一株具有陈酿风格的酿酒酵母及其在葡萄酒酿造中的应用制造技术

本发明专利技术涉及微生物技术领域，具体涉及一种具有陈酿风格的酿酒酵母及其在葡萄酒酿造中的应用。为了逐渐改变我国葡萄酿酒酵母长期依赖进口的被动局面，解决国产葡萄酒质量的同质化问题，提供一种具有陈酿风格的酿酒酵母及其在葡萄酒酿造中的应用。酿酒酵母NX11424，保藏于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”，保藏编号为CGMCC NO.10050，其具有优秀的颜色和香气浸提能力，能充分挖掘和展现葡萄品种本真的典型特征，能赋予葡萄酒更为完美的骨架感和结构感，在酒精发酵后即让葡萄新酒呈现出独特的烘焙、烧烤及咖啡等陈酿特征，此外，酿酒酵母NX11424所酿造的干红葡萄酒非常适合橡木桶陈酿，并表现出较明显的陈酿潜力，是一株非常优秀的具有陈酿风格的干红葡萄酒酿酒酵母。

【技术实现步骤摘要】
【专利说明】-株具有陈酿风格的酿酒醒母及其在葡萄酒酿造中的应用 -、
： 本专利技术设及微生物
，具体设及一种具有陈酿风格的酿酒酵母及其在葡萄 酒酿造中的应用。 二、
技术介绍
： 葡萄酒是世界上仅次于啤酒的第二大酒精饮料，在世界区域经济和国际贸易中占 有重要比重。近年来，我国葡萄酒产业W每年15-20%的速度递增，但其质量与国际先进水 平还存在着较大差距。在影响葡萄酒质量的诸多因素中，除了生态条件、葡萄品种、W及工 艺设备外，发酵微生物对葡萄酒的质量和感官风格起着决定性作用。 葡萄酒酿造实质上就是在微生物作用下所进行的生物发酵过程，酵母菌是葡萄酒 酿造中起最主要作用的微生物。然而，目前我国葡萄酒厂发酵所用的酵母几乎全部进口国 外选育的葡萄酒商业酵母，再加上各地酿酒的葡萄品种大多集中于少数几个广适性品种， 如赤霞珠、品丽珠、霞多丽、雷司令等，其栽培管理和酿酒工艺、酿酒设备均十分相似，酒种 单一，造成我国葡萄酒质量同质化现象日趋严重！运种情形若不尽快改变，就有可能对我 国蓬勃发展的葡萄酒产业造成无可挽回的不良影响，使我国葡萄酒产业彻底丧失国际竞争 力！ -般而言，工业生产区比传统生产区的酵母多样性明显减少 (Ganga&Martines，2004);商业酵母与本地自然发酵酵母进行竞争，而且很多商业酵母带 有嗜杀活性（Rogeretal，2001)，连续和长期使用单一商业酵母菌株发酵，会降低酵母 的多样性和本上酵母作用的重要性（Gangaetal, 2004;Blancoetal, 2008)，使接种酵 母取代本±酵母成为酒厂表面及环境的优势菌种而完成自然发酵，从而影响酒厂通过自 然发酵选育酵母菌的有效性（Cianietal，2004;Mercadoetal，2007)。使用进口商 业酵母，会导致决定特定生态条件下葡萄酒香气特征的物质丧失（Mendesetal，2001; Romanoetal, 2003)，使葡萄酒缺乏典型性和风格值iMaroetal, 2007)。国外也发现， 从本±酵母中选出的优良菌系的发酵性能明显优于从国外引进的商业酵母化opeset al, 200化opandic)。用进口商业酵母进行接种发酵，使我国葡萄酒工业每年需花费外汇高 达500万美金，而且随着葡萄酒产量的增加还会进一步加大。换句话说，中国葡萄酒行业的 发展，由于缺乏自主知识产权的酿酒酵母，一直都在为国外支付巨额学费！因此，发掘中国 产区特色葡萄酿酒酵母菌资源，为我国葡萄酒自然发酵及酵母选育种提供物种资源储备， 逐渐改变我国葡萄酿酒酵母长期依赖进口的被动局面，为改变国产葡萄酒质量的同质化， 提高我国葡萄酒国际竞争力奠定基础。 H、
技术实现思路
本专利技术的目的为了逐渐改变我国葡萄酿酒酵母长期依赖进口的被动局面，解决国 产葡萄酒质量的同质化问题，提供一种具有陈酿风格的酿酒酵母及其在葡萄酒酿造中的应 用。 为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案为：一株酿酒酵母NX11424,保藏于"中 国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中屯、"，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院 3号，保藏日期：2014年11月25日，保藏编号为CGMCCNO. 10050,分类命名：酿酒酵母 Saccharomycescerevisiae。 所述的酿酒酵母NX11424,其特征在于：从宁夏广夏S基地葡萄园的赤霞珠葡萄 自然发酵后期，经筛选、分离而为的纯培养物。 所述的酿酒酵母NXl1424在红葡萄酒酿造中的应用。 与现有技术相比，本专利技术具有如下优点和效果： 本专利技术的酿酒酵母版11424(保藏于"中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生 物中屯、"，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2014年11月25日，保藏编 号为CGMCCNO. 10050,分类命名：酿酒酵母Saccharomycescerevisiae)具有优秀的颜色 和香气浸提能力，能充分挖掘和展现葡萄品种本真的典型特征，能赋予葡萄酒更为完美的 骨架感和结构感，在酒精发酵后即让葡萄新酒呈现出独特的烘赔、烧烤及咖啡等陈酿特征。 此外，酿酒酵母NX11424所酿造的干红葡萄酒非常适合橡木桶陈酿，并表现出较明显的陈 酿潜力，是一株非常优秀的具有陈酿风格的干红葡萄酒酿酒酵母。 四、【附图说明】：[001。 图1为酿酒酵母NXl1424在Yro培养基上的菌落特征； 图2干红发酵工艺流程简图； 五、【具体实施方式】 下述实施例中的模拟葡萄汁培养基配方如下： 表1模拟葡萄汁及其配制 下述实施例中YEPD培养基配方如下：[001引蛋白腺2.0%，酵母浸粉1.0%，葡萄糖2.0% (自然抑值，121°C灭菌20min，可加 入lOOmg/L氯霉素W抑制细菌生长，固体培养基添加琼脂2. 0% )。 下述实施例中WLN培养基配方如下： 蛋白腺0. 5 %，酵母浸粉0. 4 %，葡萄糖5. 0 %，琼脂2. 0 % ;储液A: 40血/1，储液 B: 1血/1，储液C: 1血/1，调抑值至6. 2。无机盐类储液配置：储液A(憐酸二氨钟0. 0550 %， 氯化钟0. 0425 %，氯化巧0. 0125 %，硫酸儀0. 0125 %，高压灭菌后4°C保存）；储液B(氯 化铁0. 0025%，硫酸儘0. 00025%，高压灭菌后4°C保存）；储液C(漠甲酪绿22mg/L，溶于 50%酒精，配制溶液所用器皿和双蒸水都需经i2rc高压灭菌）。配制培养基时在无菌操作 台内，按比例加入储液A和储液B及其他培养基组分，加双蒸水至目标体积，调节抑至6. 2。 12rC灭菌20min后冷却至65°C加入储液C，混合均匀，制备平板（每板15mL~20mL)。 下述实施例的对照菌株均为法国LAFFORT公司生产的商业活性干酵母幻mafIora F15(W下均简写作F15) 实施例I、酿酒酵母NXl1424 (保藏于"中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生 物中屯、"，保藏编号为CGMCCNO. 10050)的分离、纯化及其鉴定 采摘宁夏广夏S基地葡萄园赤霞珠葡萄，在自然发酵过程中取发酵液，在ImL发 酵液样品中加入9mL无菌水进行梯度稀释，涂布WLN固体培养基平板，在溫度为28 °C下培养 5山根据酿酒酵母在WLN培养基上的菌落特征（参照图1):选择表面光滑奶油色，中央锥形 突起，四周有暗黄色或浅绿色环，不透明，奶油状的单菌落，挑取酿酒酵母单菌落进一步在 WLN培养基上划线纯化，然后在纯化后WLN培养基上挑取酿酒酵母单菌落转接入YEPD液体 培养基中，在溫度为28°C下培养2d后，将酿酒酵母菌株采用甘油冷冻法保藏备用。同时，用 接种环将YEPD培养液在YEPD固体培养基上划线，28 °C下培养3d后，提取酵母菌落DNA，对 rRNA基因的26SD1/D2区进行聚合酶链式反应（PCR)扩增，对PCR扩增产物（即rRNA基因 的26SD1/D2区）进行测序，测序结果与NCBI上的Nucleotidecollection(nr/nt)数据 库进行序列比对，鉴定为酿酒酵母菌株，得到酿酒酵母菌株。将保藏备用的酿酒酵母菌株进 行活化后接入模拟葡萄汁中，筛选出能够快速、彻底完成发酵的酿酒酵母。将经过模拟葡萄 汁筛选后的酿本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株酿酒酵母NX11424，保藏于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2014年11月25日，保藏编号为CGMCC NO.10050，分类命名：酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘延琳，秦义，宋育阳，孙悦，刘宁，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：陕西;61