样品制备纸盒制造技术

记载了一种样品制备盒，其具有下部，该下部有四个一体形成的板弹簧和略低于板弹簧平面的凸起的下底座部。盒的上部与下部通过形成在下部和上部中的四对针和孔接合。上部包括三个在下部中央区域形成的井形开口。在上部和下部之间放置一片样品制备纸，其搁置在板弹簧上，板弹簧将纸的下面从凸起的下底座部抬起，在底座和纸之间留下小的空气间隙。纸的上面与上部的井形开口接触。使用者将液体样品加载到井形开口中，并且纸将液体样品通过毛细作用从加载位置带走，将细胞碎片留在涂敷的地方。向盒的上部施加压力推动纸与凸起的底座部接触，以提供坚固的底座，允许使用者将纸的部分移除用于进一步处理，用作例如活检针。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利说明】样品制备纸盒 专利
本专利技术涉及用于样品制备纸的盒，用于例如当制备用于分子生物学处理技术如核 酸扩增和/或检测的样品时。
技术介绍
PCR是用于将生物样品中的特定目标核酸序列扩增的传统方法。PCR经常用于法 医鉴定或物证检验目的或诊断目的，以探测可以用于例如识别DNA样本所属的个体的标 记，或者确定特定的病原体是否存在于样品中。为了这样的目的，获得快速的化验是有用 的，这可能意味着不能进行广泛的样品制备和清理。 多数临床样品需要进行一些处理以使得样品与PCR相容。已知的是，使用纸型过 滤器以移除抑制剂并提供用于PCR反应的清洁样品。本专利技术的多个目的中的一个是提供用于生物分析样品的便捷的样品制备方法，特 别是使用纸型过滤器。通过提供在其中可以放置用于样品制备的样品制备纸的外壳，部分 地达成上述目的。 专利技术概述根据本专利技术的第一个方面，提供一种样品制备盒，其包括： 下部，所述下部具有底座， 上部，所述上部可与所述下部接合并且可从所述下部移除，并且包括至少一个井 形开口；和 至少一个弹性构件，所述弹性构件当所述上部与所述下部接合时位于所述上部和 所述下部之间； 所述盒配置为使得样品制备纸可以容纳在置于所述井形开口附近的所述上部和 下部之间，并且将所述纸搁置在所述至少一个弹性构件上以使得将所述纸与所述下部的所 述底座分开；并且 其中向所述上部施加压力造成所述至少一个弹性部件压缩，并因此推动所述纸与 所述底座的至少一部分接触。 这种布置对样品处理有很多优点。具体地，所述井形开口将用于将液体样品引导 到样品纸，从而将样品定向和集中到纸上的一个小"点"。其中将纸从下部的底座分开的盒 的初始构造允许空气在纸之下流通，从而支持样品通过毛细作用进入纸并干燥。其中样品 纸与底座相接触的压缩后的构造允许使用者容易地（例如使用活检穿孔器）切掉样品纸的 部分，用于进一步处理和分析而不必须拆开盒并移除完整的纸。优选所述底座包括凸起部分，其配置为与所述井形开口对准并在压缩所述弹性构 件时与所述纸接触。 弹性构件优选是所述下部的元件，尽管特定实施方案中，弹性构件可以与下部和 上部都分开。优选所述盒包括两个、更优选四个弹性构件。所述弹性构件可以是板弹簧。所 述弹性构件优选与所述下部一体形成；例如，整体可以从一块成型的塑料材料形成。 优选所述上部包括多个井形开口；在优选的实施方案中，有三个这样的开口。 可以从塑料材料制造上部。优选地，所述上部是半透明和/或透明的。这允许 视觉确认样品纸知否在盒中。优选地，所述塑料材料是疏水的；例如可以是聚碳酸酯例如 Makrolon(RTM)。这有助于排斥液体样品并将其引导到所述井中以与所述样品纸接触。可以 功能化所述塑料材料。例如，用官能团修饰所述材料以帮助样品中的细胞材料的溶解。在 优选的实施方案中，用一中或多中杀生物剂功能化所述材料，杀生物剂优选为SiQAC，连同 衍生的样品纸如下描述。 在本专利技术的某些实施方案中，所述盒可以进一步包括置于所述上部和所述下部之 间的弹性构件。所述纸优选是纤维素材料；例如纤维素滤纸或纤维素基质。所述纤维素材 料可以是复合纸；例如，复合纤维素纸可以包括横流层，以从沉积在所述纸表面的所述样品 移除液体和低分子量污染物以及抑制剂。纤维素具有优点：其具有大量杀生物剂可以向其 附着的暴露的羟基。在优选的实施方案中，用一个或多个杀生物剂功能化所述纸，所述杀生 物剂能够i)弱化样品中的生物材料的细胞膜、细胞壁、病毒包膜或病毒壳体；或ii)溶解样 品中的细胞材料或病毒材料。 所述杀生物剂优选包括多个功能基团。所述功能基团优选包括连接部分，其与将 所述试剂连接到所述基质有关；疏水部分；和带电部分。所述疏水部分能够接触并渗透细 胞壁或细胞膜。在优选的实施方案中，所述疏水部分可以是烷基链，例如C5-C30烷基，优选 C10-C20烷基。随着所述烷基链渗透脆弱的细胞壁，将壁弱化和刺穿。所述带电部分优选带 正电，并且能吸引带电细胞壁，以及在接触细胞膜上能破坏离子流和动态平衡，从而帮助破 坏细胞并释放核酸。所述带电部分优选是季铵基团。所述连接部分可以包括羟基基团。 在优选的实施方案中，所述功能基团优选是烷基链（疏水部分），甲硅烷基基团 (连接部分）和氯化铵基团（带电部分）。 优选的杀生物剂包括甲硅烷基季铵化合物（SiQAC);特别是3-(三甲氧基甲硅烷 基）丙基二甲基十八烷基氯化铵（3-TPAC)。其他杀生物剂包括苯甲基氯化胺。通常认为， SiQAC的致命作用模式是通过以下过程：带正电分子到带负电细胞表面的吸收，细胞膜被 SiQAC分子上的亲脂性链的破坏，以及导致细胞溶解的通过膜的扩散。 本领域技术人员将会知晓可以使用其他合适的杀生物剂。通过以上描述的优选官 能基团的存在和目标生物样品的特性指导特定试剂的选择一一例如，在待处理的样品是哺 乳动物的细胞样品的情况下，则没有细胞壁可刺穿，且其他官能团可以是合适的。 可以用于本专利技术的其他杀生物剂的实例包括：a)遥爪聚（2-烷基-I，3- _唑啉）；b)具有通过PEtOx接枝的抗菌DDA基团的纤维素，其通过接触杀死附近的微生 物细胞（Bieser等（2011)，基于纤维素的接触-活化抗微生物的和潜在地自抛光的涂层 (Contact-ActiveAntimicrobialandPotentiallySelf-PolishingCoatingsBasedon Cellulose) ?Macromol.Biosci.，11，111-121)；c)皂角苷是类固醇或三萜类苷，在大量植物中常见，且早已公知具有对红细 胞膜的溶解作用，并且已知许多阜角苷是抗菌剂（Francis等，BritishJournalof Nutrition(2002)，88, 587-605)。对皂角苷的膜渗透性已进行了广泛研究。也已经观察到 这些结构上不同的化合物杀死原生动物以及作为抗真菌剂和抗病毒剂。当用皂角苷处理从 人红血球分离的细胞膜时，逐渐形成40-50 径的孔，相对的是人造膜中产生的80A° 的孔（Seeman等? 1973渗透和阜角苷溶血中膜孔的结构（Structureofmembraneholes inosmoticandsaponinhemolysis).JournalofCellBiology56,519-527)。 其他溶液中和表面上的抗菌聚合物的综述参见Siedenbiedel和Tiller(2012) Polymers，4,46-71〇 如上所述，盒的上部可以同样包括一种或多种杀生物剂。这些可以与存在于样品 纸中的杀生物剂相同或不同。在优选的实施方案中，盒和纸都用SiQAC功能化。 样品纸可以包括变色剂，以指示样品在何时和/或何处施加到纸。例如，当湿润和 /或干燥后，试剂可以改变颜色。样品纸可以包括标记以指示施加样品在何处；例如，打印 的记号。 在某些实施方案中，样品纸可以进一步包括一种或多种用于执行期望反应的试 剂；例如，纸可以包括冻干的的PCR试剂和/或冻干的酶。那么，当样品纸与反应容器中的 液体接触时，这些试剂将重构。以此方式，可以使多种试剂保持彼此分开，直到准备被激活 以进行反应。纸可包括多种试剂；这些试剂可组合在纸中，或者可保持分本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种样品制备盒，所述样品制备盒包括：下部，所述下部具有底座；上部，所述上部可与所述下部接合并且可从所述下部移除，并且包括至少一个井形开口；和至少一个弹性构件，所述弹性构件当所述上部与所述下部接合时位于所述上部和所述下部之间；所述盒配置为使得样品制备纸可以容纳在置于所述井形开口附近的所述上部和下部之间，并且将所述纸搁置在所述至少一个弹性构件上以使得将所述纸与所述下部的所述底座分开；并且其中向所述上部施加压力造成所述至少一个弹性部件压缩，并因此推动所述纸与所述底座的至少一部分接触。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：本杰明·科布，
申请(专利权)人：艾皮斯托姆有限公司，
类型：发明
国别省市：英国;GB