【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于啤酒
,用于啤酒污染菌检测方法,特别涉及一种基于多重 PCR技术以及毛细管电泳分离技术,用于啤酒中污染菌巨型球菌和果胶杆菌及乳酸片球菌 的快速筛选方法。
技术介绍
啤酒的酿造过程是建立在纯啤酒酵母的发酵和对污染微生物控制的基础上的,啤 酒中主要的污染微生物是乳酸菌(Lactobacillus),此外,还有巨型球菌(Megasphaera)、 果胶杆菌(Pectinatus)和乳酸片球菌Pediococcus)。厌氧菌Megasphaer属巨型球菌、 Pectinatus属果胶杆菌和Pediococcus属乳酸片球菌会产生异味物质和引起啤酒浑池,从 而引起啤酒变质。 对于啤酒微生物的检测方式主要分为两类,第一类是基于培养基的传统培养法, 国内外大多数啤酒厂采用此类方法,但检测时间长,且只能定量不能定性到种属,因此无法 及时指导生产技术人员对啤酒生产过程进行监控;第二类是基于PCR技术的分子生物学检 测方法,PCR技术从核酸、基因水平极大地提高了检测效率及灵敏度,能够定性到种、属或一 类目标菌,检测快速且定性能力强,因此无论对于成品啤 ...
【技术保护点】
一种能同时鉴定巨型球菌、果胶杆菌、乳酸片球菌三种啤酒污染菌的快速检测方法,其特征在于该方法包括以下步骤:步骤(1)、啤酒污染菌的培养及DNA模板提取:将检测啤酒样品在厌氧环境中静置过夜富集培养,过滤收集细胞沉淀;然后在细胞沉淀中依次加入50mM EDTA 480ul、10mg/ml溶菌酶120ul,37℃孵育60min,13,000×g离心2min,移去上清液;最后采用试剂盒提取啤酒污染菌的DNA模板;步骤(2)、多重PCR扩增:将多重PCR扩增反应体系振荡混匀后,进行多重PCR扩增,得到扩增产物;所述的多重PCR扩增反应体系为20ul由100nM正向混合引物2ul,100 ...
【技术特征摘要】
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