一种小核菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种小核菌及其应用，所述小核菌分类命名为罗尔夫小核菌(Sclerotium rolfsii Sacc.)，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.11302，保藏日期为2015年09月08日。相对于现有技术，本发明专利技术罗尔夫小核菌对地钱和土马鬃植物具有较强抑制作用；对病原菌的作用方式多样化；具有繁殖速度快；能够人工培养，易于操作，便于生产应用；抗逆能力强等优点，尤其是对地钱和土马鬃植物的防治效果佳。此外，其培养条件简单、容易保存，易于工业化生产，具有良好的开发应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物保护领域的微生物除草剂，尤其设及罗尔夫小核菌（Sclerotium rolfsiiSacc.)及其在防治苔薛植物中的应用。
技术介绍
生物除草剂研究已有近200年的历史。在自然状态下，除草剂往往只能利用植食 性昆虫、动物、病原微生物等天敌，通过生态学途径，将杂草种群控制在经济上和生态上可 W接受的水平。随着人们对植物病原菌认识的深入，上世纪中叶开始了微生物除草剂的开 发研究。近几十年来，新的植物病原菌的不断被分离和研究，尤其是从杂草病株中筛选出来 的一些植物病原菌表现出了潜在的除草活性，有可能开发成为可替代化学除草剂的新型微 生物除草剂。 全世界广泛分布的杂草有30000种，约1800种对作物造成不同程度的危害，每年 因杂草危害造成的农作物减产高达9. 7%。近百年来，虽然采用化学除草剂能有效地控制许 多杂草，但化学药剂的大量使用也引发了一系列的问题，诸如除草剂抗性杂草植株的出现、 ±壤污染、水质退化、W及对人、畜的危害等。随着人们对环境意识的提高和农业可持续发 展的需要，高效、环保、无害的微生物除草剂研究越来越显示其社会意义、生态效益和经济 价值。 1981年，Devine在美国被注册登记为第一个生物除草剂，它是美国弗罗里达州的 栋桐疫霉致病菌株的厚垣抱子悬浮剂，用于防治杂草莫伦藤（Morreniaodorata)，防效可 达90%W上，持效期可达2年，被广泛用于枯园杂草防除。在此之后的近15年时间里，没有 新的生物除草剂商品推出，在生物除草剂的发展过程中出现了一个断层。但至今在此领域 内的研究仍十分活跃，也取得了一大批研究成果。 阳0化]我国也有一些利用生物除草剂防除杂草的成功例证： ①在1963年，我国已使用"鲁保一号"，即胶抱炭痘菌寃丝子专化型 (Colletotrichumgloeosporoidesf.sp.州scutae)的培养物防治大豆田间的寃丝子，是 世界上最早被应用于生产实践的生物除草剂之一。虽然在上世纪80年代研究，已解决了菌 种在培养过程中的退化问题，但在随后的商品化研究和发展方面工作滞后。 ②新疆哈密植检站于上世纪80年代，利用研制的尖抱镶刀菌列当变种（化sarium 0巧sporumvar.odhoceras)培养物制成的"生防剂巧98"，控制西瓜田的瓜列当 (化obanchesp.)也取得实用性成果。 ③紫茎泽兰巧upatoriumadeno地orum)上的飞机草绒抱菌（Mycovellosiella eupatorii-edomti)作为防除紫茎泽兰的真菌除草剂。该菌的缓慢致病速度，可能更适宜用 于经典的生物防治。从紫茎泽兰自然发生的病株上分离到链格抱（Altemariaaltemata) 菌株，显示出该菌是防治野燕麦的潜在生物除草剂。 生物除草剂农药的特性赋予了农业可持续发展战略，为保护农业生态环境，保障 食品安全提供物质基础和技术支撑，也是未来经济中具有发展潜力的新增长点之一。研究 微生物农药产业发展，对于政府部口科学制定促进微生物农药产业发展的政策体系，实现 农药产业结构调整，促进循环经济和可持续社会发展战略，保障经济建设和农业生态环境 的协调发展，将具有十分重要作用。
技术实现思路
专利技术目的：为了克服现有技术的不足，本专利技术提供一种小核菌，其分类命名为罗尔 夫小核菌（SclerotiumrolfsiiSacc.)，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生 物中屯、，保藏编号为：CGMCCNo. 11302,保藏日期为2015年09月08日。 作为优选，所述小核菌的最适生长溫度为25 +rc。 本专利技术还提供了所述小核菌在制备防治苔薛植物的菌块中的应用。 作为优选，所述菌块的制备方法为：将罗尔夫小核菌在25 +rc的PDA固体培养基 上培养3-5山切成4-5mm的菌块，即得。 作为另一种优选，所述苔薛植物为地钱植物和/或±马髪植物。 本专利技术还提供了所述小核菌在制备防治苔薛植物的液体菌剂中的应用。 作为优选，所述液体菌剂的制备方法为：将罗尔夫小核菌接种于液体发酵培养基 中，在25°C-35°C下发酵培养72-120小时，得到的发酵液，即为所述液体菌剂。 作为进一步优选，所述发酵培养基的配方为：自来水1000血，马铃馨120-200g，薦 糖 15-20g，硫酸锭 0. 5-1. 5g，pH4. 5-6. 8。 作为另一种优选，所述苔薛植物为地钱植物和/或±马髪植物。 本专利技术中所述的罗尔夫小核菌的形态学和生理活性特征如下： 在25±2°C的PRX-250A型智能人工气候箱内培养（RH70%，黑暗）的PDA上平均 日生长量为2. 5cm。菌丝白色，棉絮状或絹丝状，放射状生长；菌丝上有锁状联合；单根菌丝 的无色，每个菌丝细胞长约60~100ym，菌丝宽3.93~9.46ym。菌核形成的初期是由 白色絹状菌丝体聚集而成的乳白色小球体，5d渐渐变为米黄色小球、黄褐色到深红褐色（2 周），最后变为深褐色，似油菜巧大小，表生，球形或近球形，平滑，有光泽；运时在PDA上看 不到菌落形态和颜色，只看到褐色菌核，直径为1~5mm，圆形至楠圆形，大多数为1~2mm， 少数3X5mm，菌核在培养皿内散生，有时会在中间的接种点聚生。菌核内部白色，由拟薄壁 组织构成，细胞直径6~8ym;表层细胞小而色深。 本专利技术罗尔夫小核菌菌落形态图见说明书附图1，其菌核形态图见说明书附图2。 本专利技术罗尔夫小核菌的rDNA-ITS序列如SEQIDNo. 1所示。将所测rDNA-ITS序 列通过BLAST比对，鉴定为罗尔夫小核菌。 罗尔夫小核菌（SclerotiumrolfsiiSacc.)是广泛存在于自然界中的一种微 生物，属于半知菌亚口、丝抱纲，无抱目，小核菌属（Sclerotium)，存在于±壤、植物根围等 生态环境中，是一种专口针对苔薛植物的生防菌，它能引起地钱（Marchantiapolymo巧ha L.)和±马髪（Pol^richumcommuneL.ex化dw.)的死亡，从而达到有效控制运2种苔薛 植物生长蔓延及为害铁皮石解值en化obiumofficinaleKimuraetMigo)的目的。利用 罗尔夫整小核菌防治苔薛植物，在国内外属于首次报道。 有益效果：与现有技术相比，本专利技术的优点是：(1)本专利技术罗尔夫小核菌对地钱和上马髪植物具有较强抑制作用；该病原菌的作 用方式多样化；具有繁殖速度快；能够人工培养，易于操作，便于生产应用；抗逆能力强等 优点，尤其是对地钱和±马髪植物的防治效果佳。 (2)罗尔夫小核菌培养条件简单、容易保存，易于工业化生产，具有良好的开发应 用前景。【附图说明】 图1为本专利技术中罗尔夫小核菌的菌落形态图；图2为本专利技术中罗尔夫小核菌菌核形态图 图3为本专利技术中用罗尔夫小核菌PDA菌块接种对地钱植物的致病作用； 图4为本专利技术中用罗尔夫小核菌PDA菌块接种对±马髪植物的致病作用； 图5为本专利技术中用罗尔夫小核菌液体菌液喷洒接种对地钱植物致病作用；图6为本专利技术中用罗尔夫小核菌液体菌液喷洒对±马髪植物的致病作用； 图7为本专利技术中罗尔夫小核菌对地钱和±马髪2种混生植物的致病作用； 图8为本专利技术中±马髪防治对照； 图9为本专利技术中地钱防治对照。 具体实施本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种小核菌，其特征在于，其分类命名为罗尔夫小核菌(Sclerotium rolfsii Sacc.)，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.11302，保藏日期为2015年09月08日。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：赵桂华，杨鹤同，赵楠，
申请(专利权)人：江苏农林职业技术学院，
类型：发明
国别省市：江苏;32