p97片段及其应用制造技术

提供具有血脑屏障(BBB)转运活性的人p97(黑色素转铁蛋白)多肽的片段，包括其变体和组合物、含有所述p97片段的缀合物；也提供其应用的相关方法，例如促进治疗剂或诊断剂穿过BBB的转运。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】p97片段及其应用相关申请的交叉引用本申请根据35U.S.C.§119(e)要求2013年3月13日提交的第61/780,170号美国临时申请和2013年10月1日提交的第61/885,387号美国临时专利申请的权益，两个申请都通过引用的方式整体并入本文。序列表的声明与本申请相关的序列表以文本格式代替纸质拷贝提供，并且在此通过引用的方式并入到说明书中。含有序列表的文本文档的名称为BIOA_003_02WO_ST25.txt。该文本文档为约40KB，于2014年3月13日建立，并且通过EFS-Web电子提交。专利技术背景
本专利技术总体涉及具有转运活性的人p97(黑素转铁蛋白)多肽片段，包括其变体和组合物、含有所述p97片段的缀合物，以及其应用的相关方法，例如，促进治疗剂和/或诊断剂穿过血脑屏障(BBB)的递送以及进入中枢神经系统。相关技术的描述克服向脑的特定区域递送治疗剂或诊断剂的困难，是治疗或诊断许多中枢神经系统(CNS)疾病(包括那些脑部疾病)的主要挑战。在血脑屏障(BBB)的神经保护作用中，其发挥功能来阻碍向脑递送许多潜在重要的诊断剂和治疗剂。治疗分子和基因不能以足够的量穿过BBB，否则它们可能在治疗和诊断中发挥效力。据报道，全部的治疗分子中，有超过95％不能穿过血脑屏障。因此，需要促进治疗剂和其它分子穿过血脑屏障递送的组合物和方法，例如，有效地治疗中枢神经系统(CNS)的某些疾病，如癌症，特别是那些能够转移至CNS的癌症。本专利技术解决这些需求并提供其它相关优势。专利技术概述本专利技术的实施方案包括长度至多约300、400、500、600或700个氨基酸的分离的p97(黑素转铁蛋白)多肽，其中所述多肽包含与SEQIDNO：2-18中一个或多个序列至少有70％同一性的氨基酸序列，或其活性片段或变体。在某些实施方案中，所述p97多肽包含SEQIDNO：2-18中一个序列，任选地，包括由SEQIDNO：1限定的相邻的C-端和/或N-端序列。在某些实施方案中，所述多肽包括SEQIDNO：2-18中的2、3、4或5种序列，任选地，包括如SEQIDNO：1限定的任何间插序列。在某些实施方案中，p97多肽包含SEQIDNO：13和/或14中一个或两个序列，任选地包括如SEQIDNO：1限定的间插序列。在某些实施方案中，p97的长度为约或至多约250、240、230、220、210、200、190、180、170、160、150、140、130、120、110、100、90、80、70、60、50、40、30、25、20、15或10个氨基酸。在某些实施方案中，p97多肽融合至异源蛋白。还包含缀合物，包括本文描述的p97多肽，其中所述p97多肽与药剂共价连接或可操作地(operatively)连接，从而形成p97-药剂缀合物。在某些实施方案中，所述药剂为小分子、多肽、肽模拟物、类肽、适配体或可检测的实体。在某些实施方案中，所述小分子为选自下述中一种或多种的细胞毒性剂或化学治疗剂或抗血管生成剂：烷化剂、抗代谢物、氨茴环霉素、抗肿瘤抗生素、铂、I-型拓扑异构酶抑制剂、II-型拓扑异构酶抑制剂、长春花生物碱和紫衫烷。在某些实施方案中，所述小分子选自下述的一种或多种：苯丁酸氮芥、环磷酰胺、西仑吉肽、洛莫司汀(CCNU)、美法仑、甲苄肼、塞替派、卡莫司汀(BCNU)、enzastaurin、白消安、道诺霉素、阿霉素、吉非替尼、埃罗替尼、伊达比星、替莫唑胺、表阿霉素、米托蒽醌、博来霉素、顺铂、卡铂、奥沙利铂、喜树碱、伊立替康、拓扑替康、安丫啶、依托泊苷、磷酸依托泊苷、替尼泊苷、替西罗莫司、依维莫司、长春新碱、长春花碱、长春瑞滨、长春地辛、CT52923、紫杉醇、伊马替尼、达沙替尼、索拉菲尼、帕唑帕尼、苏尼替尼(sunitnib)、瓦他拉尼、易瑞沙、埃罗替尼、AEE-788、二氯醋酸盐(dichoroacetate)、他莫昔芬、法舒地尔、SB-681323、semaxanib、多奈哌齐(donepizil)、加兰他敏、美金刚、卡巴拉汀、他克林、雷沙吉兰(rasigiline)、纳曲酮、鲁比前列酮、沙芬酰胺、伊曲茶碱、匹莫范色林(pimavanserin)、pitolisant、伊拉地平、pridopidine(ACR16)、四苯喹嗪、蓓萨罗丁、醋酸格拉替雷(glatirimeracetate)、芬戈莫德和米托蒽醌，包括其药物可接受的盐或酸。在某些实施方案中，所述多肽为抗体或其抗原结合片段，或免疫球蛋白样分子。在某些实施方案中，抗体或其抗原结合片段特异性地与癌症相关抗原结合。在某些实施方案中，所述癌症相关抗原是下述的一种或多种：人Her2/neu、Her1/EGF受体(EGFR)、Her3、A33抗原、B7H3、CD5、CD19、CD20、CD22、CD23(IgE受体)、C242抗原、5T4、IL-6、IL-13、血管内皮生长因子VEGF(如VEGF-A)、VEGFR-1、VEGFR-2、CD30、CD33、CD37、CD40、CD44、CD51、CD52、CD56、CD74、CD80、CD152、CD200、CD221、CCR4、HLA-DR、CTLA-4、NPC-1C、腱生蛋白、波形蛋白、胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)、甲胎蛋白、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、碳酸酐酶-9(CA-IX)、癌坯抗原(CEA)、整合素αvβ3、整合素α5β1、叶酸盐受体-1、跨膜糖蛋白NMB、成纤维细胞活化蛋白α(FAP)、糖蛋白75、TAG-72、MUC1、MUC16(或CA-125)、磷酯酰丝氨酸、前列腺特异性膜抗原(PMSA)、NR-LU-13抗原、TRAIL-R1、肿瘤坏死因子受体超家族成员10b(TNFRSF10B或TRAIL-R2)、SLAM家族成员7(SLAMF7)、EGP40泛癌抗原、B-细胞活化因子(BAFF)、血小板源性生长因子受体、糖蛋白EpCAM(17-1A)、程序性死亡-1、蛋白二硫键异构酶(PDI)、肝再生磷酸酶-3(PRL-3)、前列腺酸磷酸酶、Lewis-Y抗原、GD2(表达于神经外胚层起源的肿瘤中的双唾液酸神经节苷脂)、磷脂酰肌醇聚糖-3(GPC3)或间皮素。在某些实施方案中，抗体或其抗原结合片段特异性地与疼痛相关抗原结合。在某些实施方案中，所述疼痛相关抗原为神经生长因子(NGF)或原肌球蛋白相关激酶A(TrkA)中的一种或多种。在某些实施方案中，抗体或其抗原结合片段或免疫球蛋白样分子与促炎性分子，任选地与促炎性细胞因子或趋化因子特异性结合。在某些实施方案中，所述促炎性分子为下述的一种或多种：TNF-α、TNF-β、FasL、CD27L、CD30L、CD40L、Ox40L、4-1BBL、TRAIL、TWEAK和Apo3L、IL-1α、IL-1β、IL-2、干扰素-γ(IFN-γ)、IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-8、IL-12、IL-15、IL-17、IL-18、IL-21、LIF、CCL5、GRO-α、MCP-1、MIP-1α、MIP-1β、巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)或粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)。在某些实施方案中，所述促炎性分子为TNF-α，且所述抗体或免疫球本文档来自技高网...

【技术保护点】
长度至多约300个氨基酸的分离的p97多肽，其中所述多肽包含与DSSHAFTLDELR(SEQ ID NO:13)或者SEQ ID NO:2‑18中的任何一种或多种具有至少70％同一性的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.03.13 US 61/780,170;2013.10.01 US 61/885,3871.缀合物，包括p97多肽，其中所述p97多肽由氨基酸序列DSSHAFTLDELR(SEQIDNO:13)组成，其中所述p97多肽与治疗剂可操作地连接，以形成p97-治疗剂缀合物，其中所述p97多肽具有转运治疗剂穿过血脑屏障(BBB)的能力。2.如权利要求1所述的缀合物，其中所述p97多肽具有一个或多个末端半胱氨酸和/或酪氨酸。3.如权利要求1所述的缀合物，其中所述治疗剂为抗体。4.如权利要求3所述的缀合物，其中所述抗体选自下述的一种或多种：曲妥珠单抗、西妥昔单抗、达利珠单抗、他尼珠单抗、3F8、8H9、阿巴伏单抗、阿德木单抗、阿夫土珠单抗、阿仑单抗、培化阿珠单抗、阿麦妥昔单抗、阿泊珠单抗、巴维昔单抗、贝妥莫单抗、贝利木单抗、贝伐单抗、莫-比伐珠单抗、贝伦妥单抗-维多汀、莫-坎妥珠单抗、拉-坎妥珠单抗、卡罗单抗-喷地肽、卡妥索单抗、泊-西他珠单抗、西妥木单抗、clivatuzumab(tetraxetan)、可那木单抗、达西珠单抗、达洛珠单抗、地莫单抗、drozitumab、依美昔单抗、依决洛单抗、依洛珠单抗、enavatuzumab、恩司昔单抗、依帕珠单抗、厄马索单抗、埃达珠单抗、法勒珠单抗、FBTA05、芬妥木单抗、flanvotumab、加利昔单...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒂莫西·维塔利斯，瑞恩哈德·加巴斯勒尔，
申请(专利权)人：比奥阿赛斯技术有限公司，
类型：发明
国别省市：加拿大;CA