蛋白质fogac在调控尖孢镰刀菌古巴专化型对香蕉植株毒力中的应用制造技术

本发明专利技术公开了fogac蛋白质在调控尖孢镰刀菌古巴专化型对香蕉植株毒力中的应用。所述fogac蛋白质的氨基端序列如序列表中序列3所示。本发明专利技术还公开了一种调控尖孢镰刀菌古巴专化型对香蕉植株毒力的方法，包括如下步骤(a1)或(a2)或(a3)：(a1)调控尖孢镰刀菌古巴专化型中序列表中序列3所示的fogac蛋白质的水平；(a2)调控尖孢镰刀菌古巴专化型中序列表中序列3所示的fogac蛋白质的编码基因的表达水平；(a3)调控尖孢镰刀菌古巴专化型中序列表中序列3所示的fogac蛋白质的编码基因的转录水平。实验证明，fogac蛋白质可调控尖孢镰刀菌古巴专化型对香蕉植株毒力。

【技术实现步骤摘要】
蛋白质fogac在调控尖孢镰刀菌古巴专化型对香蕉植株毒力中的应用
本专利技术涉及生物
，尤其涉及蛋白质fogac在调控尖孢镰刀菌古巴专化型对香蕉植株毒力中的应用。
技术介绍
尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusariumoxysporumf.sp.cubense)属于半知菌亚门真菌，是一种引起香蕉枯萎病的病原菌。该真菌从根部侵入香蕉植株，造成维管束堵塞，叶片黄化，植株萎蔫和香蕉绝收。由该菌引起的香蕉枯萎病是一种毁灭性病害，植株一旦发病只能铲除，而且该菌可在土壤中长期存活，这使该病害防治十分困难。该病害在全世界香蕉种植区均有发生，而且正不断蔓延和扩展。目前，防治由尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusariumoxysporumf.sp.cubense)引起的枯萎病，采用多菌灵、咪鲜胺等杀菌剂效果普遍不够理想。采用新型杀菌剂和选育抗病或耐病品种是今后香蕉枯萎病防治的主要方法。对香蕉枯萎病菌致病基因的研究可以帮助了解其致病机理，为该病的防治提供理论依据。蛋白质fogac是尖孢镰刀菌古巴专化型G蛋白α亚基之一，G蛋白(Gprotein)的全称为鸟苷酸结合蛋白(guaninenucleotide-bindingprotein)，是由α、β、γ等3个不同的亚单位构成的异聚体，具有结合GTP或GDP的能力。研究发现，在真菌中，G蛋白α亚基参与生长、发育、细胞交配、次生代谢物合成等生物学过程。但在在尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusariumoxysporumf.sp.cubense)中，G蛋白α亚基的功能尚无相关研究报道。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是如何调控尖孢镰刀菌古巴专化型对香蕉植株毒力。为解决上述问题，本专利技术首先提供了一种fogac蛋白质，所述fogac蛋白质的氨基酸序列可如序列表中序列3所示。所述fogac蛋白质在调控尖孢镰刀菌古巴专化型对香蕉植株毒力中的应用属于本专利技术的保护范围。为解决上述问题，本专利技术提供了一种调控尖孢镰刀菌古巴专化型对香蕉植株毒力的方法。本专利技术所提供的调控尖孢镰刀菌古巴专化型对香蕉植株毒力的方法，可包括如下步骤(a1)或(a2)或(a3)：(a1)调控尖孢镰刀菌古巴专化型中序列表中序列3所示的fogac蛋白质的水平；(a2)调控尖孢镰刀菌古巴专化型中序列表中序列3所示的fogac蛋白质的编码基因的表达水平；(a3)调控尖孢镰刀菌古巴专化型中序列表中序列3所示的fogac蛋白质的编码基因的转录水平。为解决上述问题，本专利技术还提供了一种筛选尖孢镰刀菌古巴专化型杀菌剂的方法。本专利技术所提供的一种筛选尖孢镰刀菌古巴专化型杀菌剂的方法，可包括如下步骤(b1)或(b2)或(b3)：(b1)以尖孢镰刀菌古巴专化型中序列表中序列3所示的fogac蛋白质为靶点对待检测物质进行筛选，将得到的抑制所述fogac蛋白质的待检测物质作为候选的尖孢镰刀菌古巴专化型杀菌剂；(b2)以尖孢镰刀菌古巴专化型中序列表中序列3所示的fogac蛋白质的编码基因为靶点对待检测物质进行筛选，将得到的抑制所述编码基因表达的待检测物质作为候选的尖孢镰刀菌古巴专化型杀菌剂；(b3)以尖孢镰刀菌古巴专化型中序列表中序列3所示的fogac蛋白质的编码基因为靶点对待检测物质进行筛选，将得到的抑制所述编码基因转录的待检测物质作为候选的尖孢镰刀菌古巴专化型杀菌剂。为解决上述问题，本专利技术还提供了一种鉴定或辅助鉴定尖孢镰刀菌古巴专化型候选杀菌剂的方法。本专利技术所提供的一种鉴定或辅助鉴定尖孢镰刀菌古巴专化型候选杀菌剂的方法，可包括如下(c1)或(c2)或(c3)：(c1)检测待测物质能否降低尖孢镰刀菌古巴专化型中序列表中序列3所示的fogac蛋白质的水平，如所述待测物质能降低所述尖孢镰刀菌古巴专化型中所述fogac蛋白质的水平、则所述待测物质为候选的所述尖孢镰刀菌古巴专化型杀菌剂，如所述待测物质不能降低所述尖孢镰刀菌古巴专化型中所述fogac蛋白质的水平、则所述待测物质为非候选的所述尖孢镰刀菌古巴专化型杀菌剂；(c2)检测待测物质能否抑制尖孢镰刀菌古巴专化型中序列表中序列3所示的fogac蛋白质的编码基因的表达，如所述待测物质能抑制所述尖孢镰刀菌古巴专化型中所述编码基因的表达、则所述待测物质为候选的所述尖孢镰刀菌古巴专化型杀菌剂，如所述待测物质不能抑制所述尖孢镰刀菌古巴专化型中所述编码基因的表达、则所述待测物质为非候选的所述尖孢镰刀菌古巴专化型杀菌剂；(c3)检测待测物质能否抑制尖孢镰刀菌古巴专化型中序列表中序列3所示的fogac蛋白质的编码基因的转录，如所述待测物质能抑制所述尖孢镰刀菌古巴专化型中所述编码基因的转录、则所述待测物质为候选的所述尖孢镰刀菌古巴专化型杀菌剂，如所述待测物质不能抑制所述尖孢镰刀菌古巴专化型中所述编码基因的转录、则所述待测物质为非候选的所述尖孢镰刀菌古巴专化型杀菌剂。具有d1)和/或d2)和/或d3)功能的物质在制备尖孢镰刀菌古巴专化型杀菌剂中的应用也属于本专利技术的保护范围：d1)降低序列表中序列3所示的fogac蛋白质水平；d2)降低序列表中序列3所示的fogac蛋白质的编码基因的表达；d3)降低序列表中序列3所示的fogac蛋白质的编码基因的转录。具有e1)和/或e2)和/或e3)功能的物质在制备抗尖孢镰刀菌古巴专化型的香蕉植株中的应用也属于本专利技术的保护范围：e1)降低序列表中序列3所示的fogac蛋白质水平；e2)降低序列表中序列3所示的fogac蛋白质的编码基因的表达；e3)降低序列表中序列3所示的fogac蛋白质的编码基因的转录。上述任一所述编码基因可为序列表中序列2所示的DNA分子。上述任一所述香蕉可为如下f1)-f5)中的任一种：f1)芭蕉科植物；f2)巴西蕉；f3)巴西蕉品种Musaspp.AAAgroupcv.Brazil；f4)粉蕉；f5)粉蕉品种Musaspp.AABgroupcv.Fenjiao。本专利技术还提供了一种制备重组菌的方法。本专利技术所提供的一种制备重组菌的方法，可包括如下步骤：敲除尖孢镰刀菌古巴专化型的基因组中的序列表中序列3所示的fogac蛋白质的编码基因，得到致病力低于所述尖孢镰刀菌古巴专化型的重组菌。上述制备重组菌的方法中，所述敲除尖孢镰刀菌古巴专化型的基因组中的蛋白质fogac的编码基因可通过同源重组实现的。所述同源重组为通过导入特异片段实现的。所述特异片段可含有上游同源臂和下游同源臂，所述上游同源臂的核苷酸序列可为序列表的序列1自5'末端第233位至第776位所示的DNA分子，所述下游同源臂的核苷酸序列可为序列表的序列1自5'末端第3213位至第4082位所示的DNA分子。所述特异片段的制备方法具体可为：(1)将质粒pCT74的KpnI识别序列和XhoI识别序列间的DNA小片段替换为核苷酸序列序列表的序列1自5'末端第233位至第776位所示的DNA分子，EcoRI识别序列和BamHI识别序列间的DNA小片段替换为核苷酸序列是序列表的序列1自5'末端第3213位至第4082位所示的DNA分子，得到重组质粒pCT-fogac；(2)将重组质粒pCT-fogac用限制性内切酶KpnI和BamHI酶切，回收约4.4kb的DNA片段，即为特异片段。上述任一所述特异片段也属于本专利技术的保护范围。实验证明本文档来自技高网...

【技术保护点】
序列表中序列3所示的fogac蛋白质在调控尖孢镰刀菌古巴专化型对香蕉植株毒力中的应用。

【技术特征摘要】
1.氨基酸序列如序列表中序列3所示的fogac蛋白质在调控尖孢镰刀菌古巴专化型对香蕉植株毒力中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述香蕉为巴西蕉或粉蕉。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于：所述巴西蕉为巴西蕉品种Musaspp.AAAgroupcv.Brazil；所述粉蕉为粉蕉品种Musaspp.AABgroupcv.Fenjiao。4.调控尖孢镰刀菌古巴专化型对香蕉植株毒力的方法，包括如下步骤（a1）或（a2）或（a3）：（a1）调控尖孢镰刀菌古巴专化型中氨基酸序列如序列表中序列3所示的fogac蛋白质的水平；（a2...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭立佳，黄俊生，杨腊英，刘磊，梁昌聪，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院环境与植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：海南;66