方式】,包括下步骤。(1)主要材料:N’N-二甲基甲酰胺(DMF)、乙酰丙酮,对氯甲基苯乙烯,异硫氰酸荧光素,细胞松弛素B,聚;DMEM培养基,EDTA胰酶,胎牛血清,其它试剂均为分析纯。(2)主要仪器:动态光散射粒径仪,倒置位相差显微镜,荧光显微镜,核磁共振波谱仪,C02细胞培养箱。(3)乙酰丙酮(1)溶于DMF,在冰浴中分多次向溶液中加入NaCN。冷却2h后,撤去冰浴,在50°C油浴条件下,滴加对氯甲基苯乙烯,使1与2通过置换反应脱去HC1生成单体I。将单体I溶于苯,在60° C下反应6h聚合,冷却后加入甲醇使聚合物完全沉淀后,冻干得到聚合物II。将聚合物II溶解于氘代三氟乙酸与水混合液中,室温下搅拌40min,置于半透膜中,以去离子水透析3天后,蒸发溶剂,冻干,得到PVG。(4)采用PVG处理35mm聚苯乙烯培养皿表面,培养后观察细胞吸附情况。表面处理过程如下:将2mlPVG水溶液加入培养皿中静置2h,吸出PVG溶液,用lmLPBS洗涤三次。实验中除了采用PVG处理的培养皿外,采用另一种含糖聚合物PVLA处理的培养皿以及未处理的培养皿作为对比。作为一种优选方案,取成年人血2mL,用10mL0.04%EDTA溶液稀释,离心得到红细胞,PBS洗涤三次后接种至上述培养皿中,置于细胞培养箱培养2h,吸除上层液体,使用等量PBS洗涤,用EDTA胰酶胰解,离心后计算吸附细胞数。计算细胞吸附率:细胞吸附率=细胞吸附数/接种细胞数X 100%。葡萄糖是最简单的单糖,可被血液中红细胞表面大量存在的葡萄糖转运蛋白(GLUT)特异识别并吸收利用。利用这一特性,合成含有葡萄糖基的聚苯乙烯衍生物,并以PVG修饰聚乳酸(PLA)纳米粒,通过红细胞吸附实验以及抑制吸附实验考察PVG与红细胞膜表面的GLUT发生的特异结合作用,以及PVG修饰的纳米粒与红细胞间的特异吸附作用。【主权项】1.,其特征在于,包括下步骤; (1)主要材料:N’N- 二甲基甲酰胺(DMF)、乙酰丙酮,对氯甲基苯乙烯,异硫氰酸荧光素,细胞松弛素B,聚;DMEM培养基,EDTA胰酶,胎牛血清,其它试剂均为分析纯; (2)主要仪器:动态光散射粒径仪,倒置位相差显微镜,荧光显微镜,核磁共振波谱仪,C02细胞培养箱; (3)乙酰丙酮(1)溶于DMF,在冰浴中分多次向溶液中加入NaCN;冷却2h后,撤去冰浴,在50°C油浴条件下,滴加对氯甲基苯乙烯,使1与2通过置换反应脱去HC1生成单体I ;将单体I溶于苯,在60° C下反应6h聚合,冷却后加入甲醇使聚合物完全沉淀后,冻干得到聚合物II ;将聚合物II溶解于氘代三氟乙酸与水混合液中,室温下搅拌40min,置于半透膜中,以去离子水透析3天后,蒸发溶剂,冻干,得到PVG ; (4)采用PVG处理35mm聚苯乙烯培养皿表面,培养后观察细胞吸附情况;表面处理过程如下:将2mlPVG水溶液加入培养皿中静置2h,吸出PVG溶液,用lmLPBS洗涤三次;实验中除了采用PVG处理的培养皿外,采用另一种含糖聚合物PVLA处理的培养皿以及未处理的培养皿作为对比。2.根据权利要求1所述,其特征在于,取成年人血2mL,用10mL0.04%EDTA溶液稀释,离心得到红细胞,PBS洗涤三次后接种至上述培养皿中,置于细胞培养箱培养2h,吸除上层液体,使用等量PBS洗涤,用EDTA胰酶胰解,离心后计算吸附细胞数;计算细胞吸附率:细胞吸附率=细胞吸附数/接种细胞数X 100%。【专利摘要】属于药品
,尤其涉及一种。本专利技术提供一种成功率高且环境友好的一种。,包括下步骤。(1)主要材料:N’N-二甲基甲酰胺(DMF)、乙酰丙酮,对氯甲基苯乙烯,异硫氰酸荧光素。(2)主要仪器:动态光散射粒径仪,倒置位相差显微镜,荧光显微镜,核磁共振波谱仪,CO2细胞培养箱。(3)乙酰丙酮(1)溶于DMF,在冰浴中分多次向溶液中加入NaCN。(4)采用PVG处理35mm聚苯乙烯培养皿表面,培养后观察细胞吸附情况。【IPC分类】A61K47/34, A61K47/32, A61K9/14【公开号】CN105311639【申请号】CN2014本文档来自技高网
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【技术保护点】
含糖聚合物修饰纳米粒的制备方法,其特征在于,包括下步骤;(1)主要材料:N’N‑二甲基甲酰胺(DMF)、乙酰丙酮,对氯甲基苯乙烯,异硫氰酸荧光素,细胞松弛素B,聚;DMEM培养基,EDTA胰酶,胎牛血清,其它试剂均为分析纯;(2)主要仪器:动态光散射粒径仪,倒置位相差显微镜,荧光显微镜,核磁共振波谱仪,CO2细胞培养箱;(3)乙酰丙酮(1)溶于DMF,在冰浴中分多次向溶液中加入NaCN;冷却2h后,撤去冰浴,在50℃油浴条件下,滴加对氯甲基苯乙烯,使1与2通过置换反应脱去HCl生成单体I;将单体I溶于苯,在60°C下反应6h聚合,冷却后加入甲醇使聚合物完全沉淀后,冻干得到聚合物II;将聚合物II溶解于氘代三氟乙酸与水混合液中,室温下搅拌40min,置于半透膜中,以去离子水透析3天后,蒸发溶剂,冻干,得到PVG;(4)采用PVG处理35mm聚苯乙烯培养皿表面,培养后观察细胞吸附情况;表面处理过程如下:将2mlPVG水溶液加入培养皿中静置2h,吸出PVG溶液,用1mLPBS洗涤三次;实验中除了采用PVG处理的培养皿外,采用另一种含糖聚合物PVLA处理的培养皿以及未处理的培养皿作为对比。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:孙仁
申请(专利权)人:孙仁
类型:发明
国别省市:辽宁;21

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