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黄芩苷在制备具有治疗感染H9N2亚型禽流感病毒的药物中的应用制造技术

技术编号:12732328 阅读:90 留言:0更新日期:2016-01-20 15:39
本发明专利技术公开了黄芩苷在制备具有治疗感染H9N2亚型禽流感病毒的药物中的应用,本发明专利技术开辟了黄芩苷的新用途,为感染H9N2亚型禽流感病毒的治疗提供了新的药物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及黄芩苷的新用途,特别涉及黄芩苷在制备具有治疗感染H9N2亚型禽流感病毒的药物中的应用
技术介绍
90年代开始我国南部就出现H9N2亚型禽流感病毒的流行趋势,并且呈广泛流行的趋势,这种流行趋势是不能疏忽的,人们必须重视起来,H9N2亚型禽流感病毒第一次出现在我国的广东省,那一年是1994年。往后的几年里,随着病原体的扩散,在香港的活禽市场里也发现了H9N2亚型禽流感病毒,这也进一步说明了H9N2亚型禽流感病毒是有逐渐蔓延的趋势,在我国可能已经广泛存在,所以也给各地区的养禽业造成巨大的威胁。目前,人们预防病毒一般都是利用疫苗,但是这种方法并不是最为有效的方法,而且也不经济。病毒在侵入机体后进入细胞内繁殖,所以疫苗是无法针对那些已经进入到细胞内的病毒进行清除,病毒在这种感染过程中很有可能发生基因重组,最终导致“超级病毒”的诞生。化学性药物治疗病毒病效果甚微,这是因为一方面药物进入机体通过各种屏障作用和酶系作用,使得浓度降低很多;另一方面病毒呈严格的细胞内寄生,抗病毒药物在破坏或抑制细胞内病毒的同时,也对未感染的细胞产生了不必要损伤。此类做法存在耐药性、残留性、毒副作用大、抗病毒谱较窄等缺点,因而临床应用有限。因此,需要不断研发新的抗病毒的药物去对抗H9N2亚型禽流感病毒来减轻大量疫苗不被利用的情况。中医认为黄芩有清热解毒的作用,但对于黄芩苷抗H9N2亚型禽流感病毒毒株作用的研究还属于空白。
技术实现思路
本专利技术目的在于公开黄芩苷在制备具有治疗感染H9N2亚型禽流感病毒的药物中的应用。本专利技术的技术方案为:黄芩苷在制备具有治疗感染H9N2亚型禽流感病毒的药物中的应用。本专利技术所述的应用是在制备对肺组织具有保护作用的药物中的应用。本专利技术所述的应用是在制备有利于抗病毒的细胞因子水平并且能抑制促进炎症反应的细胞因子的分泌的药物中的应用。本专利技术所述的应用是在制备抗病毒蛋白的表达,能有效地提高机体的免疫能力的药物中的应用。本专利技术所述的应用是在制备对于病毒抑制机体的CD4+/CD8+比值有极显著地恢复作用的药物中的应用。本专利技术的有益效果是:本专利技术开辟了黄芩苷的新用途,为感染H9N2亚型禽流感病毒的治疗提供了新的药物。附图说明图1:黄芩苷对感染H9N2亚型禽流感病毒的小鼠肺组织病理切片(HE10×)A:正常组;B:病毒模型组;C:阳性对照组;D:黄芩苷低剂量组;E:黄芩苷中剂量组;F:黄芩苷高剂量组;图2:黄芩苷对感染H9N2亚型禽流感病毒的小鼠血清中IL-2的影响,与空白组比较:##P<0.01;与病毒组比较:*P<0.05**P<0.01;图3:黄芩苷对感染H9N2亚型禽流感病毒的小鼠血清中TNF-α的影响,与对照组比较:##P<0.01;与病毒组比较:*P<0.05**P<0.01;图4:黄芩苷对感染H9N2亚型禽流感病毒小鼠肺组织PKR的表达情况,Normal为空白组;Model为病毒组;Positivecontrol为阳性组;lowdose、medialdose、highdose分别代表低、中、高剂量黄芩苷组;图5:黄芩苷对感染H9N2亚型禽流感病毒小鼠肺组织PKR蛋白表达量,与空白组相比较:##P<0.01;与病毒模型组相比较:*P<0.05**P<0.01;图6:黄芩苷对感染H9N2亚型禽流感病毒小鼠肺组织Mx1的表达情况,Normal为空白组;Model为病毒组;Positivecontrol为阳性组;lowdose、medialdose、highdose分别代表低、中、高剂量黄芩苷组;图7:黄芩苷对感染H9N2亚型禽流感病毒小鼠肺组织Mx1蛋白表达量,与空白组相比较:##P<0.01;与病毒模型组相比较:*P<0.05**P<0.01;具体实施方式下述实施例用于进一步说明,但不限于本专利技术。实施例1:黄芩苷对感染H9N2亚型禽流感病毒小鼠肺组织的保护作用1、主要试剂病毒株:为H9N2亚型禽流感病毒毒株,由中国农业大学实验室提供。病毒用9日龄鸡胚进行繁殖培养传代,提取出来的尿囊液用血凝抑制试验进行效价的测定,血凝效价为27以上的尿囊液供试验用。(鸡胚购于北京梅里亚生物有限公司)2、实验动物6~8周昆明种小白鼠60只,体重15—18g,雌雄各半。3、实验药品黄芩苷,购于上海同田生物技术有限公司(批号:E-00200)。实验设低、中、高三个剂量,三种剂量是成倍增长的,低、高剂量分别为80mg/kg·d、160mg/kg·d、320mg/kg·d。利巴韦林片(中国药品检察所批号:140629)25mg/支,剂量为10mg/kg·d。实验时,各药均以DMEM溶液作溶剂配制灌胃。4、实验方法4.1病毒空斑实验用常规培养好的MDCK接种100倍成倍稀释的病毒液,接种后病毒要吸附1h,之后加入含有琼脂糖的病毒培养液,先放在超净工作台,待琼脂糖凝固后,放置37℃、5%CO2条件下培养3d,出现白色点就以福尔马林缓冲结晶紫溶液固定和染色,计算空斑形成单位(PFU/ml)。营养物配方:总量为20ml包括DMEM(2×)10ml、加入6μlTPCK(1mg/ml)终浓度为0.2μg/ml、琼脂糖10ml;DMEM(2×):总量500ml称取9.4gDMEM粉末溶解于无菌纯水462ml过滤除菌,另补加终浓度0.6mg/ml谷氨酰胺,100U/L青霉素,100μg/L链霉素,7%NaHCO3,0.02mol/LHEPES,0.4%BSA。通过公式计算空斑形成单位:空斑数量(PFU/ml)=[平均每孔的空斑数/每孔病毒接种量(ml)]×病毒稀释度。本试验最终检测出病毒的空斑形成单位为2×107PFU/ml。4.2实验分组将小鼠进行称体重后,按照每组10只小鼠进行分组(雌雄各半),一共分为6组,置于动物房中隔离饲养,为了防止实验小鼠之间的交叉感染,所以将造模后的小鼠与空白组小鼠分开饲养,造模后的小鼠共分为5组,即黄芩苷低剂量组、黄芩苷中剂量组、黄芩苷高剂量组、利巴韦林组(西药对照组)以及病毒模型组。把空白对照组与其它组饲养于不同的动物房,要确保两个动物房的外界条件一样。4.3动物造模以滴鼻方式建立禽流感病毒感染小鼠模型。造模后48h小鼠会出本文档来自技高网
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【技术保护点】
黄芩苷在制备具有治疗感染H9N2亚型禽流感病毒的药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.黄芩苷在制备具有治疗感染H9N2亚型禽流感病毒的药物
中的应用。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于:所述的应用是在制
备对肺组织具有保护作用的药物中的应用。
3.如权利要求1所述的应用,其特征在于:所述的应用是在制
备有利于抗病毒的细胞因子水平并且能抑制促进炎症反应的细胞因
子的...

【专利技术属性】
技术研发人员:胡格董虹穆祥袁欣
申请(专利权)人:北京农学院北京金宸新宇科技有限公司
类型:发明
国别省市:北京;11

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