因子VII组合物制造技术

本发明专利技术涉及因子VII组合物。更具体而言，本发明专利技术涉及包含因子VII的液体或固体形式的稳定的药物组合物，所述组合物不含甘露醇和蔗糖，以及也不含任何抗氧化剂。

【技术实现步骤摘要】
【专利说明】 本申请为国际申请日2010年6月18日、国际申请号PCT/FR2010/051229于2011 年12月26日进入中国国家阶段、申请号201080028582. 4、专利技术名称"因子VII组合物"的 分案申请。
本专利技术涉及包含因子VII (FVII)的稳定的药物组合物。
技术介绍
凝结现象包含涉及凝结因子的级联酶反应，其中几种凝结因子是在其活性位点中 包含丝氨酸的蛋白酶。最后一步是将可溶性纤维蛋白原转变成在网状结构中包绕循环细胞 的纤维蛋白丝。凝结因子用从I至XIII的数字表示，除了参与凝结的最后一步的因子XIII 之外，其他因子以与它们的编号相反的次序参与凝结；因此，因子XII启动凝结，因子I终止 它。每种因子都以无活性的前体形式和用字母a表示的活化形式存在。 凝结涉及两条途径，一条为内源性途径，另一条为外源性途径，产生共同的最终途 径。两种机制的组合确保形成固体和柔性的血凝块，其能够抵抗血压并在同时保证足够的 移动性。在凝血酶的作用下，纤维蛋白原经历化学修饰，导致形成纤维蛋白。纤维蛋白是凝 块形成所必需的。 内源性途径包括循环中存在的因子，并且凝结过程就在血管内开始。外源性途径 的一部分涉及通常不存在于循环中、而是在血管损伤期间释放的组织因子。当该途径被激 活时发生链反应，在此期间活化的凝结因子引发后续凝结因子的活化。该途径涉及血浆中 存在的因子VII (FVII)的干预。活化的因子VII，也称为转变素原，是参与血凝机制的因子 之一，其具有约50kDa的分子量。它是一种丝氨酸蛋白酶家族的糖蛋白，其活化形式的合成 是维生素K依赖性的。为了引发凝结级联反应，必须将FVII活化成FVIIa。单独的FVIIa (未 复合的）具有弱蛋白水解活性。然后，在活化后，FVIIa与组织因子（TF)复合，该组织因子 是在血管损伤期间释放的磷脂结合蛋白。FVIIa-TF复合物随后在钙离子存在下将因子X转 变成因子Xa。该复合物也作用于FIX向FIXa的活化，从而催化内源性途径。因子IXa和 Xa又激活活化的因子VII。与活化的因子FV并与凝血酶原酶复合的因子Xa将凝血酶原转 变成凝血酶。然后凝血酶作用于纤维蛋白原以便将其转变成纤维蛋白，并且也允许分别从 FVII I和FV活化FVII la和FVa。凝血酶的部分功能是当存在钙时，能够活化因子XII Ia，有 助于强化纤维蛋白凝块。 然而，当缺乏凝结因子时，级联反应中断或有缺陷，其可以用术语凝结异常来描 述。 在引起出血的组织损伤后释放的组织因子存在下，即使在不存在因子VIII或IX 的情况下，活化的因子VII在局部发挥作用。因此，优选处于活化形式的因子VII，长时间以 来被用于治疗某些表现为出血的血凝障碍。该因子参与许多病理状况，例如其中患者表现 出因子VIII或IX抑制剂的A型或B型血友病、获得性血友病或先天性因子VII缺陷症，并 作为用于阻止在外科手术期间可能发生的出血的产品。 目前，市场上可获得的用于治疗这些患有血友病或先天性因子VII缺陷症的患者 的药物是已知的。它是由丹麦公司NovoNordisk生产的NovoSeven 8，其从1996年起被 批准在欧洲上市，并在1999年被批准在美国上市。NovoSevenfr是活性成分为eptacog alfa(从BHK幼仓鼠肾细胞通过遗传工程生产的重组人活化凝结因子VII)的药物。该产 品还含有氯化钠（2.92g/l)、二水氯化钙（1.47g/l)、甘氨酰甘氨酸（1.32g/l)、聚山梨酸酯 80(0.07g/l)和甘露醇（30g/l)。 还存在被称为NovoSeveil?RT的NovoSeven的变化形式，其能够使产品在室温 (25°C)下储存。该第二种产品含有氯化钠（2.92g/l)、二水氯化钙（1.47g/l)、甘氨酰甘氨 酸（1.32g/l)、聚山梨酸酯80(0.07g/l)、甘露醇（25g/l)以及用于调节pH的盐酸和氢氧化 钠，并且还包含蔗糖（l〇g/l)和甲硫氨酸（〇.5g/l)(用作抗氧化剂）。将该产品重调成溶 液需要注射用水，但是还需要组氨酸。NovoSeven K RT在2008年被批准在欧洲和美国上 市。 重组FVIIa(rFVIIa)的主要治疗适应症涉及在已发展出抗因子VIII抗体的A型 血友病患者和已发展出抗因子IX抗体的B型血友病患者中治疗自发出血或手术出血。在 欧洲，它也被指示用于患有先天性FVII缺乏症和患有格兰茨曼血小板机能不全的患者。此 外，大量出版物报告了 rFVIIa在既没有凝结因子的先天性缺乏症也没有血小板机能不全 的患者中，在控制手术过程期间的出血中的效用。 Nedergaard等，2008的文章讲授了 NovoSevenl( RT在其冷冻干燥形式下，在25°C下在24个月时间内保持稳定，在30°C下在 12个月内、在40°C下在6个月内并且在50°C和60°C下在12小时内保持稳定。此外，该产 品在其液体重构后仅稳定6小时，因此推荐在重构后3小时内进行注射。因此，由于这种稳 定性，该产品在给药时间方面显示出操作困难性和限制。 专利EP 1 210 361公开了甘氨酰甘氨酸用于使活化的因子VII的冷冻干燥组合 物稳定的优点。 专利申请W0 2004/000347提出了各种其他稳定剂。 Soenderkaer S?等，2004 的出版物描述了 蔗糖作为必需赋形剂用于稳定活化的因子VII以对抗聚集和热变性。根据该讲授内容，通 过从蛋白质表面排斥糖以便能够增加分子的化学势，蔗糖能够使蛋白质在水性溶液中保持 其天然形式。结果，并且通过减小其表面积，蛋白保持紧凑构型。作为赋形剂的蔗糖的存在 能够使冷冻干燥形式的活化的因子VII稳定。 然而，蔗糖的存在导致在制剂中引入抗氧化化合物，引起与添加这种类型的化合 物相关的技术和管理限制。 因此，目前，对于开发含有因子VII、不含抗氧化剂、在室温下具有化学和物理稳定 性、并且便于患者特别是患有血友病或先天性因子VII缺陷症的患者使用的药物，存在着 真正的需求。
技术实现思路
本专利技术提供了采取液体形式或固体形式的药物组合物，其包含因子VII、优选为因 子Vila形式，并且所述组合物不含甘露醇和蔗糖。 根据一个优选实施方案，组合物也不含任何抗氧化剂。 优选情况下，组合物包含至少一种亲水性氨基酸或带有带正电荷的侧链的氨基 酸，例如精氨酸。 根据一个优选实施方案，本专利技术的组合物包含因子VII、至少一种亲水性氨基酸或 带有带正电荷的侧链的氨基酸、至少一种疏水性氨基酸以及碱金属盐、碱土金属盐或过渡 金属盐，所述组合物不含甘露醇和蔗糖。 有利情况下，固体形式的组合物可以采取粉末或饼状物（或塞状物）的形式。组 合物优选具有小于或等于3 %的水分含量。根据一个具体实施方案，组合物采取冷冻干燥形 式。 本专利技术的另一个主题是制备这种组合物的方法，所述方法包含将FVII与缓冲溶 液混合，如果需要的话调整PH，并进行过滤以便获得液体形式。该液体形式随后可以经历干 燥以便获得固体形式。 术语"缓冲溶液"包括至少一种亲水性氨基酸或带有带正电荷的侧链的氨基酸，以 及碱金属盐、碱土金属盐或过渡金属盐。 有利情况下，缓冲溶液还包含至少一种疏水性氨本文档来自技高网...

【技术保护点】
包含因子VII的药物组合物，所述组合物采取液体或固体形式，并且不含甘露醇和蔗糖。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：安尼·巴尔达特，科尔内留斯·蓬佩，
申请(专利权)人：分馏及生物技术法国实验室，
类型：发明
国别省市：法国;FR