用于药物用途的脂肪酶变体制造技术

本发明专利技术涉及用于药物用途的脂肪酶变体，具体地涉及与包含SEQ ID NO:2的氨基酸1-269的细毛嗜热霉(疏棉状腐质霉)脂肪酶相关的脂肪酶的药物用途，所述脂肪酶任选地与蛋白酶和/或淀粉酶组合。医学适应症的实例是：治疗消化性病症、胰腺外分泌机能不全(PEI)、胰腺炎、囊性纤维化、I型糖尿病和/或II型糖尿病。本发明专利技术的脂肪酶具有，例如，改进的体外消化性能，在中性范围pH下改进的活性，在低pH下改进的稳定性，针对蛋白酶降解是稳定的，和/或在胃蛋白酶和胆汁盐存在下是稳定的。本发明专利技术还涉及测定脂肪酶体外消化性能的方法，以及细毛嗜热霉的脂肪酶的某些新变体。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种用作药物的脂肪酶，所述脂肪酶(a)与SEQ ID NO:2的氨基酸1‑269的序列具有至少50％同一性；(b)具有脂肪酶活性；并且其(c)与SEQ ID NO:2的氨基酸1‑269的序列相比，包含取代N33Q、T231R和N233R，以及至少一个选自下列的额外的取代：E1*,D,N；Q4H,P,R；D5E；N8L,Q；Q9H；F10L；N11C,D,H,L,P,Q,R,S；G23E；N26A,H,I；D27I,N,Q,R,S,V；P29T；A30T,V；T37K,M；G38A,D,F,H,I,K,L,M,N,P,Q,S,T,W,Y；N39H,S；E43K；K46M；A49T；L52I,R；E56K,Q,R,S；D57G,N；V60E,S；G61R；V63R；A68V；L69I；N71I,S；N73Q,Y；I76T；R84E；I86F,L；E87A,H,K,R；I90L,V；G91A,C,E,F,K,L,M,N,S,T,V,W,Y；L93*,F；N94*,K,Q,R,S；F95*；D96*,E,G,N,R,W,Y；L97M,Q；K98I,T；E99D；N101Q；D102E,G,Y；R108M；G109A；D111A,E,N,S；G112A；T114I；S115L；W117C,D,E,F,G,H,I,K,L,P,S,T,V,Y；D122E,N；Q126L；V128A；D130H；H135D；P136H；Y138F；V141E,L；A150V；V154F,I,L；A155V；G156R；G161A,E；N162G,S,T；G163A,C,D,E,H,I,K,L,M,N,P,Q,R,S,T,V,W,Y；D167E；V168M；V176A,D,F,G,H,I,K,M,N,Q,T,W；G177A；R179T；L185M；G190C,D；N200Q,S；R205I；L206F；E210D,R,V,Y；S216P；E219D；G225P；T226N；L227F,G；P229R；E239D；G240L；D242E；T244S；G246A；N251Q,S；D254A,G,I,K,L,M,N,R,Q,S,Y；I255A,F；P256A,F,G,H,I,L,M,N,Q,S,T,V,W,Y；和L269F,H。...

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：阿伦·斯文德森，迈克尔·斯克乔伊特，戴比·亚弗，拉斯·L·H·克里斯滕森，西格恩·E·拉森，尼娜·伦丁，迈克尔·拉姆萨，彼得·C·格雷戈里，
申请(专利权)人：诺维信公司，诺维信股份有限公司，
类型：发明
国别省市：丹麦;DK