人PLIN1基因rs894160位点多态性检测方法及试剂盒技术

人PLIN1基因rs894160位点多态性检测方法及试剂盒。该方法，包括：提供待测人基因组DNA；提供扩增人PLIN1基因rs894160位点附近序列的上游引物和下游引物，其中下游引物具有错配碱基G；以所述待测人基因组DNA为模板，利用上游引物和下游引物进行PCR扩增反应以获得含ARGCTT片段或者RGCT片段的扩增产物，其中R为人PLIN1基因rs894160位点上的待定碱基A或G；提供限制性内切酶；利用限制性内切酶对所得扩增产物进行酶切以获得相应的酶切产物；以及根据所得酶切产物来确定人PLIN1基因rs894160位点上的待定碱基R是A还是G。限制性内切酶为能够切开AAGCTT片段与AGGCTT片段之一，或者AGCT片段与GGCT片段之一的限制性内切酶。本发明专利技术的测定手段不但快速可靠，而且测定成本大大降低。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及测定单核苷酸多态性的方法。
技术介绍
SNP(单核苷酸多态性)是指单个核苷酸的改变引起的DNA序列变异，包括单碱基的置换、插入和缺失等形式。基因多态性是个体与生俱来的遗传特征，不随环境发生变化，也不是某种疾病特异或者非特异的临床表现，因此其应用并不存在诊断和治疗作用。基因多态性检测在遗传学领域和医学领域中应用广泛，举例如下：1.研究物种起源和进化等遗传学现象。根据基因变异情况，获得生物大分子的信息，推断生物进化历史，阐明物种进化关系。应用于考古学中以确定古人类遗传变异特征以及不同种群的亲缘关系。2.研究多态与种群亲缘关系等遗传学研究。多态亦与各种人体特征密切相关，包括身高、体重、肤色、相貌特征等等。3.在预防医学领域可以用于疾病预防措施。通过研究人体对毒物的耐受性，发现易于对某种毒物发生毒性作用的个体，及时避免该个体与毒物接触，保护该易感人群。例如，对准备从事接触苯等有机溶剂的人群进行多态检测，筛查出容易出现血液毒性、神经毒性等反应的个体，令本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定人PLIN1基因rs894160位点多态性的方法，包括：提供待测人基因组DNA；提供扩增人PLIN1基因rs894160位点附近序列的上游引物和下游引物，其中下游引物具有错配碱基G；以所述待测人基因组DNA为模板，利用上游引物和下游引物进行PCR扩增反应以获得含ARGCTT片段或者RGCT片段的扩增产物，其中R为人PLIN1基因rs894160位点上的待定碱基A或G；提供限制性内切酶；利用限制性内切酶对所得扩增产物进行酶切以获得相应的酶切产物；以及根据所得酶切产物来确定人PLIN1基因rs894160位点上的待定碱基R是A还是G，其中，限制性内切酶为能够切开AAGCTT片段与AGGCT...

【技术特征摘要】
1.一种测定人PLIN1基因rs894160位点多态性的方法，包括：
提供待测人基因组DNA；
提供扩增人PLIN1基因rs894160位点附近序列的上游引物和下
游引物，其中下游引物具有错配碱基G；
以所述待测人基因组DNA为模板，利用上游引物和下游引物进行
PCR扩增反应以获得含ARGCTT片段或者RGCT片段的扩增产物，其中
R为人PLIN1基因rs894160位点上的待定碱基A或G；
提供限制性内切酶；
利用限制性内切酶对所得扩增产物进行酶切以获得相应的酶切
产物；
以及根据所得酶切产物来确定人PLIN1基因rs894160位点上的
待定碱基R是A还是G，
其中，限制性内切酶为能够切开AAGCTT片段与AGGCTT片段之一，
或者AGCT片段与GGCT片段之一的限制性内切酶。
2.根据权利要求1所述的方法，其中在所得扩增产物上，下游
引物的错配碱基G与R的配对碱基之间相隔一个碱基C。
3.根据权利要求2所述的方法，其中在所得扩增产物上，下游
引物末端碱基与R的配对碱基相邻。
4.根据权利要求1所述的方法，其中限制性内切酶为能切开
AAGCTT片段的HindⅢ或其同裂酶。
5.根据权利要求1所述的方法，其中限制性内切酶为能切开
AGCT片段的AluI或其同裂酶。
6.根据权利要求1所述的方法，其中所得酶切产物包括三种片
段类型：具有总片段长度的未切断扩增产物、切断后具...

【专利技术属性】
技术研发人员：施学忠，杨永利，张猛，薛源，程志伟，慧晓庆，段晓冉，冯晓蕾，姚武，王威，
申请(专利权)人：郑州大学，
类型：发明
国别省市：河南;41