本发明专利技术涉及一种微生物饲料添加剂及其制备方法。其特征在于利用乳酸芽孢杆菌除了具有普通乳酸菌共同的种种有益特性外，还兼有芽孢杆菌的特性，通过特殊的发酵培养制备出含乳酸芽孢杆菌菌数高、芽孢形成率高的发酵液作为饲料添加剂。该添加剂对饲养动物胃肠道具有明显的调理功能，能增加饲养动物对饲料的吸收和提高饲养动物的抗病能力，尤其适用作禽畜、水产动物的饲料添加剂。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种微生物饲料添加剂及其制备方法，尤其适用作禽畜、水产动物的饲料添加剂。
技术介绍
抗生素作为饲料添加剂使用已有50年的历史，为动物的生长和健康做出了巨大贡献，是目前饲料中用量最大、最广的添加剂之一。自1975年日本最早报道病原菌抗药性现象以来，人们发现，由于大量和滥用抗生素已给动物本身、动物产品和环境带来一系列的问题。主要表现在，动物病原菌产生抗药性，导致抗生素用量的增加，引起内源性感染和二重感染。特别是长期使用会造成消化道内本身微生态失调和环境的污染。同时抗生素在产品中的残留还直接影响人类的免疫和健康。饲料微生物添加剂因具有安全、环保、无副作用和抗病、促生长等特点，而受到广大学者的重视，并已从微生态学理论、作用机理、菌种的筛选及应用等多方面进行了大量的研究，取得了可喜的成果。作为抗生素类添加剂的替代品，饲料微生物添加剂在国内外都已得到广泛的应用，取得了非常理想的效果，是最有前途的饲料添加剂之一。饲料微生物添加剂属于微生态制剂或益生素的范畴。其研制开发以动物微生态学(包括微生态平衡理论，微生态失调理论，微生态营养理论和微生态防治理论)为理论依据。饲料微生物添加剂是指摄入动物体内参与肠内微生物平衡的活性微生物培养物，它能通过直接增强动物对肠内有害微生物群落的抑制作用，或者通过增强非特异性免疫功能来预防疾病，并间接起到促进动物生长和提高饲料转化率的作用。众多实验证实了具有提高增重、改善饲料转化效率、促进畜禽机体免疫功能、降低死亡率及改善环境等效果。如提高肉鸡成活率、增重及饲料效率；改善蛋鸡生存环境，提高产蛋性能和蛋的品质；提高仔猪成活率和生长速度，有效防止仔猪腹泻；提高生育肥猪日增重，在母猪日粮中添加可使断奶仔猪数和断奶体重显著提高。在水产养殖上，微生物饲料添加剂能提高罗氏对虾幼苗的成活率，增强成虾、大西洋鲑对病原菌的抵抗力；而且添加剂中的光合细菌和化能异养菌能够降解进入养殖池塘中的各种有机废物，消除有毒因子，稳定PH值，平衡菌相与藻相，营造良好的水生环境，达到预防疾病、健康养殖的效果。目前使用的益生素主要是芽孢杆菌、乳酸杆菌、粪链球菌等单一菌种或复合菌种的制剂。微生物饲料添加剂采用的菌种主要有乳酸菌类(Lacticacid bacteria)、酵母菌类(Yeasts)和芽抱杆菌类(Bacillus)。用于饲料添加剂的芽孢杆菌是一种需氧的非致病菌。它在肠道或贮藏过程中都以内生子的形式存在，不消耗饲料养分，可保持饲料的质量。进入肠道后，在肠道上部迅速复活，复活率接近100%。它能使空肠内的pH值下降，氨浓度降低，并消耗大量的氧，维持肠道厌氧环境，抑制病菌的生长，维持肠道正常生态平衡，并有平衡和稳定乳酸菌的作用。它能产生活性很高的蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶以及多种氨基酸。芽孢杆菌抗逆性强，具有耐高温、耐酸碱、耐挤压等特点，可耐受颗粒饲料加工的影响。乳酸菌类是一种可以分解糖类产生乳酸的无芽孢革兰氏阳性菌，可以厌氧、兼性厌氧生长。乳酸菌在饲料添加剂中具有重要的地位，在美国FAD(1989)公布的40多种饲用微生物中有近30种是乳酸菌。它耐酸，在pH为3.0~4.5时仍可生长，适应于胃肠的酸性环境。乳酸菌是鱼肠道的正常菌群，在鱼体肠道系统定植，在体内通过生物拮抗，拮抗革兰氏阴性致病菌，维持肠道中正常的生态平衡，可降低肠道PH值，阻止和抑制有害物质，增强抗感染能力。活菌体内和代谢产物中含有较高的超氧化物歧化酶(SOD)，能增强动物的体液免疫和细胞免疫，增强机体的免疫调节活性，促进生长。但该类菌在生长过程中，不形成芽孢，抗逆性差，易失活，难保藏，所以在饲料工业中的应用受到一定的限制。目前有些市售产品采用微胶囊包被技术，提高了其对环境的抗逆性，但生产成本也相应提高。酵母菌是喜生长在偏酸性环境的需氧菌，在肠道内大量繁殖。在水产业中可以使用从鱼体、水体分离到的酵母，主要有假丝酵母属(Candida)等。饲料中也可以使用酿造酵母(Brewer's yeast)和面包酵母(Baker’ s yeast)。
技术实现思路
本专利技术的目的在于开发一种性能更优越的微生物饲料添加剂及其制备方法。本专利技术利用乳酸芽孢杆菌除了具有普通乳酸菌共同的种种有益特性外，还兼有芽孢杆菌的特性，通过特殊的发酵培养制备出含乳酸芽孢杆菌菌数高、芽孢形成率高的发酵液作为饲料添加剂，性能优于现有的微生物饲料添加剂从而实现了本专利技术的目的。本专利技术多效微生物饲料添加剂的技术特征在于含有由下述制备方法得到的含有乳酸芽孢杆菌的发酵液，所述的制备方法包括如下几个步骤: (a)斜面菌种活化:将保藏斜面种乳酸芽孢杆菌分别划线于斜面种培养基上进行活化，所述的斜面种培养基中含豆浆粉10~20.0g/L,酵母膏或牛肉膏或玉米浆3.0~10.0g/L,葡萄糖5~15.0g/L,琼脂18 — 22g/L,其余为水，pH7.0-7.2，常规方法灭菌； (b)菌种的一级液体活化:将上述培养好的斜面种用接种环分别接种于一级液体培养基中进行培养，使液体种的菌数达1.0X 1(T5.0X 109CFU/mL以上，所述的一级液体培养基中含豆浆粉15.0-25g/L，酵母膏或牛肉膏或玉米浆5.(Tl5.0g/L，葡萄糖10.0~30.0g/L，钙盐5.(Tl5g/L，硫酸镁0.Γ1.0g/L,锰盐0.0Γ0.lg/L, pH7.0~7.5，其余为水，常规方法灭菌； (c)种子罐中的培养:将上述分别培养好的一级液体种摇勻后在无菌条件下按体积分数1%~5%接种量接入种子罐的培养基中，通气培养24~48h，待菌数达1.0X109~5.0XlO9CFU/mL以上，停止培养； (d)大发酵罐中的培养:将上述分别培养好的乳酸芽孢杆菌种按体积分数10%~20%的接种量接入发酵罐的培养基中进行培养，温度37-42°C，转速180-250r/min，按每m3培养基的空气为20-30m3/h进行通气培养48-60h，发酵16_40h后开始补加已灭菌的葡萄糖浓缩液，总补加量为体积分数1%~4%，待菌数达1.0X 109-5.0X 109CFU/mL以上，停止发酵培养； (c)和(d)步骤中所述的培养基含豆浆粉20.(T30.0g/L，酵母裔或牛肉裔或玉米浆 5.0-15g/L,葡萄糖 10.0^40.0g/L,钙盐 5.0~15.0g/L,硫酸镁 0.1-0.5g/L,锰盐0.01-0.lg/L,其余为水，ρΗ7.(Γ7.5，常规方法灭菌。(b)、(c)和(d)步骤中所述的钙盐可以是碳酸钙、硫酸钙、硝酸钙等，最好是碳酸钙，所述的锰盐可以是硫酸锰、氯化锰、硝酸锰等，最好是硫酸锰~ 本专利技术多效微生物饲料添加剂中最好还含有质量分数2%矿石粉、质量分数2%沸石粉、质量分数2%膨润土、质量分数5%柠檬酸。本专利技术所用的乳酸芽孢杆菌也叫凝结芽孢杆菌，菌号为BacilluscoagulansAB92064,保藏于CCTCC，中国典型培养物保藏中心。这个菌种在《中国典型培养物保藏中心培养物目录》(陶天申.武汉大学，1998.25.)上公开记载。本专利技术多效微生物饲料添加剂的制备方法包括上述(a)、(b)、(C)和(d)步骤。本专利技术多效微生物饲料添加剂的制备方法最好在(d)步骤产生的成熟的发酵液中添加质本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种多效微生物饲料添加剂，其特征在于含有由下述制备方法得到的含有乳酸芽孢杆菌的发酵液，所述的制备方法包括如下几个步骤：(a)斜面菌种活化：将保藏斜面种乳酸芽孢杆菌分别划线于斜面种培养基上进行活化，所述的斜面种培养基中含豆浆粉10~20.0g/L，酵母膏或牛肉裔或玉米浆3.0~10.0g/L,葡萄糖5~15.0g/L,琼脂18‑22g/L,其佘为水，pH7.0‑1.2,常规方法灭菌；(b)菌种的一级液体活化：将上述培养好的斜面种用接种环分别接种于一级液体培养基中进行培养，使液体种的菌数达1.0X109~5.0×109CFU/mL以上，所述的一级液体培养基中含豆浆粉15.0‑25g/L,酵母膏或牛肉膏或玉米浆5.0‑15.0g/L,葡萄糖10.0~30.0g/L,钙盐5.0~15g/L,硫酸镁0.1‑1.0g/L,锰盐0.01~0.1g/L,pH7.0~7.5,其余为水，常规方法灭菌；(c)种子罐中的培养：将上述分别培养好的一级液体种摇匀后在无菌条件下按体积分数1%~5%接种量接入种子罐的培养基中，通气培养24~48h，待菌数达1.0×109~5.0×109CFU/mL以上，停止培养；(d)大发酵罐中的培养：将上述分别培养好的乳酸芽孢杆菌种按体积分数10%~20%的接种量接入发酵罐的培养基中进行培养，温度37~42℃，转速180~250r/min,按每m3培养基的空气为20‑30m3/h进行通气培养48‑60h,发酵16‑40h后开始补加已灭菌的葡萄糖浓缩液，总补加量为体积分数1%~4%，待菌数达1.0×109~5.0×109CFU/mL以上，停止发酵培养；所述的(c)和(d)步骤中所述的培养基含豆浆粉20.0~30.0g/L,酵母膏或牛肉膏或玉米浆5.0‑15g/L,葡萄糖10.0~40.0g/L,钙盐5.0~15.0g/L,硫酸镜0.1~0.5g/L,锰盐0.01‑0.1g/L,其余为水，pH7.0‑7.5,常规方法灭菌。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李朝均，
申请(专利权)人：都江堰惠农生物技术有限责任公司，
类型：发明
国别省市：四川;51
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