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一种抗衰老的铁皮石斛干细胞中药组合物及其用途制造技术

技术编号:12808601 阅读:142 留言:0更新日期:2016-02-05 08:07
本发明专利技术医药生物领域,具体涉及一种抗衰老的铁皮石斛干细胞中药组合物及其用途。其由铁皮石斛干细胞干粉、女贞子、锁阳、红花和牛黄制成。更具体地说,所述组合物由30-60重量份的铁皮石斛干细胞干粉、1-10重量份的女贞子、1-10重量份的锁阳、1-10重量份的红花和1-10重量份的牛黄制成。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术医药生物领域,具体涉及一种抗衰老的铁皮石斛干细胞中药组合物及其用 途。
技术介绍
铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)为兰科(Orchidaceae)石 斛属多年生附生草本植物,又名黑节草。铁皮石斛经烘干加工而成的螺旋状体,称为"铁皮 楓斗"。铁皮石斛分布于我国西南和江南各省,多附生于阴湿的树干或岩石缝隙中。由于铁 皮石斛自然条件下繁殖率及成活率极低,生长周期长,野生的铁皮石斛已濒临灭绝。 植物干细胞又称为分生组织,是植物生长发育的源泉和信号调控中心。由于植物 干细胞是未分化的细胞,因此具有很强的自我更新和持续分裂能力,是拥有永久生存能力 的"不朽细胞";此外,植物干细胞还可以通过自我凋亡防止遗传性损伤,避免将有缺陷的 DNA遗传下去,从而保护植物不受恶劣环境的影响。 由植物细胞培养活性物质的生产与从植物直接提取的方法相比具有多种优点,前 者不受外部环境的影响,可持续性地生产,因此被认为是可解决生态系统破坏的较佳方法。 铁皮石斛干细胞含有较多的超氧化物歧化酶(S0D)、过氧化物酶(P0D)和过氧化氢酶(CAT) 等高活性酶;因此,铁皮石斛干细胞具有较强的抗氧化的作用,是一种纯天然、环保、无污染 的抗衰老植物干细胞。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供一种铁皮石斛干细胞中药组合物,其由铁皮石斛干细胞 干粉、女贞子、锁阳、红花和牛黄制成。更具体地说,所述组合物由30-60重量份的铁皮石斛 干细胞干粉、1_1〇重量份的女贞子、1_1〇重量份的锁阳、1_1〇重量份的红花和1 _1〇重量份 的牛黄制成。 在本专利技术的一个实施方案中,所述组合物由40-50重量份的铁皮石斛干细胞干 粉、3-7重量份的女贞子、2-5重量份的锁阳、2-7重量份的红花和1-3重量份的牛黄制成。 在优选的实施方案中,所述组合物由45重量份的铁皮石斛干细胞干粉、6重量份的女贞子、 3重量份的锁阳、4重量份的红花和2重量份的牛黄制成。 在本专利技术中,所述铁皮石斛干细胞干粉是通过以下方法制备的,具体步骤如下: 1)取切除根冠的铁皮石斛根尖,用水清洗3h后用浓度为75%酒精表面消毒15s, 无菌水冲洗4次;再用浓度1 %苯菌灵溶液消毒10min,无菌水冲洗4次,备用; 2)将步骤1得到的铁皮石斛根尖切成5mm小块,接种至筛选培养基上,培养温度为 25-29°C,避光培养5-10天,获得形成层来源的铁皮石斛干细胞;筛选培养基为含有0. 5mg/ L的6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、0. lmg/L的N-苯基-Ν' -1,2, 3-噻二唑-5-脲(TDZ)和 0· 05mg/L的三十烷醇的Β5培养基,pH值为6. 7。 3)将形成层来源的铁皮石斛干细胞转移至液态培养基中培养;液态培养基为含 有0. lmg/L的6-BA、15mg/L的蔗糖、0. 5mg/L的甲基茉莉酮酸酯和0. lmg/L的三十烷醇的 B5培养基,pH值为6. 2,培养3天。 4)将步骤3培养收集的形成层来源的铁皮石斛干细胞移入10L气升式生物反应器 内扩大培养,培养液使用步骤3的液态培养液,在25°C下不断搅拌;培养5天后,通过1 μπι 过滤器过滤,将截留的细胞系培养物取出,收获铁皮石斛干细胞;对培养得到的铁皮石斛干 细胞低温冷冻3小时后进行超声破碎、冻干得铁皮石斛干细胞干粉。 本专利技术的另一个目的是提供所述铁皮石斛干细胞中药组合物的制备方法,具体如 下: 1)将牛黄磨成细粉备用; 2)将红花、女贞子和锁阳加8倍量水进行加热提取,90°C提取1. 5小时,提取三次, 合并滤液,向滤液中加无水乙醇至滤液中乙醇浓度为70% ;过夜沉淀,滤过,减压回收溶剂, 真空干燥,磨成细粉,加入铁皮石斛干细胞干粉和牛黄细粉,混匀即得。 本专利技术的另一个目的是提供所述铁皮石斛干细胞中药组合物的口服制剂,其由所 述中药组合物和药学上可接受的辅料制备而成。药学上可接受的辅料包括稀释剂、润滑剂、 粘合剂、崩解剂、稳定剂、溶剂和生物可降解聚合物等。 本专利技术所述稀释剂包括但不限于淀粉、微晶纤维素、蔗糖、糊精、乳糖、糖粉、葡萄 糖等;所述润滑剂包括但不限于硬脂酸镁、硬脂酸、氯化钠、油酸钠、月桂醇硫酸钠、泊洛沙 母等;所述粘合剂包括但不限于水、乙醇、淀粉浆、糖浆、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素 钠、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮等;所述崩解剂包括但不限于淀粉泡腾混合物即碳酸氢钠和 枸橼酸、酒石酸、低取代羟丙基纤维素等;所述稳定剂包括但不限于多糖如金合欢胶、琼脂、 藻酸、纤维素醚和羧甲基甲壳酯等;所述溶剂包括但不限于水、平衡的盐溶液等。生物可 降解聚合物包括但不限于聚乳酸、聚乳酸羟基乙酸、聚丙交酯-乙交酯、聚羟基乙酸、聚磷 腈、聚氰基丙烯酸酯、聚酰胺中的一种或任意混合物,优选聚乳酸、聚乳酸羟基乙酸、聚丙交 酯-乙交酯中的一种或任意混合物。【具体实施方式】 下面将进一步的详细说明本专利技术。需要指出的是,以下说明仅仅是对本专利技术要求 保护的技术方案的举例说明,并非对这些技术方案的任何限制。本专利技术的保护范围以所附 权利要求书记载的内容为准。 实施例1铁皮石斛干细胞的培养 1)取切除根冠的铁皮石斛根尖,用水清洗3h后用浓度为75%酒精表面消毒15s, 无菌水冲洗4次;再用浓度1 %苯菌灵溶液消毒lOmin,无菌水冲洗4次,备用; 2)将步骤1得到的铁皮石斛根尖切成5mm小块,接种至筛选培养基上,培养温度为 25-29°C,避光培养5-10天,获得形成层来源的铁皮石斛干细胞;筛选培养基为含有0. 5mg/ L的6-ΒΑ、0· lmg/L的TDZ和0· 05mg/L的三十烷醇的B5培养基,pH值为6. 7。 3)将形成层来源的铁皮石斛干细胞转移至液态培养基中培养;液态培养基为含 有0. lmg/L的6-BA、15mg/L的蔗糖、0. 5mg/L的甲基茉莉酮酸酯和0. lmg/L的三十烷醇的 B5培养基,pH值为6. 2,培养3天。 4)将步骤3培养收集的形成层来源的铁皮石斛干细胞移入10L气升式生物反应器 内扩大培养,培养液使用步骤3的液态培养液,在25°C下不断搅拌;培养5天后,通过1 μπι 过滤器过滤,将截留的细胞系培养物取出,收获铁皮石斛干细胞。 实施例2不同培养基条件下铁皮石斛干细胞得率考察 按照实施例1的方法,取等量的铁皮石斛根尖进行干细胞培养,区别仅在于采用 不同的筛选培养基和液态培养基,具体如下: 对培养得到的铁皮石斛干细胞低温冷冻3小时后进行超声破碎、冻干得铁皮石斛 干细胞干粉,称取每次获得干粉重量,每组平行实验5次,取平均值,具体结果如下: 实施例3不同培养基条件下铁皮石斛干细胞抗氧化活性考察 取人真皮成纤维细胞(HDF)进行培养,当人真皮成纤维细胞生长至80%融当前第1页1 2 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种铁皮石斛干细胞中药组合物,其由铁皮石斛干细胞干粉、女贞子、锁阳、红花和牛黄制成。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:韩晓菲张旭
申请(专利权)人:大连大学
类型:发明
国别省市:辽宁;21

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