通过肽醛、其亚硫酸氢盐加合物或肽甲基酮稳定枯草杆菌蛋白酶在包含强螯合助洗剂的液体ADW洗涤剂中特别有效。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利说明】具有稳定的枯草杆菌蛋白酶的液体自动餐具清洗洗藻剂组 合物 对序列表的引用 本申请包含一个计算机可读形式的序列表。该计算机可读形式通过引用结合在 此。 专利
本专利技术设及枯草杆菌蛋白酶在液体自动餐具清洗（ADW)洗涂剂中的稳定性。 阳004] 背景 阳0化]通常用一定含量的助洗剂配制液体自动餐具清洗（ADW)洗涂剂。该配制品可W包 括强馨合助洗剂（例如，含憐助洗剂，如憐酸盐和麟酸盐），并且它还可W包括其他助洗剂 (例如，弱助洗剂或沉淀助洗剂，如碳酸钢、碳酸氨钢和巧樣酸钢）。典型地，不用任何阴离 子型表面活性剂配制液体ADW洗涂剂，但是它们可含有或可不含非离子型表面活性剂。 当配制一种液体餐具清洗（ADW)洗涂剂时，令人希望的是包括一种枯草杆菌蛋白 酶类型的蛋白酶，W便改善蛋白质污物的去除。然而，枯草杆菌蛋白酶在洗涂剂中的储存稳 定性存在着问题。 阳007] WO94/29428披露了包含酶和酶稳定系统的液体ADW洗涂剂，运些洗涂剂不含含 憐助洗剂。WO94/04651和WO2009/118375披露了包含蛋白酶和作为可逆蛋白酶抑制剂的 肤醒的液体洗涂剂。 阳00引概述 诸位专利技术人已经发现，将一种强馨合助洗剂渗入一种液体ADW洗涂剂中趋向于使 得任何存在的枯草杆菌蛋白酶不稳定，但是渗入一种肤醒对于枯草杆菌蛋白酶在包含一种 强馨合助洗剂的液体ADW洗涂剂中的稳定特别有效。 因此，本专利技术提供了一种液体（餐具清洗洗涂剂）组合物，包括： a) -种强馨合助洗剂，[001引b) -种枯草杆菌蛋白酶，W及 C)-种枯草杆菌蛋白酶抑制剂，该抑制剂是一种肤醒或其亚硫酸氨盐加合物或一 种肤甲基酬，其中该甲基可任选地被面素取代，并且其中该肤可任选地具有一个N端保护 基团； 其中该组合物实质上不含阴离子型表面活性剂。 本专利技术的其他方面和实施例在说明书和实例下是显而易见的。 详细说明 枯草杆菌蛋白酶 在本专利技术的上下文中，枯草杆菌蛋白酶家族巧C3.4.21.62)应理解为如下文献 所述：西仁（Siezen)等人，蛋白质工程（Protein化即g. )4(1991)719-737 ;和西仁等人，蛋 白质科学（ProteinScience) 6 (1997) 501-523。如文中所描述的，枯草杆菌蛋白酶家族可W 划分为3个亚组，即I-SU"真正的"枯草杆菌蛋白酶）、I-S2(高碱性蛋白酶）W及细胞内 枯草杆困蛋白酶。 枯草杆菌蛋白酶的实例是来源于芽抱杆菌的那些，如枯草杆菌蛋白酶lentus、迟 缓芽抱杆菌、枯草杆菌蛋白酶Novo、嘉：t伯枯草杆菌蛋白酶（subtilisinCarlsberg)、地 衣芽抱杆菌、枯草杆菌蛋白酶BPN'、枯草杆菌蛋白酶309、枯草杆菌蛋白酶147W及枯草杆 菌蛋白酶168(描述于WO89/06279中）W及蛋白酶PD138(W0 93/18140)。另外的实例 描述于WO98/020115、WO01/44452、WO01/58275、WO01/58276、WO03/006602W及WO 04/099401 中。 有用的变体的实例描述于WO92/19729、WO98/20115、WO98/20116W及WO 98/34946中，尤其是在一个或多个W下位置中具有取代的变体：3、4、9、15、27、36、57、68、 76、87、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、106、118、120、123、128、129、130、160、167、 170、194、195、199、205、206、217、218、222、224、232、235、236、245、248、252W及 274,使用 BPN'编号。更优选地，运些枯草杆菌酶变体可W包括W下突变：S3T、V4I、S9R、A15T、K27R、 *360、V68A、N76D、N87S,R、*97E、A98S、S99G,D,A、S99AD、S101G,M,RS103A、V104I,Y,N、 S106A、G118V，R、H120D，N、N123S、S128L、P129Q、S130A、G160D、Y167A、R170S、A194P、G195E、 V199M、V205I、L217D、N218D、M222S、A232V、K235L、Q236H、Q245R、N252K、T274A(使用BPN' 编号）。 可商购的枯草杆菌蛋白酶的实例包括Kannase?、Everlase?、Primase?、 Duralase?、Esperase?、Alcalase?、Durazym?、Savinase?、Ovozyme?、Liquanase?、 Coronase?、F*olarzyme?、？5^"日36抓^及Clear-LensTMpro;Blaze? (诺维信公司（Novozymes A/S))。其他可商购的蛋白酶包括Ronozyme?P;ro、Maxatase?、Maxacal?、Maxapem?、 Opticle曰n?、Proper曰se?、Pur曰feet?、Pur曰feetOx?、PursfsctPrime?、Excell曰se?、 FN2?、FN3?W及FN4?(可从杜邦公司值upont)获得）。 在本专利技术的一个实施例中，该枯草杆菌蛋白酶是枯草杆菌蛋白酶309或枯草杆菌 蛋白酶BPN'、或任何运些的变体。优选地，该枯草杆菌蛋白酶的氨基酸序列与SEQIDNO: 1 或SEQIDN0:4的氨基酸序列具有至少70%的序列一致性，优选地至少75%，更优选地至 少80%，更优选地至少85%，更优选地至少90 %，更优选地至少95 %、96%、97 %、98%、 99%，并且最优选地100%的序列一致性。在一个实施例中，该枯草杆菌蛋白酶的氨基酸序 列是沈QIDN0:1、SEQIDN0:2、SEQIDN0:3 或沈QIDN0:4。 在一个实施例中，引入SEQ ID NO: I或SEQ ID NO:4的氨基酸序列中的氨基酸取 代、缺失和/或插入的数目多达10个，例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个 或10个；或多达5个，例如1个、2个、3个、4个或5个。运些氨基酸变化可W具有微小性 质，即，不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入；典型地1-30个 氨基酸的小缺失；小的氨基-或簇基-末端延伸，如氨基末端的甲硫氨酸残基；多达20-25 个残基的小接头肤；或便于通过改变净电荷或另一种功能来纯化的小延伸，如聚组氨酸段 (tract)、抗原表位或结合结构域。 保守取代的实例是在下组的范围内：碱性氨基酸（精氨酸、赖氨酸及组氨酸）、酸 性氨基酸（谷氨酸和天冬氨酸）、极性氨基酸（谷氨酷胺和天冬酷胺）、疏水性氨基酸（亮 氨酸、异亮氨酸及鄉氨酸）、芳香族氨基酸（苯丙氨酸、色氨酸及酪氨酸）及小氨基酸（甘 氨酸、丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸及甲硫氨酸）。一般不会改变特异性活性的氨基酸取代是本 领域已知的并且例如由H.诺伊拉特化化urath)和R.L.希尔巧.L.Hill)，1979,在蛋白 质（TheProteins),学术出版社，纽约中描述。常见的取代是Ala/Se;r、Val/Ile、Asp/Glu、 Thr/Ser、Al本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种液体餐具清洗洗涤剂组合物，包括：a)一种强螯合助洗剂，b)一种枯草杆菌蛋白酶，以及c)一种枯草杆菌蛋白酶抑制剂，该抑制剂是一种肽醛或其亚硫酸氢盐加合物或一种肽甲基酮，其中该甲基可任选地被卤素取代，并且其中该肽可任选地具有一个N端保护基团；其中该组合物实质上不含阴离子型表面活性剂。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：H·P·尼尔森，L·M·米克尔森，M·内尔比，J·江，
申请(专利权)人：诺维信公司，
类型：发明
国别省市：丹麦;DK
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