本发明专利技术提供一种用固定化磷脂酶C对大豆油脱胶的方法。脱胶就是脱除大豆油中的磷脂，磷脂主要分为水化磷脂和非水化磷脂，水化磷脂具有亲水性，可通过水化方法脱除，而非水化磷脂具有明显的疏水性，是以磷脂酸(PA)和溶血磷脂酸的钙镁盐的形式存在的，较难除去。而磷脂酶C能特异性水解磷酸基与甘油基之间的磷氧键，生成甘油二酯，甘油二酯溶于油中成为食用油的一部分；用该方法得到大豆油磷含量约在15.61mg/kg、1,2-甘油二酯(DAG)增加率为1.25％。因此，采用磷脂酶C脱胶，既能实现物理精炼，又可减少毛油炼耗，提高精炼率。
【技术实现步骤摘要】
:本专利技术涉及一种用固定化磷脂酶C对大豆油脱胶的方法。
技术介绍
:油脂是人类生存不可缺少的食品，油脂加工业也备受关注，随着油脂工业的发展及人们对油脂加工原理的进一步认识，油脂加工技术有了新进展。在油脂加工工业中，油脂脱胶一直是人们关注的焦点之一，脱胶就是脱除油中的胶溶性杂质，主要成分是磷脂。磷脂主要分为水化磷脂和非水化磷脂，水化磷脂可通过传统的水化脱胶方法除去，但非水化磷脂具有显著的疏水性，很难脱除。而传统的脱胶方法主要有水化脱胶、酸炼脱胶、吸附脱胶、超滤脱胶和酶法脱胶。在这些脱胶工艺中，酶法脱胶以其良好的经济环保性能受到越来越多的重视。由于磷脂酶C能特异性水解磷酸基与甘油基之间的磷氧键，生成甘油二酯，甘油二酯溶于油中成为食用油的一部分；因此，采用磷脂酶C脱胶，既能实现物理精炼，又可减少毛油炼耗，提高精炼率。
技术实现思路
为了克服常规脱胶法生产脱胶油的缺陷，适应现代技术发展，满足市场的需求，我们提出了一种经过改进的脱胶工艺。本专利技术的步骤如下:步骤一:磷脂酶C的固定化；步骤二:固定化磷脂酶C脱胶油相中起始pH值的确定，取一定量的水化脱胶油，加入一定量的固定化磷脂酶C，pH在为5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0，在一定的时间、温度及搅拌速度下进行脱胶反应，然后取样以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1，2-甘油二酯(DAG)增加率，确定油相中起始pH值；步骤三:脱胶时间的确定，取一定量的水化脱胶油，加入一定量的固定化磷脂酶C，调至最适油相中起始pH值，选择不同的脱胶时间，0.5h、1.0h、l.5h、2.0h,2.5h、3.0h，在一定的温度及搅拌速度下进行脱胶反应，然后取样以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1，2-甘油二酯(DAG)增加率，确定脱胶时间；步骤四:脱胶温度的确定，取一定量的水化脱胶油，加入一定量的固定化磷脂酶C，调至最适油相中起始pH值，选择不同的脱胶温度，40°C、45 °C、50°C、55 °C、60°C、65 °C，在一定的搅拌速度下反应确定的时间，然后以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1，2-甘油二酯(DAG)增加率，确定脱胶温度；步骤五:固定化酶添加量的确定，取一定量的水化脱胶油，调至最适油相中起始pH 值，固定化酶添加量为 0.06g/Kg、0.08g/Kg、0.10g/Kg、0.12g/Kg、0.14g/Kg、0.16g/Kg，在确定的时间、确定的温度以及一定的搅拌速度下进行脱胶反应，然后以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1，2-甘油二酯(DAG)增加率，确定固定化酶添加量；步骤六:搅拌速度的确定，取一定量的水化脱胶油，加入确定量的固定化磷脂酶C，调至最适油相中起始pH值，选择不同的搅拌速度100r/min、150r/min、200r/min、250r/min、300r/min、350r/min，在确定的时间、确定的温度下行脱胶反应，然后以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1，2-甘油二酯(DAG)增加率，确定搅拌速度。本专利技术的有益点是:1、采用固定化方法处理磷脂酶，使其稳定性增强，提高其对反应环境的适应能力，同时解决了酶的一次性使用和产物分离纯化难等问题；2、磷脂酶C能特异性水解磷酸基与甘油基之间的磷氧键，生成甘油二酯，甘油二酯溶于油中成为食用油的一部分，甘油二酯是一种生理活性物质，能影响细胞的代谢，是细胞信号传导途径上的第二信使。因此，采用磷脂酶C脱胶，既能实现物理精炼，又可减少毛油炼耗，提高精炼率。本专利技术的关键是脱胶条件的确定，包括油相中起始pH值、脱胶时间、温度、固定化酶添加量及搅拌速度。按照最佳工艺参数试验，得到脱胶油，测其磷含量约在15.61mg/kg、1，2-甘油二酯(DAG)增加率为1.25%。【具体实施方式】:【具体实施方式】一:本实施方式的步骤如下:步骤一:磷脂酶C的固定化；称取一定量的海藻酸钠于40°C水浴保温溶解，同时称取一定量的壳聚糖于5%的醋酸溶液中，40°C水浴保温溶解，再向完全溶解的壳聚糖醋酸溶液中加入一定量的CaCl2溶液，充分混匀。称取一定量的磷脂酶C，加入到1mL海藻酸钠溶液中，搅拌均匀，静置一段时间，用灭菌后的注射器吸取混合液，以约5滴/s的速度注入壳聚糖醋酸溶液、CaCV混合溶液中，以180r/min转速搅拌，将其置于4°C环境固定化1h ；步骤二:固定化磷脂酶C脱胶油相中起始pH值的确定，取一定量的水化脱胶油，加入一定量的固定化磷脂酶C，pH在为5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0，在一定的时间、温度及搅拌速度下进行脱胶反应，然后取样以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1，2-甘油二酯(DAG)增加率，确定油相中起始pH值；步骤三:脱胶时间的确定，取一定量的水化脱胶油，加入一定量的固定化磷脂酶C，调至最适油相中起始pH值，选择不同的脱胶时间，0.5h、1.0h、l.5h、2.0h,2.5h、3.0h，在一定的温度及搅拌速度下进行脱胶反应，然后取样以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1，2-甘油二酯(DAG)增加率，确定脱胶时间；步骤四:脱胶温度的确定，取一定量的水化脱胶油，加入一定量的固定化磷脂酶C，调至最适油相中起始pH值，选择不同的脱胶温度，40°C、45 °C、50°C、55 °C、60°C、65 °C，在一定的搅拌速度下反应确定的时间，然后以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1，2-甘油二酯(DAG)增加率，确定脱胶温度；步骤五:固当前第1页1 2 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用固定化磷脂酶C对大豆油脱胶的方法，其特征在于它的步骤如下：步骤一：磷脂酶C的固定化；称取一定量的海藻酸钠于40℃水浴保温溶解，同时称取一定量的壳聚糖于5％的醋酸溶液中，40℃水浴保温溶解,再向完全溶解的壳聚糖醋酸溶液中加入一定量的CaCl2溶液，充分混匀；称取一定量的磷脂酶C，加入到10mL海藻酸钠溶液中，搅拌均匀，静置一段时间，用灭菌后的注射器吸取混合液，以约5滴/s的速度注入壳聚糖醋酸溶液、CaCl2混合溶液中，以180r/min转速搅拌，将其置于4℃环境固定化10h；步骤二：固定化磷脂酶C脱胶油相中起始pH值的确定，取一定量的水化脱胶油，加入一定量的固定化磷脂酶C，pH在为5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0，在一定的时间、温度及搅拌速度下进行脱胶反应，然后取样以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1,2‑甘油二酯(DAG)增加率，确定油相中起始pH值；步骤三：脱胶时间的确定，取一定量的水化脱胶油，加入一定量的固定化磷脂酶C，调至最适油相中起始pH值，选择不同的脱胶时间，0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h，在一定的温度及搅拌速度下进行脱胶反应，然后取样以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1,2‑甘油二酯(DAG)增加率，确定脱胶时间；步骤四：脱胶温度的确定，取一定量的水化脱胶油，加入一定量的固定化磷脂酶C，调至最适油相中起始pH值，选择不同的脱胶温度，40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃，在一定的搅拌速度下搅拌确定的时间进行脱胶反应，然后以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1,2‑甘油二酯(DAG)增加率，确定脱胶温度；步骤五：固定化酶添加量的确定，取一定量的水化脱胶油，调至最适油相中起始pH值，固定化酶添加量为0.06g/Kg、0.08g/Kg、0.10g/Kg、0.12g/Kg、0.14g/Kg、0.16g/Kg，在确定的时间、确定的温度以及一定的搅拌速度下进行脱胶反应，然后以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1,2‑甘油二酯(DAG)增加率，确定固定化酶添加量；步骤六：搅拌速度的确定，取一定量的水化脱胶油，加入确定量的固定化磷脂酶C，调至最适油相中起始pH值，选择不同的搅拌速度100r/min、150r/min、200r/min、250r/min、300r/min、350r/min，在确定的时间、确定的温度下行脱胶反应，然后以4500r/min离心分离20min，取上层脱胶油5g，测其磷含量及1,2‑甘油二酯(DAG)增加率，确定搅拌速度。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：于殿宇，刘天一，刘丹怡，江连洲，王立琦，王文华，
申请(专利权)人：东北农业大学，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23
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