一种蓝莓美登初代培养的培养基及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种蓝莓美登初代培养的培养基，按照质量百分比由以下组分组成：改良WPM培养基12.724%、玉米素0.01%、吲哚丁酸0.002%、葡萄糖74.79%、植物凝胶12.474%。本发明专利技术还公开了上述培养基的制备方法和应用。本发明专利技术的培养基中的激素配比合理，将初代培养和生根培养合为一步，初代培养的过程中茎段就能够生根，简化培养流程，缩短培养时间；使用此初代培养基提高初代培养植株的萌芽数，植株生长健壮，有利于下一步继代扩繁。

【技术实现步骤摘要】
一种蓝莓美登初代培养的培养基及其制备方法和应用
本专利技术属于组织培养
，特别涉及一种蓝莓美登初代培养的培养基及其制备方法和应用。
技术介绍
在蓝莓组织培养快繁的过程中，最重要的是第一步，初代培养。初代培养的成功与否直接决定后期组培苗的快繁。而初代培养中培养基配方是至关重要的，直接关系到影响初代苗木的成活率以及蓝莓植株的繁殖系数以及繁殖的速度。目前针对不同的蓝莓品种，已经报道的初代培养的培养基有许多种。但是目前已经公开发表的培养基的配方都是针对不同的品种而言的，并不是一种培养基配方就适合所有的蓝莓初代培养。因此每一个不同的蓝莓品种都需要针对其品种特点有不同的培养基配方。与此同时，蓝莓生根非常难，无论是组培苗还是大田植株，生根都比较困难，因此在初代培养阶段的培养基也要有利于蓝莓的生根才能够使蓝莓更好的的成活增殖。美登(Blomidon)，矮丛蓝莓品种。加拿大农业部肯特维尔研究中心从野生矮丛蓝莓品种Augusta与451杂交育成，中熟种。果实圆形、淡蓝色，果粉多，有香味，风味好。树势强，丰产。株产1-2kg。抗寒力极强，在我国东北大小兴安岭和长白山区可安全露地越冬。为高寒山区发展蓝莓的首推品种。目前已发表的关于美登蓝莓的相关文献资料中，还没有专门针对美登的组织培养快繁而试验的培养基配方。因此美登的组织培养快繁培养基配方目前还属空白。本专利技术通过多次试验，研究出最适合蓝莓‘美登’的初代培养基配方。
技术实现思路
专利技术目的：本专利技术所要解决的第一个技术问题是提供了一种蓝莓美登初代培养的培养基。本专利技术经过试验获得蓝莓‘美登’的初代培养快培养基配方，解决生产上蓝莓‘美登’苗木的快速繁殖问题，为蓝莓‘美登’提供更多优质苗木，创造更大经济效益。本专利技术所要解决的第二个技术问题是提供了一种蓝莓美登初代培养的培养基的制备方法。本专利技术所要解决的第三个技术问题是提供了一种蓝莓美登初代培养的培养基在培养蓝莓美登方面的应用。技术方案：为了解决上述技术问题，本专利技术所采用的技术方案为：一种蓝莓美登初代培养的培养基，按照质量百分比由以下组分组成：改良WPM培养基12.724％、玉米素0.01％、吲哚丁酸0.002％、葡萄糖74.79％、植物凝胶12.474％。其中，改良WPM培养基按照质量百分比包括大量元素74.1％～74.9％、微量元素1.27％～1.39％、铁盐0.35％～0.425％、钙盐19.5％～19.71％、有机物3.76～4.57％。本专利技术经过多次试验，筛选出最适合蓝莓‘美登’初代培养的培养基配方。改良WPM培养基，是根据已经报道的WPM培养基配方的基础上，根据蓝莓生长的特殊需要改进得到的。其中，所述大量元素包括KNO3900～1100mg/L、(NH4)2SO4270～330mg/L、MgSO4·7H2O360～440mg/L和KH2PO4180～220mg/L。优选地，本专利技术的大量元素(KNO3硝酸钾1000mg/L、(NH4)2SO4硫酸铵300mg/L、MgSO4·7H2O七水合硫酸镁400mg/L、KH2PO4磷酸二氢钾200mg/L)；和原来的WPM培养基相比较，原来的培养基大量元素(KNO3硝酸钾400mg/L、MgSO4·7H2O七水合硫酸镁370mg/L、KH2PO4磷酸二氢钾170mg/L、K2SO4硫酸钾900mg/L)，四种药品营养不均衡，尤其是N元素含量低，不利于蓝莓生长，因此改良后添加(NH4)2SO4硫酸铵300mg/L，而去掉K2SO4硫酸钾，因为钾元素在KNO3硝酸钾中能够充分提供。其中，所述微量元素包括KI1.0～1.1mg/L、MnSO4·4H2O18～22mg/L、ZnSO4·7H2O6～10mg/L、H3BO34～6mg/L。(优选地，KI碘化钾1.1mg/L、MnSO4.4H2O四水合硫酸锰20mg/L、ZnSO4.7H2O七水合硫酸锌8mg/L、H3BO3硼酸5mg/L)；原有的微量元素(1.1mg/L、MnSO4.H2O水合硫酸锰22.3mg/L、ZnSO4.7H2O七水合硫酸锌8.6mg/L、H3BO3硼酸6.2mg/L、CuSO4.5H2O五水合硫酸铜0.025mg/L，NaMoO4钼酸钠0.25mg/L)这个配方没有常用的微量元素KI碘化钾，根据我们的试验，添加碘化钾对植物生长有好处，因此添加了碘化钾，五水合硫酸铜0.025mg/L，NaMoO4钼酸钠0.25mg/L这两个物质在培养基中用的量非常少，去掉这两个物质发现植株生长没有变化，因此为了配置母液更加便利，去掉了这两个物质。其中，所述铁盐为乙二胺邻二羟基乙酸铁。(原有的配方需要硫酸亚铁27.8mg/L和乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L配置，过程繁琐，而且乙二胺四乙酸二钠不溶于水，配制时时间较长)，新的培养基直接使用Fe-EDDHA乙二胺邻二羟基乙酸铁10mg/L，配置过程简单，植物生长效果更好。其中，所述钙盐为二水合氯化钙。原有培养基用氯化钙150mg/L和硝酸钙556mg/L配置，改进后直接用CaCl2.2H2O二水合氯化钙500mg/L就能够满足植物对钙元素的需求，而且配制更方便)；其中，所述有机物为肌醇80～120mg/L、烟酸0.8～1.2mg/L、维生素B10.4～0.6mg/L、维生素B60.8～1.2mg/L、维生素C4～6mg/L。有机元素和原有的配方比较，增加了维生素C元素，维生素C的增加，能够延缓植株茎段衰老，并且抑制茎段的褐化，在培养过程中极大提高茎段的成活率。ZT：玉米素(Zeatin)是存在于高等植物的一种天然植物细胞分裂素不仅促进侧芽生长，刺激细胞分化(侧端优势)，促进愈伤组织和种子发芽，还能防止叶片衰老，逆转芽部受到的毒素伤害和抑制过度根部形成。高浓度的玉米素还能产生不定芽分化。IBA：吲哚丁酸，是组织培养中常用的植物生长调节剂。能够刺进植物生根本。试验中配制成1mg/mL的母液供配制培养基使用。不同于以往试验，本实验中用葡萄糖代替蔗糖，蓝莓植株生长更健壮。植物凝胶Phytagel从假单胞菌分泌而来的一种琼脂的替代物，是葡萄糖醛酸、鼠李糖和葡萄糖的混合物，具有无色、透亮和高韧性的特点，用于蓝莓的组织培养中能够使培养基的酸碱度更加稳定，蓝莓植株更好生长。培养基PH值：蓝莓‘美登’组织培养对PH值的要求比较严格，过高或者过低都会造成植株生长不好，或者死亡，因此一定要精准调节PH值。其中，所述培养基的pH值为5.4～5.6。上述的一种蓝莓美登初代培养的培养基的制备方法，包括以下步骤：将上述的组分按照要求的量加入每种材料，煮沸使所有材料充分混匀溶解，调培养基PH到5.4～5.6，分装在需要的容器中进行高温高压灭菌20分钟。上述的一种蓝莓美登初代培养的培养基在培养蓝莓美登方面的应用。有益效果：与现有技术相比，本专利技术具有如下的特色及优点：本专利技术的培养基中的激素配比合理，将初代培养和生根培养合为一步，初代培养的过程中茎段就能够生根，简化培养流程，缩短培养时间；使用此初代培养基提高初代培养植株的萌芽数，植株生长健壮，有利于下一步继代扩繁。具体实施方式下面通过具体的实施例对本专利技术进一步说明，应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术原理的前提下，还可以做出若干变型和改进，这些也应视为本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蓝莓美登初代培养的培养基，其特征在于，按照质量百分比由以下组分组成：改良WPM培养基12.724%、玉米素0.01%、吲哚丁酸0.002%、葡萄糖74.79%、植物凝胶12.474%。

【技术特征摘要】
1.一种蓝莓美登初代培养的培养基，其特征在于，按照质量百分比由以下组分组成：改良WPM培养基12.724%、玉米素0.01%、吲哚丁酸0.002%、葡萄糖74.79%、植物凝胶12.474%，所述改良WPM培养基按照质量百分比由以下组分组成：大量元素74.1%～74.9%、微量元素1.27%～1.39%、铁盐0.35%～0.425%、钙盐19.5%～19.71%、有机物3.76～4.57%，所述大量元素包括KNO3900～1100mg/L、(NH4)2SO4270～330mg/L、MgSO4·7H2O360～440mg/L和KH2PO4180～220mg/L，所述微量元素包括KI1.0～1.1mg/L、MnSO4·4H2O18～22mg/L、ZnSO4·7H2...

【专利技术属性】
技术研发人员：王媛花，史红林，颜志明，王全智，
申请(专利权)人：江苏农林职业技术学院，
类型：发明
国别省市：江苏;32