融合核酸和融合蛋白及检测继发胶质母细胞瘤的试剂盒制造技术

本发明专利技术提供了一种特异性地出现在继发胶质母细胞瘤中的融合蛋白和编码如上所述的融合蛋白的融合核酸。本发明专利技术还提供了一种检测继发胶质母细胞瘤的试剂盒。通过上述技术方案，本发明专利技术有效地提高了区分继发性胶质母细胞瘤和原发性胶质母细胞瘤上的准确性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，具体地，涉及一种融合蛋白、一种编码该融合蛋白的融 合核酸W及一种检测继发胶质母细胞瘤的试剂盒。
技术介绍
胶质母细胞瘤是星形细胞肿瘤中恶性程度最高的胶质瘤。该肿瘤位于皮质下，多 数生长于幕上大脑半球的各处。呈浸润性生长，常侵犯几个脑叶，并侵犯深部结构，还可经 脱脈体波及对侧大脑半球。发生部位W额叶最多见，其他依次为顯叶、顶叶，少数可见于枕 叶/丘脑和基底节等。胶质母细胞瘤生长速度快、病程短，70-80%患者病程在3-6个月，病程超过1年者 仅10%。个别病例因肿瘤出血，可呈卒中样发病，由于肿瘤生长迅速，脑水肿广泛烦内压增 高症状明显，几乎全部患者都有头痛、呕吐、视盘水肿有头痛、精神改变、肢体无力、呕吐、意 识障碍与言语障碍。肿瘤浸润性破坏脑组织，造成一系列的局灶症状，患者有不同程度的偏 痛、偏身感觉障碍失语和偏盲等。神经系统检查可发现偏痛、脑神经损害、偏身感觉障碍与 偏盲。约33%的患者有癒痛发作，约20%的患者表现淡漠、痴呆、智力减退等精神症状。胶质母细胞瘤可分为由低级别星形细胞瘤发展而来的继发性胶质母细胞瘤(secondaryglioblastoma)和不表现低度病变恶性前期的原发性胶质母细胞瘤（primary glioblastoma)两类，而在组织学上很难区分继发性胶质母细胞瘤和原发性胶质母细胞瘤。 目前，已经发现异巧樣酸脱氨酶（IsocitrateDehy化ogenase,IDH)的突变只在继发性胶质 母细胞瘤中，但仍然有一部分继发性胶质母细胞瘤中并不发生异巧樣酸脱氨酶的突变。因此，现有的检测技术在区分继发性胶质母细胞瘤和原发性胶质母细胞瘤上的准 确性仍然有待提高。
技术实现思路
为了进一步提高区分继发性胶质母细胞瘤和原发性胶质母细胞瘤上的准确性，本 专利技术提供了一种融合蛋白、一种编码该融合蛋白的融合核酸、一种核酸、一种引物对W及一 种检测继发胶质母细胞瘤的试剂盒。本专利技术的专利技术人出乎意料地发现，本专利技术所述的融合蛋白在继发性胶质母细胞瘤 中的出现具有较高的特异性，由此得到了本专利技术。-方面，本专利技术提供了 一种融合蛋白，其中，该融合蛋白在N末端至C末端方向上 由第一蛋白片段和第二蛋白片段连接而成，所述第一蛋白片段如SEQIDN0:l、2、3或4所 示，所述第二蛋白片段如SEQIDN0:5或6所示。另一方面，本专利技术还提供了一种融合核酸，其中，该融合核酸编码如上所述的融合 蛋白。 另一方面，本专利技术还提供了一种核酸，其中，该核酸的序列中含有如SEQID NO: 13、14、15或16所示的序列，并且该核酸为对应的融合核酸的片段，所述融合核酸在5' 至3'方向上由第一核酸片段和第二核酸片段连接而成，所述第一核酸片段如SEQIDN0:7、 8、9或10所示，所述第二核酸片段如SEQIDNO: 11或12所示。 另一方面，本专利技术还提供了一种引物对，其中，该引物对含有如SEQIDN0:17所示 的第一引物和如SEQIDNO: 18所示的第二引物。 再一方面，本专利技术还提供了一种检测继发胶质母细胞瘤的试剂盒，其中，该试剂盒 包括能够特异性地扩增如上所述的融合核酸或如上所述的核酸的引物对，和/或，该试剂 盒包括抗如上所述的融合蛋白的抗体W及如上所述的融合蛋白。 本专利技术还可W提供一种检测继发胶质母细胞瘤的方法，该方法包括检测待测胶质 母细胞瘤样本中如上所述的融合蛋白和/或融合核酸的含量的步骤，如果待测胶质母细胞 瘤样本中如上所述的融合蛋白和/或融合核酸的含量高于对照样本，则指示该待测胶质母 细胞瘤样本为继发胶质母细胞瘤。 本专利技术还提供了一种分子试剂在制备检测继发胶质母细胞瘤的试剂盒中的用途， 其中，该分子试剂包括如下（1) - (5)中的至少一种；（1)抗如上所述的融合蛋白的抗体；（2) 如上所述的融合蛋白；（3)如上所述的融合核酸；（4)如上所述的核酸；（5)能够特异性地 扩增如上所述的融合核酸或如上所述的核酸的引物对。 通过上述技术方案，本专利技术有效地提高了区分继发性胶质母细胞瘤和原发性胶质 母细胞瘤上的准确性。 本专利技术的其他特征和优点将在随后的【具体实施方式】部分予W详细说明。【附图说明】 附图是用来提供对本专利技术的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与下面的具 体实施方式一起用于解释本专利技术，但并不构成对本专利技术的限制。在附图中： 图1是融合蛋白由PTPRZ1蛋白的片段和MET蛋白的片段连接而成的结构示意图。【具体实施方式】W下结合附图对本专利技术的【具体实施方式】进行详细说明。应当理解的是，此处所描 述的【具体实施方式】仅用于说明和解释本专利技术，并不用于限制本专利技术。 在本专利技术中，在未作相反说明的情况下，使用的术语"核酸"可W是脱氧核糖核酸， 也可W是核糖核酸；"核酸"可W是单链的核酸，也可W是双链的核酸；"核酸"的序列是指 其碱基的序列；"核酸"可W具有本领域已知的修饰，只要该修饰不改变"核酸"的碱基配对 即可。 一方面，本专利技术提供了一种融合蛋白，其中，该融合蛋白在N末端至C末端方向上 由第一蛋白片段和第二蛋白片段连接而成，所述第一蛋白片段如SEQIDN0:l、2、3或4所 示，所述第二蛋白片段如SEQIDN0:5或6所示。 其中，沈QIDNO: 1的序列为MRILKR化ACI化LCVC化DK化I，是来自人PTPRZ1基因 (NCBIGeneID为5803)的第一外显子和内含子序列编码的蛋白序列。其中，沈QIDN0:2 的序列为MRILKRFLACI化LCVCRLDWANGYYRQQ服LVEEIGWSYTDKP LI，是来自人PTPRZ1基因的第二外显子和内含子序列编码的蛋白序列。其中，沈QIDN0:3 的序列为MRILKR化ACI化LCVCRLDWANGYYRQQ服LVEEIGWSYTGAL NQKNWGKKYPTCNSPKQSPINID邸LTQVNVNLKKLKFQGWDKTSLENTFIHNTGKTDKPLI，是来自人PTPRZl基因的第Η外显子和内含子序列编码的蛋白序列。 同源异构体2蛋白序列的片段。 另一方面，本专利技术还提供了一种融合核酸，其中，该融合核酸编码如上所述的融合 蛋白。 其中，编码如上所述的融合蛋白的融合核酸的序列可W根据氨基酸密码子对照表 解码得到，由于密码子简并性的存在，编码同一氨基酸序列的融合蛋白的多个融合核酸的 序列可W彼此不同。 其中，优选地，该融合核酸在5'至3'方向上由第一核酸片段和第二核酸片段连接 而成，所述第一核酸片段如SEQIDN0:7、8、9或10所示，所述第二核酸片段如SEQIDN0:11 或12所示。 显子和内含子序列，编码如SEQIDN0:4所示的蛋白。 其中，SEQIDNO: 11的序列是来自人MET基因的片段，编码如SEQIDN0:5所示 的蛋白。 其中，SEQIDNO: 12的序列是来自人MET基因的片段，编码如SEQIDNO: 6所示 的蛋白。 另一方面，本专利技术还提供了一种核酸，其中，该核酸的序列中含有如SEQID NO: 13、14、15或16所示的序列，并且该核酸为对应的融合核酸的片段，所述融合核酸在5' 至3'方向上由第一核酸片段和第二核酸片段连接而成，所述第一核酸片段如SEQIDN0:7、 8、9或10所示，所本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种融合蛋白，其特征在于：该融合蛋白在N末端至C末端方向上由第一蛋白片段和第二蛋白片段连接而成，所述第一蛋白片段如SEQ ID NO:1、2、3或4所示，所述第二蛋白片段如SEQ ID NO:5或6所示。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：江涛，保肇实，
申请(专利权)人：江涛，保肇实，
类型：发明
国别省市：北京;11