本发明专利技术是基于肿瘤发生特点和治疗难点，分别通过胃癌细胞模型角度和胃癌裸鼠模型角度验证胃铋镁对胃癌的治疗效果，证明其具有抗肿瘤应用价值。细胞学和小鼠成瘤模型实验表明胃铋镁具有抑制肿瘤细胞活性和抑制小鼠成瘤模型的发生与生长的重要抗癌功能，证明了胃铋镁对胃癌具有很好的防治作用。本发明专利技术为胃铋镁药物治疗胃癌的药物研发可能临床应用提供证据。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术设及医药
，具体是胃祕儀对胃癌的防治作用及其各组分药物的抑 癌功能。
技术介绍
胃癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一，是世界范围内第二大致死癌症。胃癌发 病率居我国各类肿瘤的首位，而且死亡率高，我国胃癌的年死亡率达到八十万人，在各种恶 性肿瘤中占首位。胃癌病因是由饮食、环境、幽口螺旋杆菌（H巧感染、机体免疫内分泌失调 等多种因素共同作用的结果，因此其病机是由多个病理过程交织在一起的综合反应。近年 大量研究成果表明，萎缩性胃炎及其伴有的肠化生、细胞异型增生与胃癌的发生存在着密 切关系。萎缩性胃炎常伴有肠化生，有人统计两者并见者占66. 5 %，提示对萎缩性胃炎具有 治疗效果的药物，特别是多祀点的胃炎治疗的组方药物可能具有预防和治疗胃癌的功能。 胃祕儀颗粒是弘美制药中国有限公司研发的具有自主知识产权的国药准字号药 物，对临床上各种胃炎和胃溃瘍和胃黏膜损伤有很好的疗效。胃祕儀为复方制剂，包括侣酸 祕、重质碳酸儀、碳酸氨钢、甘草浸膏粉、弗朗鼠李皮、茵香粉、石富蒲和芦苔组成。其药物具 有很好的胃黏膜保护作用，而其中的祕剂和多种中药活性组分具有细胞信号的调节功能和 机体免疫的调节功能，具有很好的抗肿瘤功能的开发前景。
技术实现思路
本专利技术是基于肿瘤发生特点和治疗难点，分别通过胃癌细胞模型角度和胃癌裸鼠 模型角度验证胃祕儀对胃癌的治疗效果，证明其具有抗肿瘤应用价值，为胃祕儀颗粒的抗 肿瘤作用提供实验依据。 本专利技术利用细胞生物学相关技术，W胃腺癌细胞株SGC-7901为细胞模型，药物浓 度根据说明书定量，对细胞进行诱导。分别对药物诱导后细胞的增值水平，细胞周期的变 化，细胞的调亡进行检测。接着构建胃癌裸鼠皮下荷瘤实验模型，进行动物体内抗肿瘤功能 的研究。结果发现在胃癌细胞SGC-7901细胞中和胃癌裸鼠模型中，胃祕儀显示了良好的肿 瘤抑制效应，而且具有显著的剂量依赖性，且肿瘤抑制效果优于=联药。胃祕儀药物对细胞 调亡的显著促进作用，具有肿瘤杀伤效应，其机制主要通过胃祕儀，特别是其中的中药组份 改变细胞周期，发生G1和G2期阻滞来实现的。其中药组分中的弗朗鼠李皮，茵香和石富蒲 发挥显著的抑制胃癌细胞增殖、促进细胞调亡的作用。 本专利技术中设及的胃祕儀对胃癌的防治作用及其各组分药物的抑癌功能的研究共 包括W下几个步骤： 第一步，细胞学实验检测胃祕儀抗肿瘤功能 1.细胞增殖实验 取对数生长期的SGC-7901细胞制成单细胞悬液，接种96孔板，细胞培养箱中培养 24小时后，分别加入不同浓度的药物，每组设置=个对照孔，在48小时测胃祕儀对胃癌细 胞增殖的影响； 2.细胞周期实验 将不同浓度的药物处理48小时的SGC-7901细胞经膜酶消化后，制成单细胞胞悬 液，用流式细胞术检测胃癌细胞的细胞周期是否发生变化。 3.化echst33342染色检测细胞调亡实验 将不同浓度的药物处理48小时的SGC-7901进行化echs口3342染色，免疫巧光显 微镜下观察拍照。 第二步，裸鼠体内成瘤模型检测胃祕儀对肿瘤的抑制作用 构建小鼠皮下肿瘤模型，10天后皮下生长肿瘤，接种次日开始灌胃，设置经典=联 疗法药物（埃索美拉+克拉霉素+阿莫西林）作为对照组，设置生理盐水喂食组。一段时 间后，观察皮下肿瘤生长情况。比较各组肿瘤的发生率，肿瘤大小，绘制生长曲线，25天后， 处死小鼠，剥离肿瘤，称量重量。 胃祕儀颗粒在研究中显示了良好的肿瘤抑制效应，而且具有显著的剂量依赖性， 且肿瘤抑制效果优于=联药效果，证明了胃祕儀对胃癌具有很好的防治作用。为胃祕儀药 物治疗胃癌的药物研发可能临床应用提供证据。【附图说明】： 图1为各种药物对胃癌SGC-7901细胞活性的作用效果 图2为胃祕儀及其中药化药总组分对胃癌SGC-7901细胞活性的作用效果 图3为胃祕儀化药总组分和各种组分对胃癌SGC-7901细胞活性的作用效果 图4为胃祕儀化药总组分和各种组分对胃癌SGC-7901细胞活性的作用效果 图5为胃祕儀各药物成分处理SGC-7901细胞PI染色检测细胞周期 图6为胃祕儀各药物成分处理SGC-7901细胞化echst33342染色检测细胞调亡 图7为小鼠成瘤模型肿瘤生长大小图 图8为小鼠成瘤模型肿瘤生长曲线图【具体实施方式】：实施例1:细胞学实验检测胃祕儀抗肿瘤功能 1.药物对肿瘤细胞增殖抑制效应的研究 利用0. 25%膜蛋白酶消化胃癌SG口901细胞，用含10%胎牛血清的DMEM制成细 胞悬液，W每孔2X103cells接种于96孔板中，每孔培养液200y以第二天细胞更换成1 % FBS的DMEM培养，并加入各种药物，分别按2地，48h，72h，9化培养后，每孔加入M1T溶液 巧g/L) 20y以37°C，继续解育地，终止培养，小屯、吸弃孔内培养上清液.每孔加入150yL DMS0,振荡lOmin，使结晶物充分溶解.选择450皿波长和620皿波长，用A450nm-A620皿表 示吸光度，在酶联免疫检测仪上测定各孔光吸收值.W时间为横轴，吸收值为纵轴绘制细 胞增殖曲线。[002引首先我们检测了S联药物和胃祕儀分别对胃癌细胞的作用效果。药物浓度根据 说明书定量，将如下浓度作为药物处理的1倍浓度，如表1.同时设置此浓度条件下的1/3 浓度作为低浓度，3倍浓度作为高浓度，每种药物采用=个浓度作为实验浓度作用于胃癌 SGC-7901细胞。药物分别诱导48虹后，细胞增殖如【图1】所表示。当前第1页1 2 本文档来自技高网...
【技术保护点】
本专利技术涉及一种对胃癌有防治作用的新药胃铋镁，此药物为复方制剂，包括铝酸铋、重质碳酸镁、碳酸氢钠、甘草浸膏粉、弗朗鼠李皮、茴香粉、石菖蒲和芦荟，其中有效成分主要是弗朗鼠李皮、茴香和石菖蒲，其特征是：通过构建胃腺癌细胞株SGC‑7901的细胞模型和胃癌裸鼠皮下荷瘤实验模型，胃铋镁及其主要有效成分弗朗鼠李皮、茴香和石菖蒲能够有效的抑制胃癌细胞生长，阻滞胃癌细胞周期，促进胃癌细胞凋亡。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李晓萌，乔巍，邸军，张琦，崔英，李江，
申请(专利权)人：东北师范大学，
类型：发明
国别省市：吉林;22
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